权益分类	功能权益	普通用户	{{item.name}}会员
{{category.name}}	{{benefitItem.name}}

黄色ブドウ球菌の膜孔形成毒素における膜孔形成および標的細胞認識機構に関する研究

金黄色葡萄球菌成孔毒素膜孔形成及靶细胞识别机制研究

基本信息

批准号：
16017209
负责人：
神尾好是
金额：
$ 3.9万
依托单位：
Tohoku University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
2004
资助国家：
日本
起止时间：
2004 至 2005
项目状态：
已结题

项目摘要

黄色ブドウ球菌が大量に分泌し、感染に重要な役割を果たす2成分性毒素ロイコシジン(Luk:LukFとLukSから成る)並びにγヘモリジン(Hlg:LukFとHlg2から成る)は標的細胞膜上にヘテロ7量体の中間体を経て膜孔を形成し、さらに膜孔は集合して『超チャネル』を形成する。本研究でわれわれは毒素の各成分の標的細胞膜への結合のか如する因子を探索するとともに、1分子測定技術を駆使して毒素分子が膜に突き刺さるタイミングをナノメートルオーダーでリアルタイムで解析した。また、上記毒素遺伝子の発現調節遺伝子の同定を行った。その結果、(1)LukFの赤血球膜への結合に関与するアミノ酸残基を同定し、コリン残基結合部位変異体の詳細な解析を行って、stem伸長のタイミング及び膜上の因子との結合に必須なアミノ酸残基を同定した。(2)疎水的な環境におかれると蛍光を放つBadanをLukF成分のprestemに導入し、一分子技術を用いてstemの細胞膜中への貫入の可視化に成功した。Stemの貫入に伴う蛍光の増加は第2の成分(Hlg2)を作用させた後にのみ観察され、一つの膜孔を開口するには少なくとも3分子のLukF分子が必要であることを明らかにした。(3)Luk及びHlgが膜孔を形成する過程で、標的細胞膜上の脂質ラフトが重要な役割を果たしていることを明らかにした。Two-hybrid法により、さらにLukSと相互作用する標的細胞上因子の候補としてMD-2が得られた。(4)Hlg/Lukの産生はsae系により、転写レベルで正に調節されていることを明らかにした。

The two component toxins, Luk F and Luk S, are secreted in large quantities and are important for infection. The seven components of the toxin are produced on the target cell membrane. The seven components of the toxin are produced on the target cell membrane. The seven components of the toxin are produced on the target cell membrane. The seven components of the toxin are produced on the target cell membrane. In this study, we explored the binding factors of the target components of the toxin to the cell membrane, and analyzed them by molecular assay techniques. In this paper, we describe the development of toxin gene and the regulation of gene identity. The results are as follows: (1) The binding of LukF erythrocyte membrane is related to the determination of acid residues, the detailed analysis of the binding site of LukF residues, the elongation of stem and the binding of factors on membrane are related to the determination of acid residues. (2)The introduction of LukF components into the stem and the visualization of their penetration into the cell membrane by molecular technology were successful. The penetration of Stem is accompanied by the increase of the second component (Hlg2), which is necessary for the detection of LukF molecules in the membrane pores. (3) The process of membrane pore formation by Luk and Hlg is important for lipid metabolism in target cell membranes. Two-hybrid method is used to identify candidates for the target cellular factor MD-2. (4)Hlg/Luk generation is regulated by the regulation of the Hlg/Luk system.