薬毒物の毒性発現におけるマイクロRNAの変動解析とその安全性評価への応用

药物毒物毒性表达的microRNA波动分析及其在安全性评价中的应用

• 批准号: 21659032
• 负责人: 吉田 武美
• 金额: $ 1.86万
• 依托单位: Showa University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Challenging Exploratory Research
• 财政年份: 2009
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2009 至 2010
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-21659032/
• 关键词: マイクロRNA; 肝毒性; 精巣毒性; 胎盤毒性; 毒性発現機構

本研究は、肝毒性、精巣毒性、胎盤毒性を有する薬毒物による各組織のマイクロRNA変動やその標的mRNA変動を解析し、毒性発現機構から安全性評価への応用を目的とするものである。肝毒性ではカニクイザルへのアセトアミノフェン静脈内投与後で変動したmiRNAをRT-PCRでの追加検証を行った結果、マイクロアレイで得られた変動との完全な整合性が確認できなかった。アカゲザルでの論文データ情報でカスタム作製し、使用したアレイの開示配列の信頼性、アカゲザルとカニクイザルの系統差の問題やカニクイザルの個体差などが出現など解決すべき問題点が出原し、今後の検討が必要である。エチレングリコールモノメチルエスエル投与後の精巣毒性では、病理変化の著明菜2000mpg投与群では,miR-760-5p, miR-188-5p, miR-134, miR-320は2～10倍の増加、及びmiR-92aとmiR-449a(精巣で最もい)発現は半減した。同時に、標的となるインヒビンBの変動の可能性、Bc12mRNA発現の上昇、ヒストン脱アセチル化酵素4の減少と5の上昇などが認められた(本研究内容はほぼ完成し、投稿原稿作成も終了し、投稿予定)。妊娠ラットへの6-メルカプトプリン誘発胎盤毒性では胎児四肢の発達障害、胎盤重量の減少傾向、マイクロRNA変動とカスパーゼー3抗体陽性細胞の迷路層での検出、血中へのマイクロRNAの放出などが明らかになった。各臓器毒性に伴うマイクロRNAの変動と標的mRNA変動の関連を一定程度示唆できることが可能となった。

This study is aimed at analyzing mRNA activity of target RNA in various tissues for hepatotoxicity, sperm toxicity, and placental toxicity, and at evaluating the safety of toxicity by toxicity development agencies. Hepatotoxicity is confirmed after intravenous administration of miRNA by RT-PCR. The paper data information in Akagel has a variety of problems such as the creation of a database, the reliability of the layout of the application, the system differences between Akagel and Kanikel, and the individual differences between Kanikel. However, the problems have been solved and future discussions will be necessary. After administration of 2000mpg,miR-760- 5p, miR-188- 5p, miR-134, miR-320 increased by 2~10 times, and miR-92a and miR-449a (the most important part of sperm) decreased by half. At the same time, the possibility of target B activity, the increase of Bc12 mRNA expression, the decrease of Bc12 mRNA expression, and the increase of Bc12 mRNA expression and Bc12 mRNA expression were identified. Pregnancy induced placental toxicity, fetal limb development impairment, tendency to decrease placental weight, detection of antibody-positive cells in the labyrinthine layer, and release of antibody-positive RNA in the blood. The relationship between the activity of target mRNA and the toxicity of each organ is shown to some extent.