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サリチル酸シグナルの伝達機構(細胞外シグナルの生成と細胞内化)

水杨酸信号的转导机制（细胞外信号的产生和内化）

基本信息

批准号：
12052213
负责人：
鳥山尚志
金额：
$ 1.6万
依托单位：
Nagoya University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
财政年份：
2000
资助国家：
日本
起止时间：
2000 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

SA処理タバコ培養細胞系で起こる細胞外ペルオキシダーゼ反応による活性酸素種(ROS)生成が、SA以外の化合物でも起こるかどうかを検討した。芳香族アミンであるフェニルエチルアミン(PEA)やベンジルアミンをタバコ培養細胞(BY-2)懸濁液に与えると、非常に急激で一過性のROS(H_2O_2とO_2^-)の生成が化学発光により検出され、ESRによってOHの生成も確認された。エチルアミンやプトレシンでも弱いながらROSの生成が検出された。H_2O_2検出試薬ルミノールとO_2^-検出試薬CLAは用いた実験条件では、細胞内に入らないので、検出されたROSは細胞外で生成されたものと考えられる。細胞内H_2O_2検出試薬ジクロロフルオレセインの蛍光を共焦点レーザ顕微鏡で観察することで、H_2O_2は細胞内にも検出された。このH_2O_2は細胞内で生成されたものか、細胞外から移行したものかは確定できなかった。ROSに続いて|Ca^<2+>2|_c上昇が観察された。この|Ca^<2+>|_c上昇はLa^<3+>やBAPTAで抑制されたので細胞外から流入したCa^<2+>によるものと考えられるつぎに細胞培養を細胞外、細胞壁、細胞内の3画分に分けてROS生成活性の分布を調べた。PEAによるH_2O_2生成活性の50%以上が細胞外に存在した。細胞壁画分の活性は細胞内画分の約2倍であった。O_2^-生成活性の分布も同様であった。細胞内H_2O_2生成活性はクロルグリン、パルグリンおよびDPIによって強く阻害されが、細胞外画分と細胞壁画分の活性は阻害されなかった。SHAMはいずれの画分の活性も阻害した。これらの結果は細胞内ではフラビン型モノアミンオキシダーゼ(とペルオキシダーゼ)が、細胞壁と細胞外ではCu型モノアミンオキシダーゼかペルオキシダーゼがROS生成に関与していることを示唆している。PEAで誘導されるROS生成はセイヨウワサビペルオキシダーゼによっても引き起こされた。従って細胞外のROS生成はSAの場合と同様にペルオキシダーゼが関与する反応であると考えられる。

SA treatment of cultured cell lines to initiate the production of reactive acid species (ROS), compounds other than SA Aromatic compounds (PEA) and aromatic compounds (PEA) were isolated from cultured cells (BY-2) suspension and were identified by chemical detection and ESR for transient ROS(H_2O_2 and O_2^-) generation under extreme stress. The production of ROS is very difficult to achieve. H_2O_2 detection test: CLA can be used under the condition that ROS is produced outside the cell. Intracellular H_2O_2 detection and detection by confocal microscopy H_2O_2 is produced in the cell and migrates outside the cell. ROSに続いて|Ca^<2+>2|_c is rising.この|Ca^<2+>| BAPTA inhibits extracellular Ca influx and modulates the distribution of ROS production activity in cell culture, extracellular, cell wall and intracellular components. More than 50% of H_2O_2-producing activity of PEA exists outside the cell. Cell wall painting activity is about 2 times that of intracellular painting. The distribution of O_2^-generating activity is similar. The activity of intracellular H_2O_2 production is mainly inhibited by intracellular H_2O_2 production, cellular H_2O_2 production and DPI production, and extracellular H_2O_2 production is inhibited by cellular H_2O_2 production and DPI production. SHAM is an active agent in the production of anti-inflammatory drugs. The result is that the cell wall and the cell wall are different. The cell wall and the cell wall are different. PEA-induced ROS are generated in response to requests for information. The production of ROS outside the cell is the same as that in the case of cell death.