体内時計の光位相同調とメラトニン出力系の調節メカニズム
生物钟的光相位同步及褪黑激素输出系统的调节机制
基本信息
- 批准号:11233202
- 负责人:
- 金额:$ 39.74万
- 依托单位:
- 依托单位国家:日本
- 项目类别:Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
- 财政年份:1999
- 资助国家:日本
- 起止时间:1999 至 2002
- 项目状态:已结题
- 来源:
- 关键词:
项目摘要
交付申請書に記載の研究実施計画に沿って研究を遂行し、下記の成果を得た。1.光依存的転写調節に関わる遺伝子配列(光応答エレメント)を同定するため、光に応答するピノプシン遺伝子のプロモータの解析を行った。その結果、18塩基からなる光応答エレメントを同定することに成功した。また、ゲルシフト解析の結果、この光エレメントに作用する因子は、肝臓等の種々の臓器に発現する転写抑制因子であることがわかった。2.概日時計発振系におけるMAPキナーゼの生理的役割の解明を目指して、咋年度に続きMAPキナーゼの標的分子を探索した。In vitroでのキナーゼアッセイの結果、BMAL1に加え、クリプトクローム(CRY1およびCRY2)がMAPキナーゼによってリン酸化されることが判明した。転写アッセイに基づく機能解析の結果、MAPキナーゼによるリン酸化に伴ってクリプトクロームの転写抑制能が修飾されることが分かった。そこで、リン酸化部位を特異的に認識する抗体を作製し、このようなリン酸化が生体内でおこっているかどうかを調べた。その結果、培養細胞において強制発現させたCRY1およびCRY2の特定のアミノ酸残基がMAPキナーゼによってリン酸化されることが明らかとなった。3.エクソロドプシンプロモータは、ゼブラフィッシュにおいて松果体特異的な遺伝子発現を誘導する。このプロモータを利用し、概日時計の発振における時計遺伝子産物(BMAL1およびBMAL2)の機能を明らかにすべく、これらBMALのドミナントネガティブ体を松果体特異的に発現するトランスジェニックゼブラフィッシュを複数系統樹立した。現在、これら個体のメラトニンリズムの解析を進めている。これと並行して、エクソロドプシンプロモータにおいて、松果体特異的な遺伝子発現を誘導するエレメントを決定しPIPE(Pineal Expression Promoting Element)と命名した。
Submit the application to document the implementation plan of the study and record the results. 1. Light dependent modulation is associated with the determination of the distribution of information and the analysis of the distribution of information. The results of the 18-day survey were successful. The results of the analysis, the effect of the light on the gene expression and the inhibition factor of the gene expression of the gene expression are as follows: 2. The aim of this paper is to explore the molecular basis of the physiological function of MAP in the future. In vitro, the results of BMAL1, CRY1, CRY2 and MAP are clear. The results of functional analysis of the matrix, MAP, pH, pH In vivo, the antibody is regulated by the specific site of acidification. As a result, cell culture was stressed to produce CRY1 and CRY2 with specific acid residues. 3. Pineal-specific gene expression is induced in the brain. The function of these timer products (BMAL1 and BMAL 2) is described in detail. The function of these timer products (BMAL1 and BMAL2) is described in detail. The function of these timer products (BMAL1 and BMAL2) is described in detail. The function of these timer products (BMAL 2) is described in detail. Now, the individual's profile is analyzed. Pineal Expression Promoting Element (PIPE) is a pineal Expression Promoting Element (PIE).
项目成果
期刊论文数量(129)
专著数量(0)
科研奖励数量(0)
会议论文数量(0)
专利数量(0)
Takeda,M.: "Ionotropic glutamate receptors expressed in human retinoblastoma Y79 cells."Neurosci.Lett.. 294. 97-100 (2000)
Takeda,M.:“在人视网膜母细胞瘤 Y79 细胞中表达的离子型谷氨酸受体。”Neurosci.Lett.. 294. 97-100 (2000)
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- 发表时间:
- 期刊:
- 影响因子:0
- 作者:
- 通讯作者:
Okano,T.: "Photoreceptors in pineal gland and brain : Cloning, localization and over-expression.(分担執筆)"Methods in Enzymology"on"Vertebrate Phototransduction and the Visual Cycle"(K.Palczewski,ed.)"Academic Press. 849(278-291) (2000)
Okano, T.:“松果体和大脑中的光感受器:克隆、定位和过度表达。“酶学方法”关于“脊椎动物光转导和视觉周期”(K.Palczewski,编辑)“学术出版社 .849(278) -291) (2000)
- DOI:
- 发表时间:
- 期刊:
- 影响因子:0
- 作者:
- 通讯作者:
Shouno, O.: "Characterization of N-acylation of Goα purified from bovine retinas"NeuroRepot. 10. 2999-3002 (1999)
Shouno, O.:“从牛视网膜纯化的 Goα 的 N-酰化特征”NeuroRepot. 10. 2999-3002 (1999)。
- DOI:
- 发表时间:
- 期刊:
- 影响因子:0
- 作者:
- 通讯作者:
Moriyama, Y.: "Synaptic-like microvesicles, synaptic vesicle counterparts in endocrine cells, are involved in a novel regulatory mechanism for hormonal synthesis and secretion"J. Exp. Biol.. 203. 117-125 (2000)
Moriyama,Y.:“突触样微泡,内分泌细胞中的突触小泡对应物,参与激素合成和分泌的新调节机制”J.
- DOI:
- 发表时间:
- 期刊:
- 影响因子:0
- 作者:
- 通讯作者:
Sanada, K: "Mitogen-activated protein kinase phosphorylates and negatively regulates basic helix-loop-helix-PAS transcription factor BMAL1"J.Biol.Chem.. 277. 267-271 (2002)
Sanada, K:“丝裂原激活蛋白激酶磷酸化并负调节碱性螺旋-环-螺旋-PAS 转录因子 BMAL1”J.Biol.Chem.. 277. 267-271 (2002)
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