プロテインスプライシング反応を用いたコルチコステロイド受容体の可視化
使用蛋白质剪接反应可视化皮质类固醇受体
基本信息
- 批准号:21659046
- 负责人:
- 金额:$ 1.92万
- 依托单位:
- 依托单位国家:日本
- 项目类别:Grant-in-Aid for Challenging Exploratory Research
- 财政年份:2009
- 资助国家:日本
- 起止时间:2009 至 2010
- 项目状态:已结题
- 来源:
- 关键词:
项目摘要
細胞外シグナルは、受容体などの活性化を経て細胞内シグナルに変換され、最終的なターゲットへと伝達される。これまでに多くのシグナル伝達分子が同定され、シグナル伝達カスケードの存在が発見され、またそれらのシグナル伝達カスケードの基本要素ならびに反応機構の大枠は明らかとなってきた。しかしながら、こうした知見のほとんどが培養細胞を用いたシャーレの中のものにすぎず、個体レベルで実際にこのようなシグナル伝達のカスケードがシャーレの中と同様に働いているかどうかについては、未だ解明されていない。本研究ではこうした疑問に答えるために、二分した生物発光あるいは蛍光タンパク質を再構成させるプロテインスプライシング反応を利用して、動物個体レベルでの機能タンパク質の動態をリアルタイムにかつ空間的・時間的・量的な要素を加味して可視化することを目的とする。平成22年度は、グルココルチコイドレセプター(GR)とミネラルコルチコイドレセプター(MR)の細胞内動態を個体レベルで可視化するために、Intein(DnaE)のN末側(DnaE-N)に生物発光タンパク質(luciferase ; Luc)または蛍光タンパク質(green fluorescent protein ; GFP)のN末側半分と核移行シグナル(nuclear localization signal ; NLS)を結合させたプローブと、LucまたはGFPのC末側半分にDnaEのC末側(DnaE-C)とGRあるいはMRのcDNAを結合させたプローブの作製し、初代培養神経細胞に発現させ、BRETを観察した。今後、in vivoイメージングに向け、研究を続けていく予定である。
The extracellular matrix, receptor, and activation of the intracellular matrix, and ultimately the cellular matrix, The basic elements of this system are the identification, identification and identification of the elements of the system, and the identification and identification of the elements of the system. In the case of cultured cells, the cell culture medium is used for cell culture, and in the case of individuals, the cell culture medium is used for cell culture. This study aims to solve the problem of biological light emission, reconstruct the quality of biological light emission, and utilize the dynamic characteristics of biological light emission, space, time and quantity of biological light emission. In 2002, the intracellular dynamics of GR and MR were visualized in vivo, and the N-terminal side (DnaE-N) of Intein(DnaE) was detected in vivo.(luciferase ; Luc)(green fluorescent protein ; GFP) N terminal half and nuclear migration (nuclear localization signal ; NLS) is combined with GFP and its C-terminal half, DnaE and C-terminal half (DnaE-C) and GR is combined with MR cDNA, and is used to control the development of primary cultured cells and to detect BRET. In the future, in vivo, research and development
项目成果
期刊论文数量(0)
专著数量(0)
科研奖励数量(0)
会议论文数量(0)
专利数量(0)
脳科学の将来と新分野創成センター
脑科学的未来和新领域创建中心
- DOI:
- 发表时间:2010
- 期刊:
- 影响因子:0
- 作者:Nishi M;Horii-Hayashi N;Kawata M;Shoji H.;西真弓
- 通讯作者:西真弓
Effects of early life adverse events on brain plasticity.
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- DOI:
- 发表时间:2011
- 期刊:
- 影响因子:0
- 作者:Mayumi Nishi;Noriko Horii-Hayashi;Yumiko Matsusue;Cho Azuma
- 通讯作者:Cho Azuma
Effects of maternal separation on behavioral disorders in adulthood
母亲分离对成年期行为障碍的影响
- DOI:
- 发表时间:2009
- 期刊:
- 影响因子:0
- 作者:西真弓;八神美香;河田光博
- 通讯作者:河田光博
In Vivo Assessment of Peripheral Nerve Regeneration by Diffusion Tensor Imaging
- DOI:10.1002/jmri.22442
- 发表时间:2011-03-01
- 期刊:
- 影响因子:4.4
- 作者:Morisaki, Shinsuke;Kawai, Yuko;Kubo, Toshikazu
- 通讯作者:Kubo, Toshikazu
Dynamics of corticosteroid receptors : implications from live cell imaging.
皮质类固醇受体的动力学:活细胞成像的影响。
- DOI:
- 发表时间:2011
- 期刊:
- 影响因子:0
- 作者:Horii-Hayashi N;Yoshikawa M;Nishi M;Wanaka A;Nishi M
- 通讯作者:Nishi M
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