脂質修飾にスポットライトをあてたG蛋白質と光シグナリングの解析

G 蛋白和光学信号传导分析，重点关注脂质修饰

• 批准号: 18057007
• 负责人: 深田 吉孝
• 金额: $ 3.71万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 2006
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2006 至 2007
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-18057007/
• 关键词: G蛋白質; 光受容体; 網膜; 桿体; 脂質修飾; 松果体; 視覚; 概日時計

交付申請書に記載の研究実施計画に沿って研究を遂行し、下記の成果を得た。Gtγ-C71stopノックインマウスの視細胞の解析: 網膜光受容細胞のG蛋白質トランスデューシンの脂質修飾の役割を調べるため、イソプレニル化Cys残基を欠失したトランスデューシンγサブユニット(非修飾型Gtγ)を発現する組換えマウス(C71stopマウス)を用いて,以下の解析を行った。1)C71stopマウスの網膜より膜試料を調製して生化学的な解析を行い、発現しているGtγのC末端修飾の欠失を確認した。2)Gtγをはじめとする一群の光シグナル伝達系タンパク質の網膜における発現レベルを特異的抗体を用いて調べた結果、C71stopマウス網膜においてはGtαサブユニットの蛋白質発現量が野生型と比べて大きく減少していることが判明した。3)電気生理学的手法(ERG)を用いた個体レベルでの解析によりC71stopマウス網膜の光反応を調べたところ、視細胞(桿体)に由来する成分が野性型マウスの場合と比較して著しく減弱していることがわかった。概日光受容蛋白質メラノプシンの解析: 前年度の研究により,時計組織であるニワトリ松果体には2種類のメラノプシン遺伝子(Opn4-1およびOpn4-2)が発現し,さらに各遺伝子につき2種類のスプライスバリアント(LおよびS)が存在することがわかっている。そこで,これらのスプライスバリアントを培養細胞HEK293において強制発現させ,発色団11-cis-retinalとの再構成を試みたところ,Opn4-1SおよびOpn-4-2L試料において色素の生成が確認された。さらに,これらの色素を粗精製して分光学的解析を行ったところ,それぞれの吸収極大波長は476nmおよび484nmと推定され,いずれのメラノプシンアイソフォームも青色感受性の光受容体であることが明らかになった。

The delivery of the application record, the study, the implementation of the plan, the completion of the research, and the achievement of the results. Gt γ-C71stop cell analysis: network photocapacitive cell G protein, protein, fat, fat, 1) C71stop network membrane materials are used to analyze the analytical line of biochemistry, and the loss of Gt γ C-terminal repair is not confirmed. 2) A group of Gt gamma phosphodeoxynucleotides were used to detect antibodies against specific antibodies. The results showed that Gt alpha antibodies were detected in the network, and the protein levels in the wild type were lower than those in the wild type. 3) the method of computer physiology (ERG) is used to analyze the light reflection of the C71stop network, the origin of the cell (body), the composition, the wild type, the composition, the composition, the strength, the sensitivity, the origin, the origin General daylight capacitive protein analysis: in the previous year's study, the organization tested the pineal gland Opn4-2 (Opn4-1), and found that there was a significant difference in the pineal gland, pineal gland and pineal gland. In this case, we need to make sure that the color 11-cis-retinal is reformed into a compound, Opn4-1s, Opn-4-2L, pigment, color, color, The optical analysis of the crude and refined pigments is based on the optical analysis of the pigment, the optical analysis, the determination of the color of the pigment, the optical analysis, the absorption of very large wavelengths, the optical sensitivity, the sensitivity,

项目成果

図説 分子病態学 改訂4版の「視覚異常症」の項を分担執筆

与人合着《分子病理学图解》第四修订版中“视觉异常”部分

• 发表时间: 2008
• 作者: Hideaki Tomura;Jin-peng Liu;Mayumi Komachi;Wang Ju Qiang;Masayuki Tobo;Hiromi Nochi;Koichi Tamoto;Alatangaole Damirin;Koichi Sato;Chihiro Mogi;and Fumikazu Okajima;Daisuke Kojima;Nobuhiro Nakao;Takahiro Tsuji;Fumiko Shimizu;Naoyuki Asada;Masaki Torii;Hiroaki Mano;Nobuhiro Kurabayashi;Yoko Kubo;Yasutaka Wada;真野 弘明;浅田 直之;小島 大輔;金 尚宏;Hikari Yoshitane;玉井 総一;Masaki Torii;Shimizu Kimiko;Hikari Yoshitane;金 尚宏;景山 伯春;Yoshitaka Fukada;Yoshitaka Fukada;Shimizu Kimiko;白木 知也;深田 吉孝;Yoshitaka Fukada;Daisuke Kojima;Hikari Yoshitane;Nobuhiro Kurabayashi;Naohiro Kon;深田 吉孝(分担執筆)
• 通讯作者: 深田 吉孝(分担執筆)

