エストロゲンシグナルの検出モデル動物の開発と周生期脳インプリンティング機構の解明

开发检测雌激素信号的模型动物并阐明围产期脑印记机制

• 批准号: 15688010
• 负责人: 石塚 真由美
• 金额: $ 18.64万
• 依托单位: Hokkaido University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (A)
• 财政年份: 2003
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2003 至 2005
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-15688010/
• 关键词: エストロゲン; レポーターアッセイ; in vivoイメージング; シトクロムP450; 環境化学物質; アロマターゼ; neonatal imprinting; ルシフェラーゼ; マイクロアレイ; トランスジェニック; レポーター; インプリンティング; ERE; 視床下部

環境化学物質の内分泌撹乱作用スクリーニングは、クリアランスや代謝的活性化機構、さらに臓器・細胞別の受容体活性化機構をも含めた、個体レベルでの毒性スクリーニング手法の確立が不可欠である。そこで、本研究では、エストロゲン結合サイト下流にレポーター遺伝子を結合し、ゲノムに導入することで、エストロゲンによる転写活性化を個体レベルで検出することができるトランスジェニック動物を作成し、環境化学物質に関して、これらの要素を含めた個体レベルでのレポーターアッセイを行う系を確立することを目的とした。今回、エストロゲン結合サイト-ルシフェラーゼ遺伝子を導入し、ジエチルスチルベストロールなど合成エストロゲンを投与し、そのシグナルの誘導について調べ、phenotypingを行った。エストロゲンによって転写活性が個体レベルで検出できる1 lineを得た。周生期におけるエストロゲンについて、in vivo、ex vivoによりシグナル検出を行った。また、シグナルの検出のために、ルシフェリン以外に、蛍光を用いたin vivoイメージングについても検討した。Qdot800やAlexa750を含む様々な波長を持つ蛍光色素をラット新生仔あるいはマウスに取り込ませ、個体in vivoにおけるイメージングを試みた。胎生仔・新生仔期では、精巣からテストステロンが一時的に分泌され、脳に到達し、CYP19(アロマターゼ)によってエストラジオールに変換され、脳の性分化を引き起こすさまざまな変化がmRNA、蛋白合成レベルで起こることが報告されている。そこで、Gene Chip(マイクロアレイ)を用いて周生期の脳において、テストステロンシャワーによって引き起こされるmRNAプロファイルの変動のスクリーニングや、それらが環境化学物質によってどのように変動するか、その影響を調べた。

Endocrine disruption of environmental chemicals, including mechanisms for activation of metabolism, mechanisms for activation of receptors, mechanisms for activation of individual receptors, and methods for establishment of toxicity mechanisms. In this study, the combination of the downstream and downstream genes, the introduction of the downstream and downstream genes, the activation of the downstream and downstream genes, the production of the downstream and downstream genes, the introduction of the downstream and downstream genes, the activation of the downstream and downstream genes, and the activation of the downstream and downstream genes. This time, the combination of the three elements of the three elements of the introduction, the three elements of the synthesis of the three elements of the introduction, the three elements of the introduction, the three elements of the induction, the three elements of the phenotype. The first line of activity is obtained from the individual. Life cycle: in vivo, ex vivo In addition to the above, light can be used in vivo. Qdot800 and Alexa750 contain different wavelengths of light and pigment, which are selected from among the new generation and individuals in vivo. During the fetal and neonatal period, the sperm is secreted at the same time, the sperm is reached, CYP19 (CYP19) is transformed, and the sex differentiation is initiated. The Gene Chip is used to modulate the effects of environmental chemicals on the development of genes, genes, and genes during the life cycle.

项目成果

Saito et al.: "Polymorphism in diazepam metabolism in Wistar rat"J Pharmaceutical Sciences. 93(5). 1271-1278 (2004)

Saito 等人：“Wistar 大鼠中地西泮代谢的多态性”J Pharmaceutical Sciences。

Nitric oxide enhances catechol estrogen-induced oxidative stress in LNCaP cells

• DOI: 10.1080/10715760400029710
• 发表时间: 2005-04
• 期刊: Free Radical Research
• 影响因子: 3.3
• 作者: K. Muzandu;Z. Shaban;M. Ishizuka;A. Kazusaka;S. Fujita

AhR and PPARalpha : antagonistic effects on CYP2B and CYP3A, and additive inhibitory effects on CYP2C11.

AhR 和 PPARα：对 CYP2B 和 CYP3A 具有拮抗作用，对 CYP2C11 具有相加抑制作用。

• 发表时间: 2005
• 期刊: Xenobiotica. 35
• 作者: Shaban Z;Soliman M;El-Shazly S;El-Bohi K;Abdelazeez A;Kehelo K;Kim HS;Muzandu K;Ishizuka M;Kazusaka A;Fujita S.
• 通讯作者: Fujita S.

Maternal smoking during pregnancy and genetic polymorphisms in the Ah receptor, CYP1A1 and GSTM1 affect infant birth size in Japanese subjects

• DOI: 10.1093/molehr/gal013
• 发表时间: 2006-02-01
• 期刊: MOLECULAR HUMAN REPRODUCTION
• 影响因子: 4
• 作者: Sasaki, S;Kondo, T;Kishi, R
• 通讯作者: Kishi, R

Possible involvement of peroxynitrite in estrogen-induced oxidative stress.

过氧亚硝酸盐可能参与雌激素诱导的氧化应激。

• 发表时间: 2005
• 期刊: Free Radical Research 39
• 作者: Hamaoka;T.;Osada;T.;Murase;N.;Sako;T.;Higuchi;H.;Kurosawa;Y;Miwa;M.;Katsumura;T.;Chance;B.;Muzandu et al.
• 通讯作者: Muzandu et al.