ナトリウム・ヨードシンポータの構造と機能の解析

钠-碘同向转运体的结构与功能分析

• 批准号: 09257225
• 负责人: 小杉 眞司
• 金额: $ 1.15万
• 依托单位: Kyoto University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 1997
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1997 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-09257225/
• 关键词: ナトリウム・ヨードシンポータ; イオン輸送; ヨード濃縮障害; 甲状腺機能低下症; 瀰漫性甲状腺腫; 疾患遺伝子; loss-of-function mutation; 過剰発現

NIS(ナトリウム・ヨードシンポータ)によるイオン輸送のstoiciometryの解析のより、各陰イオン1分子と共役して輸送されるナトリウムイオン分子数は、3(SCN^-)、2(I^-)、1(CIO_4^-)であることを電気生理学的・生化学的手法により明らかとした。ヨード濃縮障害患者よりNIS遺伝子変異を初めて同定した。患者はThr354→Pro(ACA→CCA)のhomozygoteであった。変異部位は第9膜貫通部位の中央部であった。この変異は正常者81人には存在せず、heterozygoteであることが確認された患者の娘は甲状腺機能正常で、甲状腺腫もなく、劣性遺伝性疾患であることが裏付けられた。野生株と変異株(T354P)の発現ベクターを作成し、COS-7細胞にトランスフェクションした。変異NISを持つ細胞はヨード取り込みが著しく低下しており、疾患の直接の病因であることが証明された。しかし、コントロール細胞と比較すると、パークロレ-卜感受性のヨード取り込み能が僅かながら(野生株NISを発現した細胞の約0.4%)残っていた。Northern解析及びWestern解析ではNISメッセージ及びNIS蛋白は正常甲状腺と比較し著しく増加していた。ヨード濃縮障害では大量のヨードを摂取することにより、甲状腺機能が代償されることが知られている。弱い活性を有した変異NISがoverexpressionされることがその代償機構となっている可能性がある。

通过NIS（碘钠症状）对离子转运的stoiciemetry分析，电生理和生化方法表明，与每个阴离子分子结合传输的钠离子分子的数量为3（scn^ - ），2（i^ - ），和1（i^ - ），和1（cio_4^ - ）。 NIS基因突变首先在碘富集障碍患者中鉴定出来。该患者是具有Thr354→Pro（ACA→CCA）的纯合子。突变位点位于第九跨膜部位的中心。 81例正常患者没有这种突变，并且患者的女儿确认杂合子具有正常的甲状腺功能，没有果甘G，因此证明这是一种隐性遗传疾病。制备野生和突变菌株（T354p）的表达载体并转染到COS-7细胞中。携带突变体NI的细胞显着降低了碘摄取，表明它们是疾病的直接发病机理。但是，与对照细胞相比，剩下的略微高氯酸盐敏感的碘摄取能力（大约0.4％的表达野生菌株NIS的细胞）仍然存在。与正常甲状腺相比，北部和西方的分析显示，NIS消息和NIS蛋白的显着增加。众所周知，在碘富集疾病中，摄入大量碘会补偿甲状腺功能。具有弱活性的突变体的过表达可能是补偿机制。

项目成果

Muller J, Gondos B, Kosugi S, Mori T, Shenker A: "Severe testotoxicosis phenotype associated with a strongly activating mutation of the lutropin receptor." J Med Genet. (in press). (1998)

Muller J、Gondos B、Kosugi S、Mori T、Shenker A：“与促黄体素受体强烈激活突变相关的严重睾丸中毒表型。”

Kosugi S, Sugawa H, Mori T: "Epitope analvsis of the thyrotropin receptor,1997." Mol Cell Endocrinol. 128. 11-18 (1997)

小杉 S、须川 H、森 T：“促甲状腺素受体的表位分析，1997 年”。

Kosugi S, Mori T, Shenker A: "An anionic residue at position 564 is important for maintaining the inactive conformation of the human lutropin/choriogonadotropin receptor." Mol Pharmacol. (in press). (1998)

Kosugi S、Mori T、Shenker A：“564 位的阴离子残基对于维持人促黄体激素/绒毛膜促性腺激素受体的非活性构象非常重要。”

Sugawa H, Ueda M, Matsuda A, Hai A, Yoshida A, Kosugi S.: "Lack of measurable maximal capacity of inorganic iodide pool in non-thyroid cell." Thyroidology. (in press). (1998)

Sukawa H、Ueda M、Matsuda A、Hai A、Yoshida A、Kosugi S.：“非甲状腺细胞中缺乏可测量的无机碘池最大容量。”

Mori T, Sugawa H, Kosugi S, Ueda M, Inoue D, Akamizu T.: "Effectivaness of a short-term steroid treatment on the reduction in goiter size in antithyroid drug-treated patients with Graves' disease." Endocr J. 44. 575-580 (1997)

Mori T、Sukawa H、Kosugi S、Ueda M、Inoue D、Akamizu T.：“短期类固醇治疗对减少抗甲状腺药物治疗的格雷夫斯病患者甲状腺肿大小的有效性。”