DNA損傷誘発性がん細胞死の抑制因子探索とその制御機構

寻找DNA损伤诱导癌细胞死亡的抑制因子及其控制机制

• 批准号: 16022222
• 负责人: 吉田 清嗣
• 金额: $ 2.56万
• 依托单位: Tokyo Medical and Dental University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 2004
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2004 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-16022222/
• 关键词: アポトーシス; DNA損傷; プロテオミクス; キナーゼ; がん細胞

c-Ablチロシンキナーゼは細胞質、核両方に存在するが、核内c-AblがDNA損傷により活性化し、アポトーシスを誘導することが知られている。このメカニズムを解明するためLC-MS/MSによって複合体を解析したところ、そのひとつとして14-3-3というアダプター分子を単離した。14-3-3は多彩な機能を有するが、その一つとして相互作用する標的タンパク質の細胞内局在を調節していることが多数報告されている。我々はすでにc-AblはDNA損傷に伴って核に移行することを見い出していることから、14-3-3がこの核移行に何らかの関与があるかを検討した。その結果、細胞を抗癌剤で処理すると、c-Ablと14-3-3の複合体形成が著しく低下していることが明らかとなった。これはc-Ablと14-3-3の相互作用が、DNA損傷によって何らかのメカニズムにより解消されることを意味する。また、c-Ablと14-3-3の複合体は細胞質にのみ見られることから、DNA損傷によるc-Ablの核移行は、14-3-3との解離によるものではないかと考えられた。そこでc-Ablと14-3-3の解離のメカニズムについて検討したところ、DNA損傷におけるc-Ablの14-3-3からの解離にはJNKによる14-3-3のリン酸化が関わっていることが判明した。さらにc-Ablの核移行には14-3-3が関与していることから、その制御がアポトーシス誘導にどのような影響を与えているかについて検討を行った。細胞にc-Ablを導入するとアポトーシスを誘導し、抗癌剤処理によりその誘導能は増強される。そこに14-3-3を加えると、有意にアポトーシスを抑制することがわかった。さらにJNKでリン酸化を受けない14-3-3変異体を加えると、アポトーシス抑制能はさらに高まることが明らかとなった。この結果からc-Ablの核移行を14-3-3によって阻害すると、DNA損傷によって惹起されるアポトーシス誘導が抑えられることが強く示唆された。

C - Abl チ ロ シ ン キ ナ ー ゼ は cytoplasm, nuclear struck に exist す る が, nuclear c - Abl が DNA damage に よ り activeness し, ア ポ ト ー シ ス を induced す る こ と が know ら れ て い る. こ の メ カ ニ ズ ム を interpret す る た め LC - MS/MS に よ っ て complex analytical し を た と こ ろ, そ の ひ と つ と し て 14-3-3 と い う ア ダ プ タ ー molecular を 単 from し た. Function of the 14-3-3 は colorful な を have す る が, そ の a つ と し て interaction す る mark タ ン パ ク の cell bureau in を modulate し て い る こ と が most reports さ れ て い る. I 々 は す で に c - Abl は DNA damage に with っ て nuclear に transitional す る こ と を see い out し て い る こ と か ら, the 14-3-3 が こ の nuclear migration に what ら か の masato and が あ る か を beg し 検 た. そ の results, cell を anti-cancer tonic で 処 Richard す る と, c - Abl と 14-3-3 の complex formation が し く low し て い る こ と が Ming ら か と な っ た. こ れ は c - Abl と 14-3-3 の が interaction, DNA damage に よ っ て what ら か の メ カ ニ ズ ム に よ り null さ れ る こ と を mean す る. ま た, c - Abl と 14-3-3 の complex は cytoplasm に の み see ら れ る こ と か ら, DNA damage に よ る c - Abl の nuclear migration は, the 14-3-3 と の dissociation に よ る も の で は な い か と exam え ら れ た. そ こ で c - Abl と の の dissociation 14-3-3 メ カ ニ ズ ム に つ い て beg し 検 た と こ ろ, DNA damage に お け る c - Abl の 14-3-3 か ら の dissociation に は JNK に よ る 14-3-3 の リ ン acidification が masato わ っ て い る こ と が.at し た. さ ら に c - Abl の nuclear migration に は 14-3-3 が masato and し て い る こ と か ら, そ の suppression が ア ポ ト ー シ ス induced に ど の よ う な influence を and え て い る か に つ い て 検 line for を っ た. The induction of にc-Ablを into するとアポト に シスを シスを and the treatment of anti-cancer drugs with によ <s:1> そ <s:1> can <s:1> enhance される. そ こ に を 14-3-3 plus え る と, intentionally に ア ポ ト ー シ ス を inhibit す る こ と が わ か っ た. さ ら に JNK で リ ン acidification を by け な い - 14-3-3 variants を plus え る と, ア ポ ト ー シ ス can inhibit は さ ら に high ま る こ と が Ming ら か と な っ た. こ の results か ら c - Abl の nuclear migration を 14-3-3 に よ っ て resistance against す る と, DNA damage に よ っ て provoked さ れ る ア ポ ト ー シ ス induced が え suppression ら れ る こ と が く and shown strong sucking さ れ た.

项目成果

病気はどこまでゲノムで決められているか『癌』

疾病在多大程度上是由基因组决定的？

• 发表时间: 2004
• 期刊: MolecularMedicine 41・増刊
• 作者: 吉田清嗣;三木義男
• 通讯作者: 三木義男

転写因子と癌II : BRCAと発癌

转录因子与癌症 II：BRCA 与癌变

• 发表时间: 2004
• 期刊: 臨床検査 48
• 作者: 吉田清嗣;三木義男
• 通讯作者: 三木義男

SNPsと有害事象情報

SNP 和不良事件信息

• 发表时间: 2004
• 期刊: 現代医療 36
• 作者: 吉田清嗣;三木義男
• 通讯作者: 三木義男

Inhibition of human p53 basal transcription by down-regulation of protein kinase Cδ

• DOI: 10.1074/jbc.m306979200
• 发表时间: 2004-03-12
• 期刊: JOURNAL OF BIOLOGICAL CHEMISTRY
• 影响因子: 4.8
• 作者: Abbas, T;White, D;Bargonetti, J
• 通讯作者: Bargonetti, J

JNK phosphorylation of 14-3-3 regulates nuclear targeting of c-Abl in the apoptotic response to DNA damage.

14-3-3 的 JNK 磷酸化在 DNA 损伤的细胞凋亡反应中调节 c-Abl 的核靶向。

• 发表时间: 2005
• 期刊: Nat Cell Biol. 7
• 作者: Hayashi T;et al.;Yoshida K
• 通讯作者: Yoshida K