糖蛋白ホルモン受容体膜貫通領域の構造と機能

糖蛋白激素受体跨膜结构域的结构和功能

基本信息

批准号：
08671152
负责人：
小杉眞司
金额：
$ 1.28万
依托单位：
Kyoto University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
财政年份：
1996
资助国家：
日本
起止时间：
1996 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

糖蛋白ホルモン受容体の中で特にLH(黄体化ホルモン)受容体を取り上げて、活性化型変異の分布の解析を行った。第6膜貫通部分にあるアスパラギン酸578は変異により活性化を起こすことが、研究代表者らにより、以前明らかにされたが、アスパラギンへの変異では活性化は起こさず、グルタミン酸、グリシン、セリン、ロイシンへの変異では活性化型となり、β-カルボニル基によって形成される水素結合が、非活性化状態維持のために重要であることが明らかとなった。タイロシン、フェニルアラニンへの変異では、更に強い活性化が起こることより、この位置に体積の大きなフェニル基が導入されることにより、受容体の非活性化状態が更に不安定化することが明らかとなった。第3細胞内ループのアスパラギン酸564も変異によって活性化を起こすが、アスパラギン酸578の場合とは逆に、それはグルタミン酸への変異では起こらず、アスパラギン他への変異で認められた。すなわち、アスパラギン酸564はその負電荷によって受容体の非活性化状態維持をしていることが明らかとなった。また、アスパラギン酸578とアスパラギン酸564に共に変異を導入することにより、活性化の程度は相加的になることから、これらの活性化機序は全く独立であることが証明された。アスパラギン酸578によって形成される水素結合の相手を探すため、コンピュータ解析を行ったところ、第7膜貫通へリックスのアスパラギン619がその候補と考えられた。アスパラギン酸578とアスパラギン619両方に変異を起こさせたところ、変異させたアミノ酸側鎖の長さの和が野生株とほぼ同じものでは、個々の変異で見られる活性化は欠如していた。すなわち、このダブル変異では野生株と同様の側鎖間の結合をもつことが考えられ、アスパラギン酸578とアスパラギン619が水素結合をして受容体の非活性化型状態を維持しているものと考えられた。

在糖蛋白激素受体中，特别特征LH（黄体生成激素）受体，并分析了活化突变的分布。 The researchers previously revealed that aspartic acid 578, located in the sixth transmembrane section, is activated by mutation, but it has been revealed that mutations to asparagine do not cause activation, and mutations to glutamic acid, glycine, serine, and leucine make it an activated form, and that hydrogen bonds formed by the β-carbonyl group are important for maintaining the inactivated state.染色质和苯丙氨酸的突变导致了更强的激活，并且发现在该位置引入大型苯基基团进一步破坏了受体的失活状态。在第三个细胞内环中的天冬氨酸564也通过突变激活，但与天冬氨酸578不同，这不是由突变引起的谷氨酸，而是对天冬酰胺和其他人的突变观察到。换句话说，已经揭示了天冬氨酸564由于其负电荷而保持受体的灭活状态。此外，通过在天冬氨酸578和天冬氨酸564中引入突变，激活程度变得累累，并且已证明这些激活机制是完全独立的。进行计算机分析以找到由天冬氨酸578形成的氢键伴侣，第七跨膜螺旋中的天冬酸酯619被认为是候选者。对天冬氨酸578和天冬酸酯619进行了突变，并且当突变的氨基酸侧链的长度与野生菌株中的长度大致相同时，就缺乏在单个突变中看到的激活。换句话说，这种双重突变被认为具有与野生菌株相似的侧链之间的结合，并且人们认为天冬氨酸578和天冬酸酯619氢键可以维持灭活的受体状态。

项目成果

期刊论文数量（15）

专著数量（0）

科研奖励数量（0）

会议论文数量（0）

专利数量（0）

Kosugi S,Sugawa H,Mori T: "Epitope analysis of the thyrotropin receptor,1997" Mol Cell Endocrinol. (in press). (1997)

小杉 S、须川 H、森 T：“促甲状腺素受体的表位分析，1997”Mol Cell Endocrinol。

DOI：
发表时间：
期刊：
影响因子：
0
作者：
通讯作者：

Kosugi S.,Matsuda A,Hai N,Aoki N,Sugawa H,Mori T: "Aspartate-474 in the first exoplasmic loop of the thyrotropin receptor is crucial for receptor activation" FEBS Lett. (in press). (1997)

Kosugi S.、Matsuda A、Hai N、Aoki N、Sukawa H、Mori T：“促甲状腺素受体第一个外质环中的 Aspartate-474 对于受体激活至关重要” FEBS Lett。

DOI：
发表时间：
期刊：
影响因子：
0
作者：
通讯作者：

Yoshida A,Sasaki N,Mori A,Taniguchi S,Mitani Y,Ueta Y,Hattori K,Sato R,Hisatome I,Mori T,Shigemasa C,Kosugi S: "Different electrophysiological character of I^-、CIO_4^- and SCN^- in the transport by Na^+/I^- symporter" Biochem Biophys Res Commun. (in press

Yoshida A、Sasaki N、Mori A、Taniguchi S、Mitani Y、Ueta Y、Hattori K、Sato R、Hisatome I、Mori T、Shigemasa C、Kosugi S：“I^-、CIO_4^- 和 SCN 的不同电生理特征^- 在 Na^+/I^- 同向转运蛋白的运输中”Biochem Biophys Res Commun.（正在出版）