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植物カルシウムチャネルAtTPC1およびAtCNGCの分子細胞生理学的研究

植物钙通道AtTPC1和AtCNGC的分子和细胞生理学研究

基本信息

批准号：
14340251
负责人：
鳥山尚志
金额：
$ 9.28万
依托单位：
Nagoya University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (B)
财政年份：
2002
资助国家：
日本
起止时间：
2002 至 2003
项目状态：
已结题

项目摘要

我々が世界で初めてクローニングに成功した植物の電圧依存型Ca^<2+>透過チャネル・AtTPC1の機能及び役割を明らかにするため、電気生理学的解析に主眼をおいて研究を行った。動物細胞発現系を用いたパッチクランプ法による解析により、非常に低い成功率ながら植物プロトプラストで報告されている電圧依存型Ca^<2+>チャネルと酷似した電流を得ることが出来た。パッチクランプ法による解析では、発現系の検討やシステムの改良(最適化)等を要することに加え、植物細胞を用いての解析も必要となることから、これに先だって予備的知見を得る目的で酵母発現系での機能解析を行った。AtTPC1を発現させることにより、酵母の糖応答性[Ca^<2+>]_<cyt>上昇の強度は増大した。AtTPC1発現細胞でより高い[Ca^<2+>]_<cyt>上昇が見られたこと、BAPTA及びLa^<3+>がグルコース誘導性[Ca^<2+>]_<cyt>上昇を阻害したことから、糖シグナリングで活性化されたAtTPC1を介する細胞外Ca^<2+>流入が、[Ca^<2+>]_<cyt>上昇を引き起こしたと示唆される。出芽酵母への低浸透圧ショックにおいて、細胞が膨張する際に細胞膜が引っ張られAtTPC1に機械刺激をもたらす可能性がある。低浸透圧ショックでAtTPC1は活性化されず、AtTPC1は機械刺激受容チャネルではないことが支持された。細胞外にK^+が存在する時、グルコース誘導性[Ca^<2+>]_<cyt>上昇は顕著に抑制された。K^+とよく似た性質を持つRb^+でも同様のグルコース誘導性[Ca^<2+>]_<cyt>上昇の抑制が見られた。放射性核種^<86>Rb^+の取り込み実験の結果、AtTPC1はCa^<2+>透過能と同時に、K^+透過能を有することが分かった。

I am the world's first successful plant and the electric pressure dependent type Ca^<2+> through チャネル・A The function of tTPC1 and the analysis of electrochemical physiology and electrophysiological research are mainly focused on the research of tTPC1. Animal cells are discovered using the いたパッチクランプ method による analysis により, very low success rate ながら plant プロトプラストでreport されているelectric pressure dependent type Ca^<2+>チャネルとsimilar to した电をget ることが came out.パッチクランプ法によるanalyticsでは、発行の検やシステムの Improvement (optimization) etc. することにaddえ、Plant cellsをUsing the necessary knowledge and knowledge of the analysis and analysis of the yeast in advance, the purpose of yeast analysis is now the same as the function analysis of the yeast. AtTPC1's sugar responsiveness [Ca^<2+>]_<cyt> has increased and its strength has increased. AtTPC1 is present in cells and is induced by [Ca^<2+>]_<cyt>, BAPTA, and BAPTA. RISK inhibits the activation of sugar, inhibits the activation of AtTPC1, and regulates extracellular Ca. ^<2+>Inflow が, [Ca^<2+>]_<cyt>Rise を lead き rise こしたと show instigation される. The budding yeast has a low permeability pressure, a cell expansion, a cell membrane, a mechanical stimulation of AtTPC1, and a possibility of mechanical stimulation. Low permeability pressure, AtTPC1 activation, AtTPC1 mechanical stimulation tolerance, AtTPC1 support. When extracellular Ca^+ is present, CaCl induces [Ca^<2+>]_<cyt> to rise and inhibits CaCl. K^+とよくsimilar natureをholdつRb^+でも同様のグルコース inducibility [Ca^<2+>]_<cyt>rise and suppressionが见られた. Radioactive nuclide ^<86>Rb^+のtakingり込み実験の result, AtTPC1はCa^<2+>transmit energy at the same time, K^+transmit energy at the same time.