マトリプターゼの分解抑制に基づくがん診断法の確立

基于抑制matriptase降解的癌症诊断方法的建立

• 批准号: 16023237
• 负责人: 三善 英知
• 金额: $ 1.92万
• 依托单位: Osaka University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 2004
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2004 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-16023237/
• 关键词: 癌; 連鎖; β1-6鎖; GnT-V; 転移; マトリプターゼ; プロテアーゼ; プロテオリーシス

マトリプターゼは膜結合型のセリンプロテアーゼで、癌の浸潤/転移に深く関与する。私達はマトリプターゼに存在する糖鎖構造を糖転移酵素GnT-Vの遺伝子導入により改変させると、マトリプターゼの分解が著しく抑制されることを見い出した(JBC277,16960-16967,2002)。本研究では、精製したマトリプターゼを用いて、糖鎖修飾によるマトリプターゼ安定性の分子機構を解明し、マトリプターゼに存在する4カ所のN型糖鎖の中で772番目のAsnに存在する糖鎖がプロテアーゼに対する分解抑制に最も重要であることを見いだした。すなわち、GnT-Vを過剰発現した胃癌細胞からマトリプターゼを精製すると、2002年の論文と同様GnT-Vによって糖鎖修飾をうけたマトリプターゼはトリプシン処理に対して、分解耐性となった。さらにsite directed mutagenesis法によりマトリプターゼの糖鎖のmutantを作製し、GnT-Vを高発現するCOS細胞に発現させトリプシン処理したところ、Asn772番目の糖鎖欠損株では容易に分解された。またGnT-Vは古くから癌の転移に関係が深い糖転移酵素として注目されてきたが、癌の種類によって予後因子としての重要性が異なる。つまりGnT-Vが糖鎖修飾し、その機能を変化させる標的分子の存在が意味を持つのではないかと考えられる。マトリプターゼは、GnT-Vの標的分子の1つで、甲状腺癌組織における両者の発現を検討したところ、非常に強い正の相関関係を認めた。さらに、マトリプターゼの糖鎖の違いを生かした新しい臨床診断の開発を目指して、マトリプターゼのELISA系を確立した。

マ ト リ プ タ ー ゼ は type membrane bound の セ リ ン プ ロ テ ア ー ゼ で, deep の infiltrating/planning move に く masato and す る. Private da は マ ト リ プ タ ー ゼ に exist す る を lock structure planning to move sugar sugar enzyme GnT -v の heritage 伝 son import に よ り change - さ せ る と, マ ト リ プ タ ー ゼ の decomposition が the し く inhibit さ れ る こ と を see い out し た (JBC277, 2), 16960-16967200. This study で は, refined し た マ ト リ プ タ ー ゼ を with い て, sugar lock modification に よ る マ ト リ プ タ ー ゼ stability の molecular institutions を interpret し, マ ト リ プ タ ー ゼ に exist す る 4 カ の by N sugar lock の で in 772's mesh の Asn に exist す る sugar lock が プ ロ テ ア ー ゼ に す seaborne る decomposition inhibition に も most important で あ る こ と を see い だ し た. す な わ ち, GnT - V を turning 発 now し た gastric cancer cells か ら マ ト リ プ タ ー ゼ を refined す る と, 2002 の thesis と with others in GnT -v に よ っ て sugar lock modified を う け た マ ト リ プ タ ー ゼ は ト リ プ シ ン 処 Richard に し seaborne て, decomposition patience と な っ た. さ ら に site directed mutagenesis method に よ り マ ト リ プ タ ー ゼ の sugar lock の mutant を し, GnT - V を high 発 now す る COS cell に 発 now さ せ ト リ プ シ ン 処 Richard し た と こ ろ, Asn772 transgressions mesh の sugar lock owe damage strain で は easy に decomposition さ れ た. ま た GnT -v は ancient く か ら carcinoma の planning move に masato is が deep い sugar planning shift enzyme と し て attention さ れ て き た が, cancer の に よ っ て in factor after と し て の importance が different な る. つ ま り GnT -v が lock modified し sugar, そ を の function - the さ せ の る target molecules exist が mean を hold つ の で は な い か と exam え ら れ る. マ ト リ プ タ ー ゼ は, 1 つ GnT - V の target molecules の で, thyroid carcinoma tissue に お け る struck is の 発 を now beg し 検 た と こ ろ, very strong に い is の masato masato is を recognize め た. さ ら に, マ ト リ プ タ ー ゼ の sugar lock の violations い を raw か し た new し い clinical diagnosis の open 発 を refers し て, マ ト リ プ タ ー ゼ の を established ELISA department し た.

项目成果

In vivo cleavage of α2,6-sialyltransferase by Alzheimer's β-secretase

阿尔茨海默病 β-分泌酶对 α2,6-唾液酸转移酶的体内裂解

• 发表时间: 2005
• 期刊: J.Biol.Chem. 280
• 作者: S.Kitazume;K.Nakagawa;R.Oka;Y.Tachida;K.Ogawa;Y.Luo;M.Citron;H.Shitara;C.Taya;H.Yonekawa;J.C.Paulson;E.Miyoshi;N.Taniguchi;Y.Hashimoto
• 通讯作者: Y.Hashimoto

Introduction of bisecting GlcNAc into integrin α5β1 reduces ligand binding and down-regulates cell adhesion an cell migration

将平分 GlcNAc 引入整合素 α5β1 会减少配体结合并下调细胞粘附和细胞迁移

• 发表时间: 2004
• 期刊: J Biol Chem. 279(19)
• 作者: Kanamori;T.;Shen-Feng Ma et al.;Kitazume S;Makiya Nishikawa et al.;Inamori K I;Kenji Hyoudou et al.;Akita H D;Yuriko Higuchi et al.;Ito Y;Ihara S;Isaji T
• 通讯作者: Isaji T

Polo-like kinase 1 overexpression is an early event in the progression of papillary carcinoma.

• DOI: 10.1038/sj.bjc.6601540
• 发表时间: 2004-01-26
• 期刊: British journal of cancer
• 影响因子: 8.8

N-acetylglucosaminyltransferase IX acts on the GlcNAcβ1,2-Manalpha 1-Ser/Thr moiety, forming α2,6-branched structure in brain O-mannosyl glycan

N-乙酰氨基葡萄糖转移酶 IX 作用于 GlcNAcβ1,2-Manalpha 1-Ser/Thr 部分，在脑中形成 α2,6-支链结构 O-甘露糖基聚糖

• 发表时间: 2004
• 期刊: J Biol Chem. 279(4)
• 作者: Kanamori;T.;Shen-Feng Ma et al.;Kitazume S;Makiya Nishikawa et al.;Inamori K I
• 通讯作者: Inamori K I

Addition of β 1-6 GlcNAc branching on matriptase increases the stability to degradation, especially via the Asn 772 site.

在基质酶上添加 β 1-6 GlcNAc 分支可提高降解稳定性，尤其是通过 Asn 772 位点降解的稳定性。

• 发表时间: 2004
• 期刊: Glycobiology 14(2)
• 作者: Park-Hah;J.O.;Kanno;H.;Kim;W.D.;Fujii;H.;Ihara S et al.
• 通讯作者: Ihara S et al.