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成熟脳における神経幹細胞の役割

神经干细胞在成熟大脑中的作用

基本信息

批准号：
13035041
负责人：
西真弓
金额：
$ 2.56万
依托单位：
Kyoto Prefectural University of Medicine
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
2001
资助国家：
日本
起止时间：
2001 至 2002
项目状态：
已结题

项目摘要

近年成熟動物でも中枢神経組織に神経に分化しうる神経幹細胞の存在が示されてきたが、その機能は明確にはされていない。成熟した動物においてもそのような神経幹細胞から成熟し、分化したニューロンが神経回路網に組み込まれ、情報処理の役割を担うのであろうか?最近、神経幹細胞からのneuronの新生が記憶や学習に関与している可能性を強く示唆する結果がいくつかのグループによって示されているが、厳密に神経幹細胞からのneuronの新生が記憶学習に必要であるかを検討した報告は未だない。本研究ではそのような疑問に答えるために、新たな情報を記憶学習するときに神経幹細胞が必要であるかを検討していく。この目的のためにネスチンのプロモーター/エンハンサーの構築を用いてIL-2R/GFPをトランスジェニックマウスに発現させ、IL-2R抗体にシュードモナス外毒素の一部を融合したimmunotoxin (Anti-Tac(FV)-PE38)を脳内、主として脳室および海馬領域にstereotaxicにmicroinjectionすることにより神経幹細胞を時空間特異的に除去できるモデル動物実験系を確立することを試みた。IL-2R/GFP、anti-Tac(FV)-PE38の発現ベクターは中西(京都大学)、Pastan(NIH)らに供与を受けた。ネスチンプロモーター/エンハンサーの構築は、Enikolopov(Cold Sprihg HarborLaboratory)がGFPを発現するのに利用した実績が有るものを利用した。マウスの系統は海馬依存的な行動を検討する為にはC57BL/6のbackgroundへのcongenic動物とした。IL-2R/GFPを発現している細胞が本当に神経幹細胞であるかどうかは、分布、形態、BrdU取込み能、ネスチンに対する免疫染色で確認する。研究開始当初、transgene陽性のラインがわずかしかとれず、研究期間年度内に作成したtransgene陽性マウス2匹の脳を解析した結果、脳室周囲および海馬領域に十分なGFPの蛍光を認めることができなかった。Transgene挿入確認のためのPCRに用いるプライマーを変えたところ、新たにtransgene陽性マウスのラインが12得られたため、現在F1を作成中である。PCRに用いたプライマーが不適切であったことが原因の一つと推測される。当初の目的に見合うトランスジェニックが得られたら、速やかに神経幹細胞特異的除去ならびに海馬依存的行動(Morris water maze)による記憶・学習行動の検討へと研究を進めていく予定である。

In recent years, the mature animal animal central god organization has the ability to differentiate, differentiate and differentiate. Do you want to know how to mature, how to differentiate, what to do, what to do, what are you going to do? Recently, there has been a strong indication of the possibility and possibility of neuron students' records. The results show that the reports have not been reported yet. The results show that the reports are not correct. In this study, I wonder if it is necessary to answer the questions, the new information, the knowledge, the knowledge, and the necessity. The purpose of this study is to detect the presence of IL-2R/GFP antibodies and exotoxins in a fusion immunotoxin (Anti-Tac (FV)-PE38). The main engine room is responsible for the removal of the equipment in the stereotaxic environment and the microinjection environment in the maritime field. IL-2R/GFP, anti-Tac (FV)-PE38 can provide and receive information from Chinese and Western countries (Kyoto University) and Pastan (NIH). Please tell me how to use it. Enikolopov (Cold Sprihg HarborLaboratory) GFP show that you can make use of it. The actions that are dependent on the sea of the C57BL/6 system will be classified as the congenic action cluster of the congenic system for background operations. IL-2R/GFP shows that the cells are supposed to be affected by the cells, distribution, shape, BrdU capacity, immunostaining confirmation. At the beginning of the study, transgene clinical trials were conducted during the period of the study, and during the study period, the results of two transgene cycles were analyzed, and the sea area around the room was very close to GFP. Transgene has confirmed that you need to make sure that you are in the process of being successful in F1 now that you have not received any information from the PCR, the new transgene, which is currently in the process of being completed. PCR uses the following words: do not cut because of the cause. At the beginning, the purpose of this study is to improve the accuracy of the information system, and to remove the activities that depend on the sea (Morris water maze). The purpose of the study is to determine the accuracy of the study.