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出芽酵母DNAポリメラーゼεが関与するDNA複製異常認識の分子機構

酿酒酵母DNA聚合酶ε识别DNA复制异常的分子机制

基本信息

批准号：
11241203
负责人：
真木智子
金额：
$ 20.22万
依托单位：
Nara Institute of Science and Technology
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
1999
资助国家：
日本
起止时间：
1999 至 2003
项目状态：
已结题

项目摘要

これまでに出芽酵母DNAポリメラーゼεとその部分複合体Dpb3p-Dpb4pが二本鎖DNA結合能を有することを示した。Dpb3p-Dpb4p複合体はヒストン様のヘテロ二量体であり、Polεとクロマチンの相互作用に関わることが示唆される。Polεの二本鎖DNA結合能の細胞内での役割を明らかにする目的で研究を行い、平成15年度は以下のことを明らかにした。(1)DNAポリメラーゼεの二本鎖DNA結合能はDpb3p-Dpb4p複合体に担われている。ヘテロ二量体形成は正常であるが、二本鎖DNA結合能が低下するアミノ酸置換型Dpb3pおよびDpb4pを分離し、それらを含む変異型Polεを精製したところ、そのサブユニット構成、複合体の安定性、およびDNAポリメラーゼ活性はすべて野生型Polεのそれと同じであった。一方、これら変異型Polεの二本鎖DNA結合能は野生型に比べ顕著に低下していた。以上の結果より、Polεの二本鎖DNA結合能は確かにDpb3p-Dpb4p部分複合体に担われていることが示された。(2)DNAポリメラーゼεの二本鎖DNA結合能の役割本特定領域の荒木ら(国立遺伝学研究所)により、dpb3欠損株においてはテロメア近傍領域の遺伝子サイレンシングの状況が野生型の場合と著しく異なることが報告された。通常何世代にも渡ってエピジェネティックに維持されるサイレンシングの状態(転写抑制の状態)が、この株では安定に維持されない。そこで、二本鎖DNA結合能が低下したPolεを産生するdpb3(K18D)変異株におけるテロメア近傍領域のサイレンシングを調べたところ、dpb3欠損株と同様の異常が観察された。この結果はPolεの二本鎖DNA結合能がテロメア領域におけるヘテロクロマチン形成に関わる機能である可能性を示唆するものである。Polεはテロメア領域の複製とヘテロクロマチン形成を共役させる働きを持つのかもしれない。

The combination of yeast DNA germ cell ε gene partial complex Dpb3p-Dpb4p and ordinary university DNA could not be detected. The Dpb3p-Dpb4p complex contains two-dimensional DNA, Pol ε, interaction and instigation. The combination of Pol ε and DNA of ordinary universities can help you to study the situation in the following years in Pingcheng for 15 years. The main results are as follows: (1) the combination of DNA and DNA in an ordinary university can act as a complex of Dpb3p-Dpb4p. The two-dimensional structure of DNA is normal, the combination of ordinary universities and ordinary universities can lead to the formation of normal DNA, the combination of ordinary universities and ordinary universities, the formation of normal DNA, the combination of ordinary universities and ordinary universities, the formation of normal DNA, the combination of ordinary universities and ordinary universities, the formation of normal DNA, the combination of ordinary universities and ordinary universities, the formation of normal DNA, the combination of ordinary universities and ordinary universities, the formation of normal DNA, the combination of ordinary universities and ordinary universities, the formation of normal DNA, the combination of ordinary universities and ordinary universities, the formation of normal DNA, the combination of ordinary universities and ordinary universities, the formation of normal DNA, the combination of ordinary universities and ordinary universities, the formation of normal DNA, the combination of ordinary universities and ordinary universities, the formation of normal DNA, the combination of ordinary universities and ordinary universities, the formation of normal DNA, the combination of ordinary universities and ordinary universities, the formation of normal DNA, the combination of ordinary universities and ordinary universities, the formation of normal DNA, the combination of ordinary universities and ordinary universities, the The combination of poly (ε) and poly (ε) in ordinary universities was lower than that in wild type (DNA). The above results show that the combination of Pol ε and DNA of an ordinary university can correctly verify that part of the Dpb3p-Dpb4p complex can be used to demonstrate the accuracy of Dpb3p-Dpb4p. (2) the combination of DNA and ordinary universities can be used to cut the specific fields of Araki (National Institute of Science and Technology), dpb3, and so on. In the near field, there are many problems in the field. In general, people from generation to generation are responsible for maintaining the status (write suppression status) and stability of the plant. The combination of DNA from ordinary universities and ordinary universities can reduce the level of Pol in the production of dpb3 (K18D). In the near field, there are significant differences between the two groups, such as dpb3, dpb3 and so on. The results showed that the combination of Pol ε and DNA in ordinary universities could lead to the formation of medical information in the field. The possibility of the formation of an ordinary university could indicate that it is possible to cause a serious accident. In the field of Pol, there are many problems in the field, such as the formation of a common service unit.