新規リソホスファチジル酸アシル基転移酵素エンドフィリンのシナプス伝達における役割

新型溶血磷脂酰基转移酶内亲蛋白在突触传递中的作用

• 批准号: 13035057
• 负责人: 根本 康夫
• 金额: $ 4.8万
• 依托单位: Tohoku University (2002)The Institute of Physical and Chemical Research (2001)
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 2001
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2001 至 2002
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-13035057/
• 关键词: シナプス伝達; シナプス小胞; リン脂質; ホスファチジル酸; リゾホスファチジン酸; ホスファチジン酸; リソホスファチジン酸

1 エンドフィリンの活性調節と形質膜への作用機構の解析昨年度同定したエンドフィリン結合タンパク質EBP-1についてその性状解析を行った。EBP-1特異的抗体を作製し、免疫組織化学的実験を行った結果、EBP-1はエンドフィリンと同じく脳に多く、神経終末に発現していた。また、EBP-1とエンドフィリンの生化学的結合が確認された。EBP-1を培養細胞に発現すると細胞内に小胞様構造が蓄積し、エンドフィリンとEBP-1がこの小胞様構造に集積していた。これらの結果から、EBP-1はエンドフィリンの作用調節に関与すると考えられた。さらにエンドフィリンの作用機構を明らかにするため、EBP-1結合タンパク質を酵母ツーハイブリッド法を用いて探索し、低分子量Gタンパク質rhoに対するGAPドメインを持つ新規タンパク質を同定した。このrho GAPタンパク質の性状を解析した結果、クラスリンを介するエンドサイトーシスへの関与が示唆された。2 哺乳類中枢シナプスにおけるエンドフィリンの生理的役割の解析昨年度のエンドフィリンアイソフォームの局在の解析結果から、哺乳類の中枢神経細胞でシナプス小胞のエンドサイトーシスによる再生過程に主な役割を果たすのは、エンドフィリン1および2であると考えられた。また、エンドフィリン1、2の脳内分布の違いから、エンドフィリン1、2が異なる脳機能に関与する可能性が示唆された。この結果に基づいてエンドフィリンのシナプス伝達における生理的役割を詳細に解析するため、エンドフィリン・ノックアウトマウスの作製を進めた。

The analysis of the mechanism of action of plasma membrane in the regulation of activity of EBP-1 was carried out in the same year EBP-1 specific antibody production, immunohistochemical results, EBP-1 gene expression and protein expression The biochemical binding of EBP-1 and EBP-1 was confirmed. EBP-1 is expressed in cultured cells and accumulated in cellular structures. EBP-1 is the result of a series of experiments involving the regulation of the function of EBP-1 The mechanism of action of EBP-1 and EBP-1 in combination with yeast was explored and the low molecular weight GBP-1 and EBP-1 in combination with yeast were identified. The analysis results of the quality of the rho GAP and the relationship between the quality of the rho gap and the quality of the rho gap are as follows: 2. Analysis of physiological functions of mammalian central nervous system. Results of analysis of physiological functions of mammalian central nervous system. The possibility of the function of the distribution of the difference between the two groups is shown. The results of this study were analyzed in detail.

项目成果

Ringstad, N., Nemoto, Y., De Camilli, P: "Differential expression of endophilin 1 and 2 dimers at central nervous system synapses."The Journal of Biological Chemistry. 276・44. 40424-40430 (2001)

Ringstad, N.、Nemoto, Y.、De Camilli, P：“中枢神经系统突触内亲素 1 和 2 二聚体的差异表达”，《生物化学杂志》276・44 (2001)。

Nemoto, Y., et al.: "Identification and characterization of a synaptojanin 2 splice isoform predominantly expressed in nerve terminals."The Journal of Biological Chemistry. 276・44. 41133-41142 (2001)

Nemoto, Y. 等人：“主要在神经末梢表达的突触蛋白 2 剪接异构体的鉴定和表征”。《生物化学杂志》276·44 (2001)。