ATL細胞に発現するT細胞活性化抗原OX40の病態生理学的意義

ATL细胞表达的T细胞活化抗原OX40的病理生理意义

• 批准号: 09254231
• 负责人: 堀 利行
• 金额: $ 1.86万
• 依托单位: Kyoto University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 1997
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1997 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-09254231/
• 关键词: ATL; OX40; gp34

ATL細胞の臓器浸潤とin vovo増殖におけるOX40の役割について検討した。(1)新鮮ATL細胞におけるOX40発現 17例のATL患者から末梢血単核球またはリンパ節細胞を分離し、FACSにてOX40およびgp34の発現を調べところ、17例中15例で特別な刺激なしにOX40の発現を認めた。OX40のリガンドであるgp34は全例で陰性であった。リンパ節と皮膚病変部の生検標本の免疫組織染色でも浸潤白血病細胞がOX40を強く発現していた。また、十分な細胞数が得られた7例についてHUVECを用いた細胞接着実験を行い、少なくとも3例において抗OX40抗体または抗gp34抗体で抑制される有意の接着を観察した。(2)OX40の細胞内シグナル伝達機構 ヒトT細胞株HSB-2のOX40transfectantを用いてOX40の細胞内シグナル伝達機構を解析した。ゲルシフトアッセイにより、膜結合型または可溶型gp34添加30分後にNF一κBの活性化が認められた。OX40の細胞内ドメインのdeletion mutantを作成してそれぞれのtransfectantでのNF-kBの活性化を検討した結果、アミノ酸配列255-262に対応する領域(GGSFRTPI)が、NF-κBの活性化に必要であることが示された。TNF受容体ファミリーで受容体でシグナル伝達に関わることが報告されているTRAF分子群について、OX40との結合性およびシグナル伝達への関与を調べたところ、TRAF2、TRAF3、TRAF5がin vivoでOX40と結合することが示された。またTRAF2とTRAF5のdominant negative型の導入よってOX40刺激後のNF-κBの活性化が著明に抑制され、またTRAF3を同時に導入するとさらに抑制された。以上のことから、OX40のシグナル伝達においてNF-κBの活性化にはTRAF2とTRAF5が関与し、TRAF3はむしろ抑制的に働くのではないかと考えられた。

ATL cell infiltration and proliferation in vovovovovovox40 OX40. (1)Fresh ATL cell におけるOX40 appearance 17 cases of ATL patients performed isolation of peripheral blood nuclei and ganglion cells and FACS of OX40 Of the 17 cases, 15 out of 17 cases were of special stimulation. OX40のリガンドであるgp34はall casesでnegativeであった. Immunohistological staining of raw specimens of dermatological lesions and skin lesions showed that infiltrated leukemia cells were detected and OX40 was detected. 7 cases of また、10なcell numberられたについてHUVECをusing いたcells followed by 実験を行い、小なくとも3 cases are anti-OX40 antibodies and anti-gp34 antibodies are inhibited by anti-OX40 antibodies. (2) The intracellular transfection mechanism of OX40 was analyzed using the intracellular transfection mechanism of OX40 in the HSB-2 T cell line. Activation of NF-κB was confirmed after adding soluble gp34 for 30 minutes to ゲルシフアッセイにより and membrane-bound soluble gp34. OX40 intracellular deletion MutantをmadeしてそれぞれのtransfectantでのNF-kBのactivationを検したresult、アミノAcid Arrangement of 255-262 に対応する domain (GGSFRTPI) is necessary for the activation of NF-κB. TNF receptor ファミリーで Acceptor でシグナル伝达に关わることが report されているTRAF molecule group について, O The combination of vivoでOX40とcombinationすることが Showされた. The activation of NF-κB after the stimulation of OX40 was introduced into the dominant negative type of TRAF2 and TRAF5, and the activation of NF-κB was inhibited by the introduction of TRAF3 at the same time. Above, OX40's NF-κB activated NF-κB activated TRAF2とTRAF5 and し, TRAF3 はむしろ inhibited に働くのではないかと卡えられた.

项目成果

S.Kawamata: "The upregulation of p27/kipl by rapamycin results in Gl arrest of exponetrfally growins T cell lines" Blood. 91. 561-569 (1998)

S.Kawamata：“雷帕霉素对 p27/kipl 的上调导致 T 细胞系的指数生长停滞”血液。

A.Imura: "OX40 expressed on fresh lenkemic cells from ATL patimts mediates cell adheslon to vascular endothelial cells" Blood. 89. 2951-2958 (1997)

A.Imura：“来自 ATL 患者的新鲜贫血细胞上表达的 OX40 介导细胞粘附到血管内皮细胞”血液。

Y.Matsumura: "Localization of OX40/gp34 in inflammatory skin diseases" Archives of Dermatology. 289. 653-656 (1997)

Y.Matsumura：“OX40/gp34 在炎症性皮肤病中的定位”皮肤病学档案。

S.Kawamata: "Activation of OX40 signal transductin pathways leads to timer necrosis factor-associated foctor (TRAF)2-and TRAF5-mediated NF・kB activation" The Journal of Biological Chemistry. 273. 5808-5814 (1998)

S. Kawamata：“OX40 信号转导蛋白途径的激活导致定时器坏死因子相关因子 (TRAF)2 和 TRAF5 介导的 NF·kB 激活”《生物化学杂志》273. 5808-5814 (1998)。