Molecular dissection of robust and flexible circadian clock and its control of animal physiology

稳健灵活的生物钟的分子解剖及其对动物生理的控制

• 批准号: 17H01442
• 负责人: 深田 吉孝
• 金额: $ 27.62万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (A)
• 财政年份: 2017
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2017-04-01 至 2018-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-17H01442/
• 关键词: サーカディアンリズム; 光位相制御; 翻訳後修飾シグナル; 修飾クロノコード; 細胞内レドックス; マウス胎児繊維芽細胞; 細胞時計; ルシフェラーゼ

本研究課題では、時計遺伝子の転写後制御や翻訳・翻訳後制御、さらには根源的な振動子となり得る細胞内レドックス変化など新しい細胞内イベントの日内変動を追究しようと計画した。この目的に沿った研究課題の一つとして、非光情報の伝達経路としてASKキナーゼが体内時計の周期や位相を制御する可能性を調べるため、時計タンパク質PER2とルシフェラーゼとの融合タンパク質を発現するPER2:: Lucノックインマウスを活用し、個々の細胞に内在する時計振動を可視化することを試みた。具体的には、ASKキナーゼの活性を変化させるような刺激がマウス胎児繊維芽細胞時計に与える効果を調べ、この効果が内在性ASKの欠損によって消失するか否かを確認しようと試みた。この目的の遂行には、当研究室が所有している生物発光測定装置をフル稼働しても、非常に数多くの実験条件における発光リズムを効率よく記録するためには実験とデータ解析が追いつかないことが判明した。そこで研究の効率的推進のため、研究計画書に記載した通り、本研究課題の採択直後に高感度生物発光測定装置（中立電機株式会社製）を購入して研究室に設置し、速やかに実験と解析を開始した。その結果、細胞内レドックス状態に応答して細胞リズムが大きく変化することを見出し、細胞内レドックスと概日時計の連関機構への手がかりを得た。

This research topic で は, hour meter but 伝 の planning to write after suppression や turn 訳 · 訳 after suppression, さ ら に は roots な vibrator と な り have る intracellular レ ド ッ ク ス variations change な ど new し い intracellular イ ベ ン ト の days - move し を investigated よ う と project し た. こ の purpose に along っ た research topic の a つ と し て, non light intelligence の 伝 da 経 road と し て ASK キ ナ ー ゼ が inner clock や の cycle phase を suppression す る possibility を adjustable べ る た め, hour meter タ ン パ ク qualitative PER2 と ル シ フ ェ ラ ー ゼ と の fusion タ ン パ ク qualitative を 発 now す る PER2: : Luc ノ ッ ク イ ン マ ウ ス を appropriate し, a 々 の cells に inner す る vibration meter in を visualization す る こ と を try み た. Specific に は, ASK キ ナ ー ゼ を の activity - the さ せ る よ う な stimulus が マ ウ ス tire where 繊 d bud cells with え に る unseen fruit を べ, こ の unseen fruit が internality ASK の owe loss に よ っ て disappear す る か no か を confirm し よ う と try み た. こ の purpose の carries out に は, when all laboratory が し て い る biological 発 light measurement device を フ ル grain 働 し て も, very に more く の be 験 conditions に お け る 発 light リ ズ ム を sharper rate よ く record す る た め に は be 験 と デ ー タ parsing が chase い つ か な い こ と が.at し た. そ こ で research の working rate of advance の た め に records, research proposal し た り, this research topic の mining 択 straight after に Gao Gan degree of biological 発 light measurement device (neutral motor corporation system) を buy し て laboratory に し, speed や か に be 験 と parsing を began し た. そ の results, intracellular レ ド ッ ク ス state に 応 answer し て cells リ ズ ム が big き く variations change す る こ と を see し, intracellular レ ド ッ ク ス と almost daily hour meter の even masato institutions へ の hand が か り を た.

项目成果

深田研究室

深田实验室