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脊椎動物の神経発生における中間径フィラメントの非対称分裂と細胞分化への関与

参与脊椎动物神经发生中中间丝的不对称分裂和细胞分化

基本信息

批准号：
14033205
负责人：
若松義雄
金额：
$ 3.07万
依托单位：
Tohoku University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
2002
资助国家：
日本
起止时间：
2002 至 2003
项目状态：
已结题

项目摘要

本研究に関してはこれまでに1.中間径フィラメントタンパク質であるTransitinがNumbと同様に分裂期神経幹細胞の細胞表層の基底膜側に局在すること、2.TransitinがNumbに直接結合すること、3.Transitinの機能がNumbの非対称な細胞内局在に必要であること、4.Transitinが細胞分裂の終わりに基底膜側から側方に細胞表層を移動しそ不等分配されること等を明らかにしてきた。今年度はまず、Transitin-EGFPを導入した脳組織を脳室側からタイムラプス観察して、脳全体を一つのフィールドとして考えた時にTransitinの側方移動が何らかの方向性を示すのか調べた。その結果、Transitinが不等分配される場合には法則性は認められなかったが、等分配される場合にはTransitinがmedial-caudal側に局在する傾向が認められ、ある種の平面内極性の存在が示唆された。また、Transitinの側方移動のメカニズムを探る目的で微小管骨格やアクチンフィラメントに注目して解析を行った。その結果、分裂中の神経上皮細胞をサイトカラシンDで処理して分裂中の神経幹細胞の表層に分布するアクチン骨格を壊した場合、Transitinが細胞表層から外れてしまうことが、Transitin-EGFPを導入した大脳をスライス培養してタイムラプス観察することによって明らかとなった。すなわち、Transitin/Numb複合体はアクチン骨格を介して細胞膜に結合していると考えられた。また、非筋肉ミオシン阻害剤であるBlebbistatinで処理するとTransitinが側方に移動できなくなった。細胞表層にはMyosin2が多く分布しており、Transitin/Numb複合体はMyosin2によって表層アクチン上を運ばれていると考えられた。

This study is related to: 1. Transitin and Numb are the same in the basal membrane side of the cell surface; 2. Transitin and Numb are directly bound; 3. Transitin and Numb are not related in the intracellular side. 4. Transtin cell division ends on the basement membrane side and ends on the lateral surface. This year, Transitin-EGFP is introduced into the organization, and the direction of Transitin's lateral movement is indicated. In the case of unequal distribution of Transitin, the law of Transitin is reversed. In the case of equal distribution of Transitin, the medial-caudal side of Transitin tends to be reversed. Transtin's lateral movement and analysis Results: Transitin-EGFP was introduced into the cell surface layer of the dividing neuroepithelial cells and cultured in vitro. Transtin/Numb complex is a cell membrane binding agent. Blobbistatin is a non-muscle inhibitor. Myosin2 is distributed in the surface layer of the cell, and Transtin/Numb complex is distributed in the surface layer of the cell.