21世紀の動物科学シリーズ:第9巻『動物の感覚とリズム』の「序章:感覚系と生物時計の対比と連関」の項を分担執筆

21世纪动物科学系列：共同撰写第9卷“动物感官和节律”中的“简介：感觉系统和生物钟之间的比较和联系”部分。

• 发表时间: 2007
• 作者: Hideaki Tomura;Jin-peng Liu;Mayumi Komachi;Wang Ju Qiang;Masayuki Tobo;Hiromi Nochi;Koichi Tamoto;Alatangaole Damirin;Koichi Sato;Chihiro Mogi;and Fumikazu Okajima;Daisuke Kojima;Nobuhiro Nakao;Takahiro Tsuji;Fumiko Shimizu;Naoyuki Asada;Masaki Torii;Hiroaki Mano;Nobuhiro Kurabayashi;Yoko Kubo;Yasutaka Wada;真野 弘明;浅田 直之;小島 大輔;金 尚宏;Hikari Yoshitane;玉井 総一;Masaki Torii;Shimizu Kimiko;Hikari Yoshitane;金 尚宏;景山 伯春;Yoshitaka Fukada;Yoshitaka Fukada;Shimizu Kimiko;白木 知也;深田 吉孝;Yoshitaka Fukada;Daisuke Kojima;Hikari Yoshitane;Nobuhiro Kurabayashi;Naohiro Kon;深田 吉孝(分担執筆);深田 吉孝(分担執筆)
• 通讯作者: 深田 吉孝(分担執筆)

Phosphorylation of mCRY2 at Ser557 in the hypothalamic suprachiasmatic nucleus of the mouse

小鼠下丘脑视交叉上核中 mCRY2 Ser557 的磷酸化

• 发表时间: 2006
• 期刊: Chronobiology International 23・1(印刷中)
• 作者: Numata;T.;Fukai;S.;Ikeuchi;Y.;Suzuki;T.;Nureki;O.;Nobuhiro Kurabayashi
• 通讯作者: Nobuhiro Kurabayashi

Pharmacological analysis of clock protein kinases participating in molecular oscillation in RAT-1 fibroblasts

参与RAT-1成纤维细胞分子振荡的时钟蛋白激酶的药理学分析

• 发表时间: 2007
• 作者: Hideaki Tomura;Jin-peng Liu;Mayumi Komachi;Wang Ju Qiang;Masayuki Tobo;Hiromi Nochi;Koichi Tamoto;Alatangaole Damirin;Koichi Sato;Chihiro Mogi;and Fumikazu Okajima;Daisuke Kojima;Nobuhiro Nakao;Takahiro Tsuji;Fumiko Shimizu;Naoyuki Asada;Masaki Torii;Hiroaki Mano;Nobuhiro Kurabayashi;Yoko Kubo;Yasutaka Wada;真野 弘明;浅田 直之;小島 大輔;金 尚宏;Hikari Yoshitane;玉井 総一;Masaki Torii;Shimizu Kimiko;Hikari Yoshitane;金 尚宏;景山 伯春;Yoshitaka Fukada;Yoshitaka Fukada;Shimizu Kimiko;白木 知也;深田 吉孝;Yoshitaka Fukada;Daisuke Kojima;Hikari Yoshitane;Nobuhiro Kurabayashi;Naohiro Kon
• 通讯作者: Naohiro Kon

GRK1 and GRK7: Unique cellular distribution and widely different activities of opsin phosphorylation in the zebrafish rods and cones

• DOI: 10.1111/j.1471-4159.2006.03920.x
• 发表时间: 2006-08
• 期刊: Journal of Neurochemistry
• 影响因子: 4.7
• 作者: Yasutaka Wada;Junichi Sugiyama;T. Okano;Y. Fukada