核内オーファンプロテインネットワークの解明

核孤儿蛋白网络的阐明

• 批准号: 13206056
• 负责人: 田代 聡
• 金额: $ 3.46万
• 依托单位: Hiroshima University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (C)
• 财政年份: 2001
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2001 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-13206056/
• 关键词: 核高次構造; 核機能可視化; ICD領域

1)GFP-RAD51融合タンパク質の過剰発現により可視化されたICD領域と遺伝子転写部位、複製部位の可視化を行った。その結果、転写部位はICD領域と密接な関連があることが明らかとなった。また、転写部位、複製部位の核内分布には一定の法則があることが示唆されたため、現在海外共同研究者とともにシミュレーションモデルとの比較による検討を行っている。2)紫外線マイクロ照射法および通常のX線照射によるゲノム損傷誘導後のゲノム修復関連タンパク質Rad51およびMre11とssDNA形成部位の空間的、時間的関連を解析により、ゲノム損傷部位ではまずMre11ついでRad51の集積が認められることを明らかにした。また、これらのタンパク質複合体は様々なパターンでssDNA形成部位と共局在を示し、ゲノム修復の多様性が示唆された。現在論文投稿準備中である。また、RAD54Bがヒト細胞においてゲノム修復に関わらないゲノム相同組換えに重要であることを明らかにした。3)転写抑制因子Bach2と転写部位の関連の検討を行った。その結果、酸化ストレス誘導後、Bach2が形成する核内フォーカスがPML bodyと密接な関連を示し、さらにPML body内の遺伝子転写が特異的に抑制されることを明らかにした。現在論文投稿準備中である。特定の転写因子による遺伝子発現調節と核高次構造の関連を明らかにした報告は国内外になく、ポストゲノムにおける核高次構造研究の重要性を示すことができたと考えられる。

1)GFP-RAD51 Fusion: Visual visualization of ICD domain and visualization of sub-writing and replication sites. The result is that the ICD field is closely connected. The nuclear distribution of DNA, DNA, and DNA replication sites was investigated by a number of methods. 2)Ultraviolet irradiation method is used to analyze the spatial and temporal relationship between the damaged site and the accumulation of Rad 51 after damage induction. In addition, the protein complex is composed of ssDNA forming sites and sites, and is characterized by diversity in protein repair. The paper is now ready for submission. RAD54B is a new type of cell phone. 3) The relationship between Bach2 and Bach site was discussed. As a result, the formation of Bach2 in the nucleus resulted in the formation of PML body and close association, and the formation of PML body in the nucleus resulted in specific inhibition. The paper is now ready for submission. The importance of nuclear high-order structure research in China and abroad has been demonstrated by a report on the relationship between specific factors and gene generation and regulation.

项目成果

Ogawa, K.: "Heme mediates de-repression of Maf recognition element through direct binding to transcription repressor Bach1"EMBO J.. 20. 2835-2843 (2001)

小川，K.：“血红素通过直接结合转录抑制因子 Bach1 介导 Maf 识别元件的去抑制”EMBO J.. 20. 2835-2843 (2001)

Leach, K.: "Reconstitution of human b-Globin locus control region hypersensitive sites in the absence of chromatin assembly"Mol. Cell. Biol.. 21. 2629-2640 (2001)

Leach, K.：“在没有染色质组装的情况下重建人 b-珠蛋白基因座控制区过敏位点”Mol。

Miyagawa, K.: "A role for RAD54B in homologous recombination in human cells"EMBO J. 21. 175-180 (2002)

Miyakawa, K.：“RAD54B 在人类细胞同源重组中的作用”EMBO J. 21. 175-180 (2002)

Sun, J.: "Promoter of Mouse Transcription Repressor bach1 ls Regulated by Sp1 and Trans-Activated by Bach1"J. Biochem.. 130. 385-392 (2001)

Sun, J.：“小鼠转录抑制因子 bach1 的启动子受 Sp1 调节并由 Bach1 反式激活”J。

Sawado, T.: "Activation of b-major globin gene transcription is associated with recruitment of NF-E2 to the b-globin LCR and gene promoter"Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A.. 98. 10226-10231 (2001)

Sawado, T.：“b-主要珠蛋白基因转录的激活与 NF-E2 募集到 b-珠蛋白 LCR 和基因启动子有关”Proc。