ブファリンの標的Na,K-ATPase阻害と分化や細胞死の誘導機構解明と抗癌剤開発

蟾蜍灵靶向Na,K-ATP酶抑制、分化和细胞死亡诱导机制的阐明以及抗癌药物的开发

• 批准号: 09255257
• 负责人: 吉田 武美
• 金额: $ 1.6万
• 依托单位: Showa University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 1997
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1997 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-09255257/
• 关键词: ブファリン; Na^+,K^+-ATPase; アポトーシス; 分化誘導; U937細胞; 血管新生; カゼインキナーゼ2; トポイソメラーゼII

生薬センソ成分のブファリンは、細胞膜表面に普遍的に存在するNa^+,K^+-ATPaseの阻害を介して、ヒト白血病細胞株に対し分化やアポトーシスを誘導すると考えられている。本研究は、ブファリンの作用がMAKPカスケードを活性化すること、種々のプロトオンコジーンを変動させることなどの知見が、Na^+,K^+-ATPase阻害とどのように関連するかをさらに明確にし、ブファリンをリ-ド化合物とする新たな作用機構をもつ制ガン剤の開発を目的とする。1)ブファリンによるヒト単球性白血病細胞THP-1の分化誘導過程において、細胞周期変化とCD11bやCD14などの分化マーカー発現を、フローサイトメトリーにより解析した。ブファリンの濃度依存的に細胞はG2/M期で停止した。さらにG2/M期にある細胞で分化マーカー発現が強く認められた。2)ブファリンはウシ大動脈血管内皮細胞の増殖をG2/M期で停止させ、管空形成を阻害した。3)HL60細胞のトポイソメラーゼIIはブファリンにより18時間以内に著しく減少した。これに伴い、DNA断片化の経時的な増加が認められた。免疫組織学的検討により、カゼインキナーゼ2はブファリン処置後直ちに核内へ移行することを認めた。この際カゼインキナーゼ2は更に、トポイソメラーゼIIとの複合体を形成することを明らかにした。4)単独では分化誘導作用を示さない濃度において、ブファリンと他のブファジエノリドとの併用効果を検討した。ブファリンとシノブファギンあるいはレジブフォゲニンとの併用により、細胞毒性を示すことなく選択的に分化を誘導した。

The presence of a protein component in the cell membrane, Na^+,K^+-ATPase inhibition, and induction of differentiation in leukemia cell lines were investigated. The purpose of this study is to clarify the role of MAKP in the activation of MAKP, the role of Na^+,K^+-ATPase in the activation of MAKP, and the role of MAKP in the activation of MAKP. 1) Analysis of differentiation induction process, cell cycle transformation and differentiation induction of THP-1 cells. The concentration dependent cell cycle was arrested in G2/M phase. G2/M phase of cell differentiation 2) The proliferation of vascular endothelial cells in G2/M phase was stopped and the formation of vascular voids was inhibited. 3) HL60 cells were reduced within 18 hours after treatment. The DNA fragments were isolated from DNA fragments. Immunohistologic examination of nuclear metastasis after treatment The complex is formed in the middle of the night. 4) The effect of differentiation induction was studied in the concentration and combination of different factors. The first step is to increase the number of cells in the cell.

项目成果

Lee,D.Y.,et al.: "Butalin inhibits endothelial cell proliferation and angiogenesis in vitro" Life Sci.60(2). 127-134 (1997)

Lee,D.Y.,et al.：“Butalin 在体外抑制内皮细胞增殖和血管生成”Life Sci.60(2)。

Hashimoto,S.,et al.: "Bufalin reduces the level of Topoisomerase II in human leukenci a cells and atfects the cytotonicity of anticancer drugs" Leukemia Res.21(9). 875-883 (1997)

Hashimoto,S.,et al.：“Bufalin 降低人白细胞中拓扑异构酶 II 的水平并影响抗癌药物的细胞渗性”Leukemia Res.21(9)。

Watabe,M.,et al.: "Treatment of U937 cells with bufolin in duces the translocaion of Casein Kinase-2 and modulates the activity of Topoisomerase II prior to the induction of apotosis" Cell Growth Differen.8. 871-879 (1997)

Watabe,M.,et al.：“用bufolin处理U937细胞会导致酪蛋白激酶2的易位，并在诱导凋亡之前调节拓扑异构酶II的活性”细胞生长差异。8。