運動神経特異的ポリオウイルスベクターの開発

运动神经元特异性脊髓灰质炎病毒载体的开发

• 批准号: 13035010
• 负责人: 大岡 静衣
• 金额: $ 4.8万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 2001
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2001 至 2002
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-13035010/
• 关键词: ポリオウイルス; 運動神経; ウイルスベクター; 筋萎縮性側索硬化症; トランスジェニックマウス; ベクター

ポリオウイルス(PV)の運動神経向性を利用し、自己複製能を持たない運動神経特異的なPVベクターを開発し、運動神経疾患の一つ筋萎縮性側索硬化症(ALS)の治療に用いることを目的とする。これまでに、PV感受性トランスジェニックマウス(PVR-Tg)とALS疾患モデルマウス(SOD1-Tg)を掛け合わせた、PV感受性ALS疾患モデルマウス(PVR/SOD1-Tg)を作製した。このPVR/SOD1-TgのALS病態発現は、麻痺の発症時期、経過がSOD1-Tgと大差がなかった。運動神経栄養作用を持つHGF (Hepatocyte growth factor)あるいはapoptosis inhibitorであるXIAP (X-linked inhibitor of apoptosis protein)を発現させたALS疾患モデルマウスでは、生存期間が延長することが報告されている。そこで、両遺伝子発現PVベクターをPVR/SOD1-Tgに導入し、運動神経特異的に目的蛋白質を発現させる方針とした。具体的には、PVゲノムの一部を欠失させて外来cDNAを導入し、自己複製能を持たない欠陥干渉ウイルスベクターを作製する。PVは本来のゲノム長よりも長すぎると遺伝子的に不安定になることが知られているため、導入遺伝子長分のウイルスゲノムを欠損させなければならない。そこで、PVが欠陥干渉ウイルス粒子を形成するために最低限必要な条件を明らかにする必要が生じた。in frameな欠失で、最大1.8kbの欠失なら粒子形成可能であることが現在までに明らかになった。また、2.6kbまで欠失させてもウイルスRNA複製は行われるが、パッケージングはされなかった。したがって、パッケージングにはある程度のウイルスゲノム全体長が必要である可能性が考えられ、外来遺伝子を挿入することにより粒子が形成されるようになる可能性がある。

ポ リ オ ウ イ ル ス (PV) god 経 の movement to sex を し, oneself can replicate を た な い movement god 経 specific な PV ベ ク タ ー を open 発 し, sports god 経 disorders の つ reinforcement atrophic amyotrophic lateral sclerosis (ALS) therapy に の with い る こ と を purpose と す る. こ れ ま で に, PV susceptibility ト ラ ン ス ジ ェ ニ ッ ク マ ウ ス Tg (PVR) と ALS disease モ デ ル マ ウ ス (SOD1 - Tg) を hang け close わ せ た, PV susceptibility ALS disease モ デ ル マ ウ ス (PVR/SOD1 - Tg) を cropping し た. こ の PVR Tg/SOD1 - の ALS pathological 発 は now, paralysis, の 発 disease period, 経 が SOD1 - Tg と big difference が な か っ た. Exercise psychology 栄 maintains を the effects of を HGF (Hepatocyte growth factor)ある 栄 を apoptosis inhibitorであるXIAP (X-linked inhibitor of apoptosis) Protein) を 発 now さ せ た ALS disease モ デ ル マ ウ ス で は, survival during extended が す る こ と が report さ れ て い る. そ こ で, struck but 伝 発 now PV ベ ク タ ー を PVR Tg/SOD1 - に import し, sports god 経 に purpose of specific protein を 発 now さ せ る policy と し た. Specific に は, PV ゲ ノ ム の lost a を owe さ せ て foreign cDNA を import し, oneself can replicate を た な い owe 陥 dry involved ウ イ ル ス ベ ク タ ー を cropping す る. PV は originally の ゲ ノ ム long よ り も long す ぎ る と but 伝 son に unrest に な る こ と が know ら れ て い る た め, import, heritage 伝 smaller points の ウ イ ル ス ゲ ノ ム を owe loss さ せ な け れ ば な ら な い. そ こ で, dry PV が owe 陥 involved ウ イ ル を ス particles formed す る た め に minimalist な necessary conditions を Ming ら か に す る が necessary raw じ た. In frame な owe で loss, maximum 1.8 KB の owe lose な ら particles may で あ る こ と が now ま で に Ming ら か に な っ た. Lost ま た, 2.6 KB ま で owe さ せ て も ウ イ ル ス RNA replication は line わ れ る が, パ ッ ケ ー ジ ン グ は さ れ な か っ た. し た が っ て, パ ッ ケ ー ジ ン グ に は あ る degree の ウ イ ル ス ゲ ノ ム all long が necessary で あ る possibility が exam え ら れ, exotic but 伝 を scions into す る こ と に よ が り particles formed さ れ る よ う に な る possibility が あ る.

项目成果

Ohka, S. et al.: "Recent insights into poliovirus pathogenesis"Trends in Microbiology. 9(10). 501-506 (2001)

Ohka, S. 等人：“对脊髓灰质炎病毒发病机制的最新见解”微生物学趋势。

Jia, Q., et al.: "Expression of Brain-derived Neurotrophic Factor in the Central Nervous System of Mice using a Poliovirus-based Vector"Journal of Neurovirology. 8(1). 14-23 (2002)

Jia, Q. 等人：“使用基于脊髓灰质炎病毒的载体在小鼠中枢神经系统中表达脑源性神经营养因子”神经病毒学杂志。

Jia Q., Liang F., Ohka S., Nomoto A.Hashikawa T.: "Expression of brain-derived neurotrophic factor in the central nervous system of mice using a poliovirusbased vector"J Neurovirol.. 8. 14-23 (2002)

Jia Q.，Liang F.，Ohka S.，Nomoto A.Hashikawa T.：“使用基于脊髓灰质炎病毒的载体在小鼠中枢神经系统中表达脑源性神经营养因子”J Neurovirol.. 8. 14-23 (2002

Ohka S., Ohno H., Tohyama K., Nomoto A.: "Basolateral sorting of human poliovirus receptor alpha involves an interaction with the mu1B subunit of the clathrin adaptor complex in polarized epithelial cells"Biochem Biophys Res Commun.. 287. 941-948 (2001)

Ohka S.、Ohno H.、Tohyama K.、Nomoto A.：“人脊髓灰质炎病毒受体 α 的基底外侧分选涉及与极化上皮细胞中网格蛋白接头复合物的 mu1B 亚基的相互作用”Biochem Biophys Res Commun.. 287. 941

Ohka S., Nomoto A.: "The molecular basis of poliovirus neurovirulence"Dev Biol (Basel). 105. 51-58 (2001)

Ohka S.，Nomoto A.：“脊髓灰质炎病毒神经毒力的分子基础”Dev Biol（巴塞尔）。