各種変異p53遺伝子導入細胞による放射線治療と制癌剤のスクリーニングシステム

使用各种突变p53基因转染细胞的放射治疗和癌症药物筛选系统

• 批准号: 13218103
• 负责人: 岡市 協生
• 金额: $ 1.92万
• 依托单位: Nagasaki University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (C)
• 财政年份: 2001
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2001 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-13218103/
• 关键词: アポトーシス; 遺伝子導入; スクリーニング; 癌治療; 制癌剤; p53; 放射線感受性; 放射線耐性

(1)4種類の変異p53遺伝子を導入した細胞の放射線感受性を測定したところ放射線感受性が、p53の変異部位によって異った。放射線感受性と相関している項目は、yeast functional assayの判定とアポトーシスの誘導であった。また、いくつかの制癌剤に対する感受性を調べたところ、制癌剤によって変異p53遺伝子導入細胞の感受性が異なった。(2)これらの実験結果をもとにして、データベースによる各種癌細胞におけるp53の変異部位を検索して、p53タンパク質アミノ酸配列全領域での変異部位、変異頻度、どのアミノ酸へ変異したかを調べて、作成すべき変異p53遺伝子のデザインを行った。(3)デザインした変異p53遺伝子のうち、変異頻度が比較的多いものから順に人工的に変異を導入した。特異的変異導入キット(QuikChange site-directed mutagenesis kit)により変異p53遺伝子を作成した。癌細胞でよく見つかっている変異p53を約70種類、リン酸化やアセチル化が起こる部位での変異を27種類作成した。これら約100種類の変異p53遺伝子は、シーケンサーで塩基配列を確認済みである。現在、DNAを精製し細胞に導入しようとしている。

(1)4 The radiosensitivity of cells introduced with different p53 genes was measured. Radiosensitivity and correlation items are determined by the yeast-functional assay and induced by radiation. The sensitivity of p53 gene introduced into cells is different. (2)The results of this study include the detection of p53 variant sites in various cancer cells, the detection of p53 variant sites, and the detection of p53 variant sites. (3)The frequency of change is different from that of artificial change. QuikChange site-directed mutation kit Cancer cells have about 70 different p53 species and 27 different p53 species. About 100 different species of p53 have been identified. Now, DNA purification is introduced into cells.

项目成果

Ikeda, J: "Restration of endogenous wild-type p53 activity in a glioblastoma cell with intrinsic temperature-sensitive p53 Induces growth arrest but not apoptosis"Int. J. Cancer.. 94. 35-43 (2001)

Ikeda, J：“抑制具有内在温度敏感性 p53 的胶质母细胞瘤细胞中的内源野生型 p53 活性会诱导生长停滞，但不会导致细胞凋亡”Int。

Okaichi, K.: "Low dose od wortmannin reduces radiosensitivity of cells"Elsevier Science B. V..

Okaichi, K.：“低剂量的渥曼青霉素可降低细胞的放射敏感性”Elsevier Science B. V..

岡市協生: "p53はどこからきたのか"放射線生物研究. (印刷中).

Kyosei Okaichi：“p53 来自哪里？”（正在出版）。

Okumura, Y.: "Thermotherapy for Neoplasis, Inflammation, and Pain"Springer-Verlag Tokyo, Inc.. 420-423 (2001)

Okumura, Y.：“肿瘤、炎症和疼痛的热疗法”Springer-Verlag Tokyo, Inc. 420-423 (2001)