权益分类	功能权益	普通用户	{{item.name}}会员
{{category.name}}	{{benefitItem.name}}

Mcm蛋白質ならびにMcmと相互作用する蛋白質複合体による複製モニター機構

MCM蛋白和与Mcm相互作用的蛋白复合物的复制监控机制

基本信息

批准号：
11241201
负责人：
升方久夫
金额：
$ 84.16万
依托单位：
Osaka University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
1999
资助国家：
日本
起止时间：
1999 至 2003
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-11241201/
关键词：
複製開始複合体細胞周期複製チェックポイント DNAヘリカーゼ染色体リン酸化制御複製開始点複製開始前複合体リン酸化複製開始点認識チェックポイント制御細胞周期制御複製開始点認識複合体チェックポイント

项目摘要

1.複製開始モニター機構におけるMCMの機能制御に関して以下の成果を得た。(1)細胞周期でのMCM4リン酸化について:マウスMcm4のアミノ末端領域の6箇所のCDKリン酸化は、MCM4/6/7ヘリカーゼ機能を抑制する。各リン酸化はクロマチン結合性、結合するクロマチン領域、細胞周期でのリン酸化レベルなど異なるため、特異的なゲノム複製抑制機能に関与する可能性か示唆された。(2)DNA複製チェックポイント系でのMCM4リン酸化の促進:ヒトHeLa細胞や正常繊維芽細胞のMcm4は紫外線、ヒドロキシ尿素によって活性化されるATR/ATMに依存して、CDKを介してリン酸化される。よって、チェックポイント系でのゲノム複製抑制反応に重要な役割を担うことが示唆される。2.MCM複合体と相互作用する因子の機能に関して以下の知見を得た。(1)分裂酵母Mcm5変異株の解析から、複製前複合体から複製開始複合体への移行段階に、Cdc45が結合せずS1d3が結合する新たな中間体を見いだした。(2)分裂酵母MCMとCdc45は、複製フォーク停止に伴う複製チェックポイント因子Cds1の活性化に必要であり、また停止した複製フォークの再構築にも関与することを見いだした。(2)アフリカツメガエル卵無細胞複製系を用いて複製開始に必要な新規因子として4種類の蛋白質(S1d5-Psf1-Psf2-Psf3)からなる新規複合体GINS(go-ichi-ni-san)を同定した。(3)複製開始とチェックポイントに働いている酵母Dpb11/Cut5のカエルホモログを同定した。これらカエルホモログは卵抽出液の系で複製開始に必要であり複製開始複合体の形成に働いている事を明らかにした。

1. The following results were obtained for the functional control of MCM when replication started. (1)MCM4/6/7 cell cycle inhibition: MCM4/6/7 cell cycle inhibition Each enzyme has the ability to bind, bind, domain, cell cycle, and specifically inhibit replication. (2)DNA replication was promoted by MCM4 acidification in HeLa cells and normal cells. The activation of MCM4 in HeLa cells was dependent on ATR/ATM and CDK. This is the first time that a person has ever been involved in a replication inhibition reaction. 2. The function of MCM complex and interaction factors is related to the following knowledge. (1)Analysis of mutant strains, pre-replication complex, replication initiation complex, transition stage, Cdc45 binding, S1d3 binding, novel intermediate of Mcm5 (2)Dissociation of yeast MCM Cdc45 is necessary for the activation of replication factor Cds1. (2)4 kinds of proteins (S1d5-Psf1-Psf2-Psf3) are identified by the new regulation complex GINS(go-ichi-ni-san). (3)Replication starts at the same time as yeast Dpb11/Cut5. This is the first time that the replication of the egg extract system has started.