mRNA核外輸送トランスポーターTapの核膜孔通過機構

mRNA核输出转运蛋白Tap的核孔通过机制

• 批准号: 14035231
• 负责人: 片平 じゅん
• 金额: $ 1.79万
• 依托单位: Osaka University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 2002
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2002 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-14035231/
• 关键词: 核外輸送; 核膜孔複合体; mRNA; ヌクレオポリン

mRNA核外輸送因子Tap/p15ヘテロダイマーの核膜孔通過機序を明らかにするために、本年度研究実施計画に従い、Tapと種々のヌクレオポリン由来のフェニルアラニン-グリシン反復配列(FG-リピート)の結合をプルダウン法および表面プラズモン共鳴法を用いて解析した.Tapモノマーと種々のFG-リピートとの解離定数を測定したところ、いずれのリピート配列とも数ナノモルのオーダーの非常に強固かつ安定な結合を示すことが明らかとなった.しかしながら、核膜孔通過の方向性を決定するような、核から細胞質、あるいは細胞質から核に向かっての親和性の勾配を見出すことはできなかった.一方、Tap/p15ヘテロダイマーとFG-リピートとの結合は、TapモノマーとFG-リピートとの結合と比べて、特に解離相が促進されることにより一過性となり、その結果、結合親和性が100倍程度減少することを見出した.しかしながら、この場合も核膜孔通過の方向性を決定するような、ヌクレオポリン間の結合親和性の勾配を見出すことはできなかった.一方、マイクロインジェクション、in vitro importアッセイにより、Tap単独あるいはTap/p15ヘテロダイマーのNPC通過能を比較すると、ヘテロダイマーのみが核-細胞質間を両方向性に移動しうることを見出した。これらのことから、p15はTapとヌクレオポリンのFG-リピート間の結合を制御し、TapがNPCを通過するのを促進する活性を有する因子であると結論付けた.また、Tapの核膜孔通過の方向性は、FG-リピートとの結合特異性のみでは制御されていないことが示唆された.

The mRNA extra-nuclear delivery factor Tap/p15 transporter gene is used to determine the nuclear membrane hole through the sequence of information, this year's study is planned to be carried out. The origin of various kinds of Tap equipment is different from each other, and the number of dissociation data is determined by the number of dissociation data of each kind of FG, which is determined by the combination of the method of FG- and the method of surface chromatography. The number of equipment is very strong. The combination of stability and stability shows that it is very important to make sure that the number of units is very strong. The orifices of the nuclear membrane are determined by the direction of the cell, the cell, the cell. On the other hand, the combination of Tap/p15, FG-, Tap, FG-, and special isolation phase promotes the reduction of sexual performance, results, results, and sex in one party. The orifices of the nuclear membrane are determined by directionality, the combination and sexual matching of the nuclear membrane holes are determined by the directional method. One party, the other, the other, the first, the second, the third party, the second party, the third party, the third party, In combination with the control system, Tap NPC has been used to promote the activity of FG- in combination with the control system, and there are many factors in the system. The nuclear membrane holes of both Tap and Tap are instigated by the combination of directionality, FG- and special information.

项目成果

片平じゅん: "Complex formation between Tap and p15 affects binding to FG-repeat nucleoporins and nucleocytoplasmic shuttling"The Journal of Biological Chemistry. 277. 9242 (2002)

Jun Katahira：“Tap 和 p15 之间的复合物影响与 FG 重复核孔蛋白的结合和核细胞质穿梭”《生物化学杂志》277. 9242 (2002)。