糖蛋白ホルモン受容体膜貫通領域の構造と機能

糖蛋白激素受体跨膜结构域的结构和功能

• 批准号: 08671152
• 负责人: 小杉 眞司
• 金额: $ 1.28万
• 依托单位: Kyoto University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 1996
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1996 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-08671152/
• 关键词: 黄体化ホルモン受容体; G蛋白共役型受容体; 活性化型変異; 水素結合; 表現実験; 受容体活性化機構; セカンドメッセンジャー; アミノ酸構造

糖蛋白ホルモン受容体の中で特にLH(黄体化ホルモン)受容体を取り上げて、活性化型変異の分布の解析を行った。第6膜貫通部分にあるアスパラギン酸578は変異により活性化を起こすことが、研究代表者らにより、以前明らかにされたが、アスパラギンへの変異では活性化は起こさず、グルタミン酸、グリシン、セリン、ロイシンへの変異では活性化型となり、β-カルボニル基によって形成される水素結合が、非活性化状態維持のために重要であることが明らかとなった。タイロシン、フェニルアラニンへの変異では、更に強い活性化が起こることより、この位置に体積の大きなフェニル基が導入されることにより、受容体の非活性化状態が更に不安定化することが明らかとなった。第3細胞内ループのアスパラギン酸564も変異によって活性化を起こすが、アスパラギン酸578の場合とは逆に、それはグルタミン酸への変異では起こらず、アスパラギン他への変異で認められた。すなわち、アスパラギン酸564はその負電荷によって受容体の非活性化状態維持をしていることが明らかとなった。また、アスパラギン酸578とアスパラギン酸564に共に変異を導入することにより、活性化の程度は相加的になることから、これらの活性化機序は全く独立であることが証明された。アスパラギン酸578によって形成される水素結合の相手を探すため、コンピュータ解析を行ったところ、第7膜貫通へリックスのアスパラギン619がその候補と考えられた。アスパラギン酸578とアスパラギン619両方に変異を起こさせたところ、変異させたアミノ酸側鎖の長さの和が野生株とほぼ同じものでは、個々の変異で見られる活性化は欠如していた。すなわち、このダブル変異では野生株と同様の側鎖間の結合をもつことが考えられ、アスパラギン酸578とアスパラギン619が水素結合をして受容体の非活性化型状態を維持しているものと考えられた。

Analysis of the distribution of activated glycoprotein receptors and LH (luteinizing receptors) receptors. Research Representative for the 6th Membrane Penetrating Part にあるアスパラギンAcid 578 は変isoによりActivated を开こすことがらにより、 former clear らかにされたが、 アスパラギンへの変different ではactivated は出こさず、グルタMitacic acid, グリシン, セリン, ロイシンへの変isoでは activated type となり, β-カルボニルbased によIt is important to form a hydrogen bond and maintain the inactivated state.タイロシン, フェニアラニンへの変different では, にstrongいactivationがriseこることより, このpositionに Volumeの大きThe inactivation state of the receptor is changed by the introduction of the naphthyl base and the destabilization of the inactivated state of the receptor. The 3rd intracellular ループのアスパラギン acid 564も変isoによってactivated をriseこすが、アスパラギン acid 578のoccasion とはverseに、それはグルタミン sour への変different では出こらず、アスパラギン他への変differentでcognizeめられた.すなわち, アスパラギン acid 564はそのnegative charge によってacceptor inactive state maintenance をしていることが明らかとなった.また, アスパラギン acid 578 とアスパラギン acid 564 にに変isoを import することにより, activity The degree of chemicalization is added, and the activated activation machine sequence is fully independent and proven. Analytical analysis of アスパラギン acid 578 によって formed by されるhydrogen combined の相手をExplorer すため and コンピュータを行ったところ, the 7th film penetrates へリックスのアスパラギン619 がその candidate と考えられた.アスパラギン acid 578とアスパラギン619両squareに変differentを出こさせたところ、変differentさせたアミノThe acid side lock's long さの and the wild strain とほぼ are the same as じものでは, and the individual 々の変different で见られるactivated は is not as good as していた.すなわち, このダブル変different では wild strain と同様のlateral interlocking のcombination をもつことが卡えられ, アスパラギン acid 5 78とアスパラギン619がhydrogen-binding receptor is in an inactivated state and is maintained in an inactivated state.

项目成果

Kosugi S,Sugawa H,Mori T: "Epitope analysis of the thyrotropin receptor,1997" Mol Cell Endocrinol. (in press). (1997)

小杉 S、须川 H、森 T：“促甲状腺素受体的表位分析，1997”Mol Cell Endocrinol。

Kosugi S,Mori T: "Cysteine-699,a possible palmitoylation site of the thyrotropin receptor,is not crucial for cAMP or phosphoinositide signaling but is necessary for full surface expression." Biochem Biophys Res Commun. 221. 636-640 (1996)

Kosugi S、Mori T：“半胱氨酸-699 是促甲状腺素受体的一个可能的棕榈酰化位点，对于 cAMP 或磷酸肌醇信号传导并不重要，但对于完整的表面表达是必需的。”

小杉眞司、森徹: "TSH受容体のアゴニストによる活性化機構。" 医学のあゆみ. 178. 273-277 (1996)

Shinji Kosugi，Toru Mori：“激动剂的 TSH 受体激活机制。” 医学史 178. 273-277 (1996)

Yoshida A,Sasaki N,Mori A,Taniguchi S,Mitani Y,Ueta Y,Hattori K,Sato R,Hisatome I,Mori T,Shigemasa C,Kosugi S: "Different electrophysiological character of I^-、CIO_4^- and SCN^- in the transport by Na^+/I^- symporter" Biochem Biophys Res Commun. (in press

Yoshida A、Sasaki N、Mori A、Taniguchi S、Mitani Y、Ueta Y、Hattori K、Sato R、Hisatome I、Mori T、Shigemasa C、Kosugi S：“I^-、CIO_4^- 和 SCN 的不同电生理特征^- 在 Na^+/I^- 同向转运蛋白的运输中”Biochem Biophys Res Commun.（正在出版）

Kosugi S.,Matsuda A,Hai N,Aoki N,Sugawa H,Mori T: "Aspartate-474 in the first exoplasmic loop of the thyrotropin receptor is crucial for receptor activation" FEBS Lett. (in press). (1997)

Kosugi S.、Matsuda A、Hai N、Aoki N、Sukawa H、Mori T：“促甲状腺素受体第一个外质环中的 Aspartate-474 对于受体激活至关重要” FEBS Lett。