急性前骨髄球性白血病における15;17染色体転座形成分子機構の研究

急性早幼粒细胞白血病15;17染色体易位形成的分子机制研究

• 批准号: 08770564
• 负责人: 田代 聡
• 金额: $ 0.7万
• 依托单位: Hiroshima University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1996
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1996 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-08770564/
• 关键词: ERR; 急性前骨髄球性白血病; 15;17転座; Rad51

1)ゲルシフト法を用いたDNA結合蛋白質の解析放射線照射、紫外線照射およびVP-16、メソトレキセート、サイクロフォスファミド、ビンクリスチンを添加培養を行ったNIH3T3細胞株、各種白血病細胞株、マウス肉腫細胞株より核抽出液を調製し、ERRを含むDNA断片をDNAプローブとして用いゲルシフト法にてDNA結合蛋白質の発現量を検討した。その結果、NIH3T3細胞および一部の白血病細胞株については紫外線照射によりDNA結合蛋白質の発現量が増加傾向を示していることが明らかとなった。2)遺伝子組換えレポータープラスミッドを用いた相同組換えの検出放射線照射、紫外線照射およびVP-16、メソトレキセート、サイクロフォスファミド、ビンクリスチンを添加培養を行ったマウス肉腫細胞株およびNIH3T3細胞株に対してERR相同組換えレポータープラスミッドをトランスフェクション法により遺伝子導入を行った。明らかな相同組換え頻度の増加は全ての実験において認められなかった。3)Rad51蛋白質の発現パターンについてERR結合蛋白質の一部に遺伝子組換え関連蛋白質が含まれていると考え、その代表であるRad51蛋白質についてゲルシフト法を用いてERR結合蛋白質のスーパーシフトを検討した。その結果、Rad51蛋白質がERR結合蛋白質の一部である可能性が示唆された。また、Rad51蛋白質のヒトリンパ球での発現および分布パターンについて解析した結果、Rad51蛋白質はS期に特異的に核内フォーカスを形成していることが明らかとなった。

1) Analysis of DNA-binding protein using the "C" method Radiation irradiation, UV irradiation, VP-16, media treatment, additive culture, NIH 3T3 cell lines, various leukemia cell lines, and sarcoma cell lines nuclear extract preparation, DNA fragment analysis, and detection of DNA binding protein using the "C" method. As a result, NIH 3T3 cells and some leukemia cell lines showed a tendency to increase the amount of DNA-binding protein produced in response to ultraviolet radiation. 2)The same sub-group was used to introduce the same sub-group into the NIH 3T3 cell line by radiation irradiation, ultraviolet irradiation, VP-16, software, media, and additive culture. The frequency of the same group changes increases, and the frequency of the whole group changes. 3) Development of Rad 51 Protein Part of ERR-binding Protein The results show that Rad51 protein is a part of ERR binding protein. Rad 51 protein is a protein that is specific to nuclear DNA.

项目成果

Satoshi Tashiro: "S phase specific formation of the human Rad51 protein nuclear foci in lymphocytes" Oncogene. 12・6. 2165-2170 (1996)

Satoshi Tashiro：“淋巴细胞中人 Rad51 蛋白核灶的 S 期特异性形成”Oncogene 12・6（1996）。