HIVゲノムの核内輸送に関与するウイルスおよび宿主因子の解析

参与 HIV 基因组核转运的病毒和宿主因素分析

• 批准号: 16017233
• 负责人: 増田 貴夫
• 金额: $ 6.91万
• 依托单位: Tokyo Medical and Dental University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 2004
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2004 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-16017233/
• 关键词: HIV-1; インテグラーゼ; 逆転写過程; 核内移行; 組み込み; Gemin2; Rch-1; Transportin; インテグレーション; 核内輸送; siRNA; レンチウイルスベクター

【研究目的】HIVはウイルス粒子内のRNAゲノムをDMに変換し、宿主染色体に組み込むことで感染を成立させる。我々はこれまでにHIV-1インテグラーゼは本来の酵素活性の場であるウイルスゲノムの宿主染色体への組み込みに加え、脱殻、逆転写、核移行等ウイルス感染初期過程の各ステップにも機能的に関与していることを明らかにしてきた。本研究ではHIVインテグラーゼの機能解析とその結合因子として我々独自に同定した新規宿主因子の機能解析を行った。【研究成果】1)GST-インテグラーゼによるpull-down法HIV-1インテグラーゼに結合する核内移行関連宿主因子(Rch-1,Transportin)を同定した。2)siRNAにより各宿主因子の機能解析を行った結果、核内移行関連因子(Rch-1,Transportin)のHIV-1複製における機能的関与は細胞依存性であり、今後さらなる確認実験が必要であると考えられた。3)yeast-two hybrid法により新規インテグラーゼ結合因子(Gemin2)を同定した。4)HIV-1インテグラーゼのC-末領域(210-288)がGemin2との結合責任ドメインである。5)Gemin2はウイルス吸着/侵入後すみやかにインテグラーゼを介してウイルスゲノムと相互作用する。6)Gemin2はHIV-1ゲノムの逆転写過程後期および核内輸送、組み込みをサポートする宿主因子のひとつである。【考察】我々はインテグラーゼが本来のウイルスゲノムの宿主染色体への組み込みに加え、脱殻、逆転写、核移行等ウイルス感染初期過程の各ステップにも機能的に関与していることを明らかにしてきた。本研究結果はインテグラーゼの新たな機能を仲介する宿主因子候補のひとつであると考えられる。また、インテグラーゼを標的とした抗HIV阻害剤開発においてもあらたな戦略法を提示しうるものと期待される。

【 objective 】 to HIV は ウ イ ル ス particles within の RNA ゲ ノ ム を DM に variations in し, host chromosome に み 込 む こ と で established infection を さ せ る. I 々 は こ れ ま で に HIV - 1 イ ン テ グ ラ ー ゼ は の enzyme activity originally の field で あ る ウ イ ル ス ゲ ノ ム の host chromosome へ の group み 込 み に え, hulling, inverse planning to write, such as nuclear migration ウ イ ル ス の early infection process each ス テ ッ プ に も functionary に masato and し て い る こ と を Ming ら か に し て き た. This study で は HIV イ ン テ グ ラ ー ゼ の function analytical と そ の combination factor と し て I 々 に alone with fixed し た function of new rules on the host factors の parsing line を っ た. 【 results 】 1) GST - イ ン テ グ ラ ー ゼ に よ る pull - down method of HIV - 1 イ ン テ グ ラ ー ゼ に combining す る nuclear internal migration masato even host factors (Rch - 1, Transportin) with fixed し を た. 2) siRNA に よ り each host factors の line function analytical を っ た results, nuclear internal migration masato even factor (Rch - 1, Transportin) の HIV - 1 copy に お け る function masato and は cells dependence で あ り, future さ ら な る confirmation be 験 が necessary で あ る と exam え ら れ た. 3) The new regulation of the yeast-two hybrid method によ テグラ <s:1> ゼ ゼ ゼ ゼ ゼ binding factor (Gemin2)を is fixed <s:1> た. 4) HIV - 1 イ ン テ グ ラ ー ゼ の C - (210-288) at the end of the field が Gemin2 と の combining responsibility ド メ イ ン で あ る. 5) Gemin2 は ウ イ ル ス after sorption/intrusion す み や か に イ ン テ グ ラ ー ゼ を interface し て ウ イ ル ス ゲ ノ ム と interaction す る. 6) Gemin2 は HIV - 1 ゲ ノ ム の inverse planning process of writing late お よ び nuclear pumped in, group み 込 み を サ ポ ー ト す る host factors の ひ と つ で あ る. [investigation] I 々 は イ ン テ グ ラ ー ゼ が originally の ウ イ ル ス ゲ ノ ム の host chromosome へ の group み 込 み に え, hulling, inverse planning to write, such as nuclear migration ウ イ ル ス の early infection process each ス テ ッ プ に も functionary に masato and し て い る こ と を Ming ら か に し て き た. The results of this study show that the new たな function を intermediary する host factor candidate ひと ひと であると であると is used to investigate えられる. ま た, イ ン テ グ ラ ー ゼ を mark と し た HIV resistance against tonic open 発 に お い て も あ ら た な 戦 slightly method を prompt し う る も の と expect さ れ る.

项目成果

Repression of tax expression is associated both with resistance of human T-cell leukemia virus type 1-Infected T cells to killing by tax-specific cytotoxic T lymphocytes and with impaired tumorigenicity in a rat model

• DOI: 10.1128/jvi.78.8.3827-3836.2004
• 发表时间: 2004-04-01
• 期刊: JOURNAL OF VIROLOGY
• 影响因子: 5.4
• 作者: Nomura, M;Ohashi, T;Kannagi, M
• 通讯作者: Kannagi, M

Structural Analysis of a Mutant of HIV-1 Integrase Zinc Finger Domain that Forms a Single Conformation.

形成单一构象的 HIV-1 整合酶锌指结构域突变体的结构分析。

• 发表时间: 2006
• 期刊: J.Biochem. (in press)
• 作者: Tamura K;Oue A;Tanaka A;Shimizu N;Takagi H;Kato N;Morikawa A;Hoshino H.;Ueda Takumi et al.;Sakakura Masayoshi et al.;T.Koshizuka et al.;F.Shaku et al.;M.Tanaka et al.;L.Liang et al.;Nomura Yusuke
• 通讯作者: Nomura Yusuke

Identification of two new HLA-A 1101-restricted tax epitopes recognized by cytotoxic T lymphocytes in an adult T-cell leukemia patient after hematopoietic stem cell transplantation

• DOI: 10.1128/jvi.79.15.10088-10092.2005
• 发表时间: 2005-08-01
• 期刊: JOURNAL OF VIROLOGY
• 影响因子: 5.4
• 作者: Harashima, N;Tanosaki, R;Kannagi, M
• 通讯作者: Kannagi, M

Potential immunogenicity of adult T cell leukemia cells in vivo

• DOI: 10.1002/ijc.20737
• 发表时间: 2005-03-20
• 期刊: INTERNATIONAL JOURNAL OF CANCER
• 影响因子: 6.4
• 作者: Kurihara, K;Harashima, N;Kannagi, M
• 通讯作者: Kannagi, M

Suppression of HIV-1 replication by arginine deiminase of Mycoplasma arginini.

精氨酸支原体精氨酸脱亚胺酶抑制 HIV-1 复制。

• 发表时间: 2006
• 期刊: J.Gen.Virol. (in press)
• 作者: Kawamura T;Watanabe M;et al.;Kubo Makoto
• 通讯作者: Kubo Makoto