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枯草菌における分泌タンパク質の品質管理システムの解析

枯草芽孢杆菌分泌蛋白质量控制体系分析

基本信息

批准号：
14037205
负责人：
山根國男
金额：
$ 1.6万
依托单位：
University of Tsukuba
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
2002
资助国家：
日本
起止时间：
2002 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-14037205/
关键词：
枯草菌タンパク質分泌品質管理機構 DNA microarray

项目摘要

枯草菌および類縁菌は非常に高いタンパク質分泌能を持ち、αーアミラーゼやプロテアーゼの生産菌として産業的にの利用されてきた。しかし遺伝子工学技術の確立している枯草菌を宿主に異種生物由来のタンパク質、ことにヒト由来のタンパク質を分泌生産させると大部分が分解され、培地中に蓄積させることは非常に困難である。さらにヒト・タンパク質と枯草菌α-アミラーゼとの融合体を分泌生産させた場合でも、ヒト・タンパク質部,分のみが分解される。これらのことは枯草菌内におけるタンパク質の品質管理機能が非常に強く、合成された異種タンパク質は異常タンパク質として認識され、分解されると予想される。そこで枯草菌のシャペロン系、プロテアーゼ系遺伝子の破壊株を用いてタンパク質の品質管理システムを解する。枯草菌α-アミラーゼとヒトB型肝炎表面抗原preS2領域との融合タンパク質を指標としてpreS2部分のみを分解するためにはどのような遺伝子が係わっているかをDNA microarray法によって解析した。PreS2の導入によって特異的に現れる分子シャペロンはClpC, CtsR, YvtBであること、また細胞膜に存在すると予想されるプロテアーゼとしてはまだ機能が明らかではないYcdDであることが示された。今後これらの遺伝子の破壊株を作成し、枯草菌における分泌タンパク質の品質管理機構の解析をさらに進めたいと考えている。

Substitution bacteria are very high in the secretion of protein, and the production of protein is very important. It is very difficult to establish the technology of genetic engineering in the field of Bacillus subtilis. In addition, the fusion product of Bacillus subtilis α-amyloid is secreted and produced in the same way as the fusion product. The quality control function of the plant is very strong, and the quality control function of the plant is very strong. The quality control system of the plant is used to control the quality of the plant. Subtilisin α-RNA and DNA microarray analysis of hepatitis B surface antigen preS2 domain and fusion protein PreS2 is introduced into the cell membrane, and the cell membrane is expressed in the cell membrane. In the future, the quality management organization of the production of the virus, the secretion of the virus, and the analysis of the quality management organization will be further examined.