発がん抑制に機能するDNA修復タンパクにおける相同組換え制御ドメイン

DNA 修复蛋白中的同源重组控制域具有抑制癌变的功能

• 批准号: 16021205
• 负责人: 田内 広
• 金额: $ 2.62万
• 依托单位: Ibaraki University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 2004
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2004 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-16021205/
• 关键词: 高発がん性遺伝病; 遺伝子安定性; DNA損傷修復; 相同組換え修復

高頻度の悪性腫瘍発症や放射線高感受性、S期チェックポイント異常を示す遺伝病、ナイミーヘン症候群(NBS)の原因タンパクNBS1は、RAD50/MRE11と複合体を形成し、その局在や活性を制御してDNA二重鎖切断(dsb)修復において重要な役割を有している。代表者は、NBS1がdsb修復過程のうちでも正確に損傷を修復する機構である相同組換え修復に必須であることを明らかにし、その機能がどのようにして発現されているのかを解明することを目指している。本研究では、NBS1タンパクにおいて相同組換え修復に重要なドメインを明らかにするため、NBS患者由来細胞株に相同組換えを検出するレポーター遺伝子SCneoを導入して解析を進めた。SCneoレポーターは特定の箇所にdsbを導入し、細胞の薬剤耐性からその後の修復が相同組換えであるかどうかが判定できるシステムである。これまでにSCneo導入NBS患者細胞では、Nbs1ノックアウト細胞と同様に相同組換え頻度が顕著に低下する一方で、その組換え頻度の低下は、全長NBS1タンパクを発現させることで相補でき、C末のMRE11結合ドメインが相同組換え活性に必須であることが明らかとなっている。今年度はこれを受けてNBS1のN末のFHA/BRCTドメインおよびATMによってリン酸化されるセリン残基について、いくつかの変異NBS1タンパクの発現下で相同組換え頻度がどのように変化するかを調べた。その結果、N末のFHA/BRCTドメインが相同組換えの制御に必須である一方、ATMによるリン酸化は相同組換えに必須ではないことが明らかとなった。このことからヒト細胞において、NBS1がMRE11/RAD50複合体の細胞内局在や活性を制御することが相同組換え機構の制御に重要であることが示唆された

High sensitivity, S-phase syndrome, syndrome (NBS), disease, NBS1, RAD50/MRE11 complex formation, active control, DNA double transection (dsb) repair, repair, repair and repair. The representative and NBS1 dsb repair procedures are correct and correct. In the same organization, it is necessary to make sure that the system is correct, and that the machine is able to make sure that it is clear that the system is correct, and that the machine can verify that the system is correct. In this study, both NBS1 and NBS1 were tested in the same group. The important information in this study was that the cell lines of patients with NBS were isolated from the same cell line. The results showed that there was no significant difference between the two groups. In the case of SCneo, the dsb is imported from a specific location, and the tolerance test is performed after the repair of the same system. The cells of patients with normal SCneo and those of patients with NBS had the same results as those of the same group, while those of the same group had the same effect, while those of the full-length NBS1 group showed that there was no significant difference between the two groups, and that the activity of the same group of cells in the combination of MRE11 and DNA at the end of C must be determined. At the end of this year, NBS1 was affected by FHA/BRCT. This year, the results showed that there was no significant difference between the two groups in terms of acidification, NBS1, and so on. this year, we will be affected by the same amount of NBS1. The result of the test, at the end of the day, it is necessary to register the system of the same group of FHA/BRCT users, and the same group of users of the same group of ATM users must have the correct information. This is very important for the control of important equipment in the system of the same system. The intracellular bureau of the NBS1 MRE11/RAD50 complex is responsible for the control of the same system.