权益分类	功能权益	普通用户	{{item.name}}会员
{{category.name}}	{{benefitItem.name}}

サリチル酸シグナルの伝達機構(細胞外シグナルの生成、細胞内化と細胞間伝達)

水杨酸信号的转导机制（细胞外信号的产生、内化和细胞间通讯）

基本信息

批准号：
13039008
负责人：
鳥山尚志
金额：
$ 3.52万
依托单位：
Nagoya University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
2001
资助国家：
日本
起止时间：
2001 至 2002
项目状态：
已结题

项目摘要

これまでに、[Ca^<2+>]_<cyt>インジケーターであるオワンクラゲ由来のCa^<2+>結合性発光蛋白質エクオリンを導入したタバコ培養細胞を用いて、SA誘導性[Ca^<2+>]_<cyt>上昇についてその分子機構を明らかにした。SA誘導性[Ca^<2+>]_<cyt>上昇では[Ca^<2+>]_<cyt>上昇に先だって活性酸素種の生成が起こることに加え、近年活性酸素種が植物細胞形質膜上に存在する電圧依存型Ca^<2+>透過チャネルを活性化することが報告されているので、本年度の研究では我々が世界で初めてクローニングに成功した植物の電圧依存型Ca^<2+>透過チャネル・AtTPC1およびそのホモログ(TPC1型チャネル)がSA誘導性[Ca^<2+>]_<cyt>上昇に関与しているか否かを明らかにすることを目指した。まずエクオリンを発現するシロイヌナズナ培養細胞を調製した。次に、同細胞株でAtTPC1抑制株(co-supressionによる)を調製し、AtTPC1を発現する細胞と発現しない細胞でのSA誘導性[Ca^<2+>]_<cyt>上昇を、それぞれエクオリン発光として測定した。その結果、AtTPC1を発現する細胞でのみ発光が見られた。この差異はH_2O_2誘導性[Ca^<2+>]_<cyt>上昇でも同様に見られたことから、植物細胞に於いて起こる活性酸素種による細胞外からの[Ca^<2+>]_<cyt>上昇はTPC1によるものであることが明らかとなった。加えて、AtTPC1を過剰発現するエクオリン導入タバコ培養細胞を用いて解析をしたところ、SA処理、H_2O_2処理で共にコントロールの細胞と比較して強いエクオリン発光が見出されたことからSA誘導性[Ca^<2+>]_<cyt>上昇においてサイトゾルへのCa^<2+>流入を担うCa^<2+>透過チャネルはTPC1型チャネルであるということが明らかとなった。今後、分子生物学的手法や電気生理学的な解析によりさらに詳細な検討を行う。

The molecular mechanism of [Ca ^<2 +><cyt>]_rise in the introduction of Ca-binding light-emitting proteins into cultured <cyt>cells is clearly demonstrated. SA inductivity [Ca^<2+>]_<cyt>rise,[Ca^<2+>]_<cyt>rise, the first step in the formation of active acid species, in recent years, the presence of active acid species on the plasma membrane of plant cells, voltage-dependent Ca^<2+> activation through cell growth, and so on This year's research indicates that plants are voltage dependent Ca^<2+>-induced [Ca^<2 +>]_rise through TPC 1-induced [Ca^<2+>]_rise<cyt>. The cells were cultured in vitro and the cells were cultured in vitro. In addition, the co-suppression of AtTPC1 in the same cell line was modulated, and the expression of AtTPC1 in the cells was determined<cyt>. The results, AtTPC1, and the cell's light emission were observed. The difference is H_2O_2-induced [Ca^<2+>]_<cyt>rise, the same as the plant cell, the active acid species, the extracellular [Ca^<2+>]_rise, TPC1, the same as the plant cell, the active acid species, the extracellular [Ca^<2+>]_<cyt>rise. Add TPC 1 <cyt>to the culture cells, and then add TPC1 to the culture cells. Then add TPC 1 to the culture cells. In the future, molecular biology and electrophysiology will be discussed in detail.