内分泌撹乱物質で活性化されるエストロゲンレセプターの発生・生殖学的な生体作用機構

内分泌干​​扰物激活雌激素受体的发育和生殖生物学机制

• 批准号: 14042259
• 负责人: 津久井 通
• 金额: $ 2.5万
• 依托单位: Saitama Medical University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 2002
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2002 至 2003
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-14042259/
• 关键词: エストロゲンレセプター; エストロゲンシグナル; 組換えアデノウイルス; コンディショナルトランスジェニック; 細胞増殖; 生殖生理学; 黄体化; コンディショナル; トランスジェニックマウス; 内分泌攪乱物質

本研究課題において,平成14年度では非リガンド性constitutive active型のエストロゲンレセプター(caERαまたはcaERβ)の組換えアデノウイルスを作製しgain of functionした場合,マウス子宮において種々の分子マーカーのup-regulationやdown-regrationが観察され,これら分子マーカーの発現はERα特異的またはERβ特異的に,制御されている応答遺伝子が存在することを示唆した.また,これらの組換えウイルスを利用して,ERの下流応答遺伝子であるPP5(Protein Phosphatase 5)がNegativeにERの転写を制御していることを明らかにした(Mol.Endocrinol,2004).平成15年度においては,caERα,caERβのcTg (LGFPαとLDsRedβ)マウスの作製にそれぞれ成功し,少なくともこれらのcTg (conditional Transgenic)マウスの数ラインでレポーター遺伝子を発現していることが確かめられた.さらに,cTg (LGFPα)マウスにCreを発現する組換えアデノウイルスベクターを導入遺伝子することにより,卵巣において異所的なヒトERαの発現を確認し,外来性ERαの発現する部位において黄体様の組織が観察された.これらの黄体様の組織においては,ERの下流応答遺伝子である内在性のPRのup-regulationが観察された.マウス受精卵の2細胞期から発現が可能なCAGプロモーター支配下にCreを発現するTgマウスを既に作製し,cTgマウスに交配することにより,過剰なERαまたはERβのシグナルが如何に初期発生・成長に関与するか,内分泌攪乱物質でかく乱されたエストロゲンシグナルの生体作用機構のモデルが完成した.その他の結果として,ERの下流応答遺伝子の1つであるefp (estrogen finger protein)が乳癌細胞において14-3-3sigmaの分解に関与し,乳癌細胞の増殖に関与することを発見した(nature,2002)等の結果が得られた.

This research topic に お い て, pp.47-53 14 year で は non リ ガ ン ド sex constitutive type active の エ ス ト ロ ゲ ン レ セ プ タ ー (caER alpha ま た は caER beta) の group in え ア デ ノ ウ イ ル ス を cropping し gain of Function し た occasions, マ ウ ス uterus に お い て kind 々 の molecular マ ー カ ー の up - regulation や down - regration が 観 examine さ れ, こ れ ら molecular マ ー カ ー の 発 now は ER alpha specific ま た は ER beta specific に, suppression さ れ て い る 応 a heritage 伝 son が exist す る こ と を in stopping し た . ま た, こ れ ら の group in え ウ イ ル ス を using し て, ER の obscene 応 a posthumous son 伝 で あ る PP5 (Protein Phosphatase 5) が Negative に ER の planning write を suppression し て い る こ と を Ming ら か に し た (Mol. Endocrinol, 2004). 15 year pp.47-53 に お い て は, caER alpha, beta の caER cTg (LGFP alpha と LDsRed beta) マ ウ ス の cropping に そ れ ぞ れ し success, less な く と も こ れ ら の cTg (conditional Number of Transgenic) マ ウ ス の ラ イ ン で レ ポ ー タ ー posthumous son 伝 を 発 now し て い る こ と が か indeed め ら れ た. さ ら に, cTg (LGFP alpha) マ ウ ス に Cre を 発 now す る group in え ア デ ノ ウ イ ル ス ベ ク タ ー を import legacy 伝 son す る こ と に よ り, egg 巣 に お い て vision of な ヒ ト ER alpha の 発 を confirm し, foreignness ER alpha の 発 now す る parts に お い て corpus luteum others の organization が 観 examine さ れ た. こ れ ら の corpus luteum others の organization に お い て は, ER の Flow 応 a posthumous son 伝 で あ る internality の PR の up - regulation が 観 examine さ れ た. マ ウ ス fertilized egg の phase 2 cells か ら 発 が may now な the CAG プ ロ モ ー タ ー domination に Cre を 発 now す る Tg マ ウ ス を に for both し, cTg マ ウ ス に mating す る こ と に よ り, a turning な ER alpha ま た は ER beta の シ グ How ナ ル が に 発 early birth, growth に masato and す る か, endocrine disrupting substances で か く disorderly さ れ た エ ス ト ロ ゲ ン シ グ ナ ル の sick role institutions の モ デ ル が complete し た. そ の he と の results し て, ER の obscene 応 answer but 伝 son の 1 つ で あ る efp (estrogen finger Protein) が breast cancer cells に お い て sigma 14-3-3 の decomposition に masato し and breast cancer cells の raised colonization に masato and す る こ と を 発 see し た (such as nature, 2002) the result of の が ら れ た.

项目成果

Ikeda K, Ogawa S, Tsukui T, et al.(他5名): "Protein Phosphatase 5 Is a Negative Regulator of Estrogen Receptor-mediated Transcription."Mol Endocrinol.. (in Press). (2004)

Ikeda K、Okawa S、Tsukui T 等人（其他 5 人）：“蛋白磷酸酶 5 是雌激素受体介导的转录的负调节因子”。Mol Endocrinol..（出版中）。

Kawakami Y, TsukuiT, Ng JF, Belmonte C: "Frontiers in Mol.Biol.(Patterning in Vertebrate Development)"Oxford University Press. 11 (2003)

Kawakami Y、TsukuiT、Ng JF、Belmonte C：“分子生物学前沿（脊椎动物发育模式）”牛津大学出版社。

Fujita, M, Urano, T, Tsukui, T, et al., (他6名, 5番目): "Estrogen activates cyclin-dependent kinases 4 and 6 through induction of cyclin D in rat primary osteoblasts"Biochem. Biophys. Res. Commun.. 299. 222-228 (2002)

Fujita, M, Urano, T, Tsukui, T, et al.，（其他 6 人，第 5）：“雌激素通过诱导大鼠原代成骨细胞中的细胞周期蛋白 D 激活细胞周期蛋白依赖性激酶 4 和 6”Biochem。 . 299. 222-228 (2002)

Tsukui, T, Toyoda Y: "Methods Mol. Boil. Vol. 180"Humana Press. 73-82 (2002)

Tsukui, T, Toyoda Y：“分子煮沸方法。第 180 卷”Humana Press。

Fukuda A, Tokonabe S, Tsukui T.et al.(他4名, 5番目): "Alleviation of PC4-mediated transcriptional repression by the ERCC3 helicase activity of general transcription factor TFIIH."J Biol Chem.. 278. 14827-14831 (2003)

Fukuda A、Tokonabe S、Tsukui T.et al.（其他 4 人，第 5 篇）：“一般转录因子 TFIIH 的 ERCC3 解旋酶活性减轻 PC4 介导的转录抑制。”J Biol Chem.. 278. 14827-14831（ 2003）