DNAポリメラーゼ・イータとTLS及びDNA修復タンパク質との相互作用の解析

DNA 聚合酶 eta 与 TLS 和 DNA 修复蛋白之间的相互作用分析

• 批准号: 20055013
• 负责人: 益谷 央豪
• 金额: $ 2.94万
• 依托单位: Osaka University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 2008
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2008 至 2009
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-20055013/
• 关键词: 損傷乗り越えDNA複製; タンパク質間相互作用; ミスマッチ修復; Po1H; REV1; MLH1; DNAポリメラーゼ・イータ; Revl; Mlhl; 染色体サイクル

染色体DNAは絶えず損傷し続けており、DNA損傷に対応するメカニズムの解明は染色体サイクルの全体像の理解に必須である。本研究では、色素性乾皮症バリアント群の責任遺伝子産物であるPolηとTLS因子REV1及びミスマッチ修復因子MLH1の相互作用の生理的意義の解析を行った。そして、ヒト細胞の内在性REV1のDNA損傷部位への集積が、Polηとの相互作用により制御されていることを明らかにし、複数のTLSポリメラーゼを制御する機構があることを明らかにした。また、REV1との相互作用能を失ったPolηを発現させたXP-V群細胞株を樹立し、それらの細胞株では、紫外線感受性や紫外線誘発突然変異は正常レベルに回復しているが、自然突然変異が有意に抑制されていないことを見出し、PolηとREV1との相互作用が、内在性DNA損傷による突然変異を抑制していることを初めて示唆した。ミスマッチ修復機構は、DNA複製の忠実度を保つ上で重要な機構であるが、加えて、細胞周期チェックポイント機構や細胞死経路及び体細胞超突然変異の生成においても重要な役割を担っている。本課題では、PolηがMSH2/MSH6に加えてMLH1/PMS2とヒト細胞中で相互作用することを新たに明らかにした。また、MSH2/MSH6は、PolηのC末部分と直接相互作用することが報告されているが、それだけではなく、MLH1/PMS2を介してPolηのN末領域とも相互作用することを見出した。さらに、Polηとこれらのミスマッチ修復タンパク質との相互作用は、細胞周期のS期にクロマチン上で亢進することを見出した。これらの成果により、TLSタンパク質とミスマッチ修復タンパク質問の相互作用の多様性が初めて明らかになり、様々な生理機構との関連解明研究への新たな道筋を示した。

Chromosome DNA は unique え ず damage し 続 け て お り, DNA damage に 応 seaborne す る メ カ ニ ズ ム の interpret は chromosome サ イ ク ル の all like の must understand に で あ る. This study で は, dry pigment skin disease バ リ ア ン ト group の responsibility heritage 伝 zi chan content で あ る Pol eta と TLS factors REV1 and び ミ ス マ ッ チ repair factor MLH1 の interaction の physiological significance of analytical line を っ の た. そ し て, ヒ ト cells の internality REV1 の DNA injury へ の が deposition, Pol eta と の interaction に よ り suppression さ れ て い る こ と を Ming ら か に し, plural の TLS ポ リ メ ラ ー ゼ を suppression す る institutions が あ る こ と を Ming ら か に し た. ま た, REV1 と の interaction energy lost を っ た Pol eta を 発 now さ せ た XP - V group of cell lines を し, そ れ ら の cell lines で は, ultraviolet sensitivity や uv induced 発 suddenly - different は normal レ ベ ル に reply し て い る が, natural suddenly - different が intentionally に inhibit さ れ て い な い こ と を see し, Pol eta と REV1 と の each other The effects are が, intrinsic DNA damage による, sudden change を, inhibition of <s:1> て る る, とを initial めて, and initiation of た. ミ ス マ ッ チ repair は, DNA replication の loyalty be degrees を つ で important bao な institutions で あ る が, え て, cell cycle チ ェ ッ ク ポ イ ン ト 経 や cell death road and suddenly び somatic super - vision の generated に お い て も cut を bear important な service っ て い る. This topic で は, Pol eta が MSH2 / MSH6 に plus え て MLH1 / PMS2 と ヒ ト cells で す interaction る こ と を new た に Ming ら か に し た. ま た, MSH2 / MSH6 は, Pol eta の C section at the end of the direct interaction す と る こ と が report さ れ て い る が, そ れ だ け で は な く, MLH1 / PMS2 を interface し て Pol eta の N at the end of the field と も interaction す る こ と を shows し た. さ ら に, Pol eta と こ れ ら の ミ ス マ ッ チ repair タ ン パ ク qualitative と の は interaction, cell cycle phase の S に ク ロ マ チ ン で on hyperthyroidism す る こ と を shows し た. こ れ ら の results に よ り, TLS タ ン パ ク qualitative と ミ ス マ ッ チ repair タ ン パ ク questioned の の interaction at the beginning of many others in sexual が め て Ming ら か に な り, others 々 な physiological organization と の masato even interpret research へ の new た な tao jin を shown し た.

项目成果

Polymerization by DNA polymerase η is blocked by cis-diamminedichloroplatinum(II) 1,3-d(GpTpG) cross-link: implications for cytotoxic effects in nucleotide excision repair-negative tumor cells

• DOI: 10.1093/carcin/bgp316
• 发表时间: 2010-03-01
• 期刊: CARCINOGENESIS
• 影响因子: 4.7
• 作者: Chijiwa, Shotaro;Masutani, Chikahide;Kuraoka, Isao
• 通讯作者: Kuraoka, Isao

Physiological relevance of the Pol eta-Revl interaction in human cells

人类细胞中 Pol eta-Revl 相互作用的生理相关性

• 发表时间: 2008
• 作者: Masutani;C.;et.al.
• 通讯作者: et.al.

Translesional DNA synthesis through a C8-guanyl adduct of 2-amino-1-methyl-6-phenylimidazo[4,5-b]pyridine (PhIP) in vitro REV1 inserts dC opposite the lesion and DNA polymerase k potentially catalyzes extension reaction from the 3'-dC terminus.

体外通过 2-氨基-1-甲基-6-苯基咪唑并[4,5-b]吡啶 (PhIP) 的 C8-鸟苷加合物进行跨病灶 DNA 合成 REV1 在病灶对面插入 dC，并且 DNA 聚合酶 k 可能催化来自病灶的延伸反应

• 发表时间: 2009
• 期刊: J.Biol.Chem. 284
• 作者: Fukuda;et al.
• 通讯作者: et al.

Penicilliols A and B, novel inhibitors specific to mammalian Y-family DNA polymerases

• DOI: 10.1016/j.bmc.2009.01.064
• 发表时间: 2009-03-01
• 期刊: BIOORGANIC & MEDICINAL CHEMISTRY
• 影响因子: 3.5
• 作者: Kimura, Takuma;Takeuchi, Toshifumi;Mizushina, Yoshiyuki
• 通讯作者: Mizushina, Yoshiyuki

Interaction with DNA polymerase η is required for nuclear accumulation lof REV1 and suppression of spontaneous mutations in human cells

与 DNA 聚合酶 η 的相互作用是 REV1 核积聚和抑制人类细胞自发突变所必需的

• 发表时间: 2009
• 期刊: DNA Repair(Amst.) (In press)
• 作者: Akagi;J.;et.al.
• 通讯作者: et.al.