各種変異p53遺伝子導入細胞のマイクロプレートによる放射線・制癌剤感受性の測定

使用引入各种突变 p53 基因的细胞微孔板测量辐射和抗癌药物敏感性

• 批准号: 14030068
• 负责人: 岡市 協生
• 金额: $ 2.3万
• 依托单位: Nagasaki University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 2002
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2002 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-14030068/
• 关键词: p53; 癌治療; スクリーニング; 放射線耐性; 放射線感受性; 制癌剤; アポトーシス; 遺伝子導入

1、4種類の変異p53遺伝子を導入した細胞の放射線感受性を測定したところ、放射線感受性がp53の変異部位によって異った。放射線感受性と相関している項目は、yeast functional assayの判定とアポトーシスの誘導であった。また、いくつかの制癌剤に対する感受性を調べたところ、制癌剤によって変異p53遺伝子導入細胞の感受性が異なった。2、これらの実験結果をもとにして、データベースによる各種癌細胞におけるp53の変異部位を検索して、p53タンパク質アミノ酸配列全領域での変異部位、変異頻度、どのアミノ酸へ変異したかを調べて、作成すべき変異p53遺伝子のデザインを行った。3、デザインした変異p53遺伝子を人工的に作成した。最終的には、癌細胞でよく見つかっている変異p53を70種類、リン酸化やアセチル化が起こる部位の変異を27種類作成した。4、これら約100種類の変異p53遺伝子DNAを精製した。5、精製した変異p53遺伝子DNAを細胞に導入した。リン酸化やアセチル化が起こる部位の変異p53遺伝子は、ほぼ全ての遺伝子導入が完了した。また、癌細胞でよく見つかっている変異p53は、約半数で細胞への遺伝子導入が行われた。

1, 4 kinds of different p53 genes were introduced into the cells and their radiosensitivity was measured. Radiosensitivity and correlation items are determined by the yeast-functional assay and induced by radiation. The sensitivity of p53 gene introduced into cells is different. 2. The results of this study include the detection of different p53 sites in various cancer cells, the detection of different p53 sites, the detection of different 3. The difference between p53 and p54 is artificial. Finally, the cancer cells were found to have 70 different p53 species, 27 different p53 sites, and 27 different p53 sites. 4. About 100 species of p53 gene DNA were purified. 5. Refined p53 DNA was introduced into cells. The p53 gene was introduced into the whole genome of the virus. About half of the cancer cells were infected with p53.

项目成果

岡市協生: "p53はどこからきたのか"放射線生物研究. 37. 43-52 (2002)

Kyosei Okaichi：“p53 从哪里来？” 37. 43-52 (2002)

森田直子: "放射線照射による細胞遊走とp53の関わり"長崎医学会雑誌. 77. 332-334 (2002)

Naoko Morita：“p53 与放射线照射诱导的细胞迁移的关系”长崎医学会杂志 77. 332-334 (2002)。

Okaichi, K: "Hypergravity modified the signal transduction of ionizing radiation through p53"J.Radiat.Res.. (in press).

Okaichi, K：“超重力通过 p53 改变了电离辐射的信号转导”J.Radiat.Res..（正在出版）。

岡市協生: "低線量放射線によるp53シグナルの環境ストレスによる修飾"広島医学. 55. 278-279 (2002)

Kyosei Okaichi：“低剂量辐射引起的环境应激对 p53 信号的修改”广岛医学 55. 278-279 (2002)。

Okaichi, K: "Low dose of wortmannin reduces radiosensitivity of human glioblastoma cells through the p53 pathway"Oncol.Rep.. 9. 859-862 (2002)

Okaichi, K：“低剂量的渥曼青霉素通过 p53 途径降低人胶质母细胞瘤细胞的放射敏感性”Oncol.Rep.. 9. 859-862 (2002)