核内オーファンプロテインネットワークの解明

核孤儿蛋白网络的阐明

• 批准号: 14014235
• 负责人: 田代 聡
• 金额: $ 2.3万
• 依托单位: Hiroshima University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 2002
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2002 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-14014235/
• 关键词: 核高次構造; 核機能可視化; ICD領域

1)GFP-RAD51融合タンパク質の過剰発現により可視化された領域は、ICD領域の一部であり、さらに遺伝子転写部位と密接な関連があることが明らかになった。さらに、特定の条件下でGFP-RAD51融合蛋白質が形成するフィラメントが破壊されることが明らかになったため、現在GFP-RAD51と結合し複合体を形成している蛋白質の解析を行っている。2)ゲノム修復蛋白質動態の解析をより効率的に行うため、市販されている紫外線レーザーを装備した共焦点レーザー顕微鏡を用いて紫外線マイクロ照射法を新たに確立したので報告した。3)間期核における染色邸領域配置を解析するための三次元マルチカラーFISH法を確立した。これと関連して、ヒト細胞において染色体の複製標識法を用いることにより、個々の染色体領域は細胞分裂時に再配置されることを明らかにしたので報告した。3)転写抑制因子Bach2と転写部位の関連の検討を行った。その結果、酸化ストレス誘導後、SUMO化されたBach2が形成する核内フォーカスがPML bodyと位置的に密接な関連を示し、さらにPML body内の遺伝子転写が特異的に抑制されることを明らかにした。現在論文投稿中である。現在、Bach2フォーカスに共局在する蛋白質の解析と、リンパ球での内因性Bach2の局在の解析とを進めている。特定の転写因子による遺伝子発現調節と核高次構造の関連を明らかにした報告は国内外になく、ポストゲノムにおける核高次構造研究の重要性を示すことができたと考えられる。

1)GFP-RAD51 Fusion: Quality of data is reflected in the visualization domain, part of ICD domain, part of data is reflected in the close connection domain. Under certain conditions, the GFP-RAD 51 fusion protein was formed and the protein was analyzed. 2) The analysis of protein dynamics by UV irradiation is a new method for determining the efficiency of UV irradiation. 3)The analysis of the interphase nuclear domain is based on the three-dimensional FISH method. The method of chromosome duplication is used in the field of chromosome division. 3) The relationship between Bach2 and Bach site was discussed. As a result, the formation of Bach 2 after acidification and the formation of Bach2 in the nucleus showed a close relationship between the position of PML body and the position of Bach 2 in the nucleus, and the specific inhibition of Bach 2 in the PML body. Now the paper is submitted in. Now, Bach2 is involved in the analysis of protein, and the analysis of endogenous Bach2 is in progress. The importance of nuclear high-order structure research in China and abroad has been demonstrated by a report on the relationship between specific factors and gene generation and regulation.

项目成果

Sun, J.: "Hemoprotein Bach 1 regulates enhancer availability of heme oxygenase-1 gene"EMBO J.. 21. 5216-5224 (2002)

Sun, J.：“血红素蛋白 Bach 1 调节血红素加氧酶-1 基因的增强剂可用性”EMBO J.. 21. 5216-5224 (2002)

Katsuoka, F.: "Small Maf compound mutants display central nervous system neuronal degeneration, aberrant transcription, and Bach protein mislocalization coindcident with mvoclonus and abnormal startle response"Mol Cell Biol.. 23. 1163-1174 (2003)

Katsuoka, F.：“小 Maf 复合突变体表现出中枢神经系统神经元变性、异常转录和巴赫蛋白错误定位，与 mvocalonus 和异常惊吓反应同时发生”Mol Cell Biol.. 23. 1163-1174 (2003)

Walter J: "A new system for laser-UVA-microirradiation of living cells"J Mlcrosc. 209. 71-75 (2003)

Walter J：“活细胞激光-UVA-微照射的新系统”J Mlcrosc。

Muto A.: "Activation of Maf/AP-1 Repressor Bach2 by Oxidative Stress Promotes Apoptosis and Its Interaction with Promyelocytic Leukemia Nuclear Bodies"J Biol Chem. 277. 20724-20733 (2002)

Muto A.：“氧化应激激活 Maf/AP-1 阻遏蛋白 Bach2 促进细胞凋亡及其与早幼粒细胞白血病核体的相互作用”J Biol Chem。

Hoshino, H: "Expression of the oxidative stress-regulated transcription factor Bach2 in differentiating neuronal cells"J. Blochem.. 132. 427-431 (2002)

Hoshino，H：“氧化应激调节转录因子 Bach2 在分化神经元细胞中的表达”J。