マトリプターゼの分解抑制に基づく消化器がん診断法の確立

基于抑制matriptase降解的胃肠癌诊断方法的建立

• 批准号: 15025238
• 负责人: 三善 英知
• 金额: $ 1.54万
• 依托单位: Osaka University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 2003
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2003 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-15025238/
• 关键词: がんの転移; マトリプターゼ; GnT-V; 糖鎖; β1-6GlcNAc; プロテアーゼ; 甲状腺がん; トリプシン

申請書の目的に従い、以下の実験を行った。β1-6GlcNAc鎖をもつマトリプターゼと持たないものを各々精製し、degradation assayにより検討すると、β1-6GlcNAc鎖をもつマトリプターゼの分解が遅延した。種々のプロテアーゼ処理の中でトリプシンを用いた分解実験が最も差を認めた。マトリプターゼに存在する4箇所のアスパラギン結合型糖鎖にsite-directed mutagenesis法により変異を入れ、COSおよびCOS-GnT-V細胞に発現させたところ、どの部分にも糖鎖が付加されていることが確認された。各々のマトリプターゼのトリプシンに対する抵抗性を検討したところ、772番目のAsnの糖鎖欠損マトリプターゼが最も容易に分解された。すなわち、772番目に付加されるβ1-6GlcNAc鎖がプロテアーゼに対する抵抗性に一番重要な働きをしていることがわかった(以上Glycobiology14,139-146)。甲状腺癌組織を用いて100症例以上で免疫組織染色を行ったところ、マトリプターゼとGnT-Vの染色には非常に良い相関関係を認めた。さらに甲状腺癌細胞KAK-1にGnT-Vを過剰発現させdegradation assayを行ったところ分解抑制効果を認めた。細胞レベルで認められた糖鎖によるマトリプターゼの機能制御が、実際のヒト癌組織において認められたこと、また分子レベルで772番目の糖鎖構造に結合するβ1-6GlcNAc鎖が最も重要な意味をもつことから、マトリプターゼを標的にした消化器がん診断の基礎データは充分に蓄積されたと言える。今後ELISA系を確立させ、実際のヒト消化器癌の血清を用いて臨床診断法としての価値を検討してゆきたい。

The purpose of the application form is as follows: β1-6GlcNAc lock をもつマトリプターゼとholding たないものをeach refined し, degradation assayにより検すると、β1-6GlcNAc lockをもつマトリプターゼのdegradationがyanした. The kind of 々のプロテアーゼ treatment of の中でトリプシンを uses いた to decompose the いた実験がthe もbadst を recognize めた.マトリプターゼにexistingする4箇所のアスパラギンcombination type sugar lockにsite-directed mutagenesis methodにより変differentを入れ、COSおよびCOS-GnT-V Cell に発appears させたところ, どのpartにもsugar lock が福加されていることがconfirm された. Each 々のマトリプターゼのトリプシンに対するRESISTANCE を検question したところ, Chapter 772 Asn's sugar lock is the easiest to decompose.すなわち, 772nd chapter に Pay plus されるβ1-6GlcNAc lock がプロテアーゼに対するresistant に一一一Important な働きをしていることがわかった (above Glycobiology14,139-146). More than 100 cases of thyroid cancer tissue have been stained with immunohistochemistry and immunohistochemistry, and the staining with GnT-V has been very good and the correlation has been confirmed. The degradation inhibitory effect of thyroid cancer cell KAK-1 and GnT-V has been confirmed by the degradation assay. Cell locking function control system Cancer tissue recognition, sugar lock structure, molecular structure, molecular structure 772 The most important thing about 合するβ1-6GlcNAc lock means をもつことから、マトリプターゼを名にしたDigestionがんDiagnostic basisのデータはfullに Accumulationされたと语える. In the future, the ELISA system will be established and used as a clinical diagnostic method for digestive system cancer.

项目成果

Capurro M, Miyoshi E et al.: "Glypican-3 : A novel serum and histochemical marker for hepatocellular carcinoma"Gastroenterology. 125. 89-97 (2003)

Capurro M、Miyoshi E 等人：“Glypican-3：肝细胞癌的新型血清和组织化学标记物”胃肠病学。

Nakahara S, Miyoshi E et al.: "Involvement of oligosaccharide charges in α_5β_1 integrin in a cisplatin-resistant human squamous cell carcinoma cell line"Molecular Cancer Therapeutics. 2. 1207-1214 (2003)

Nakahara S，Miyoshi E 等人：“顺铂抗性人鳞状细胞癌细胞系中α_5β_1整联蛋白中寡糖电荷的参与”《分子癌症治疗》2. 1207-1214 (2003)。

Noda K, Miyoshi E et al.: "Relationship between elevated FX expression and increased production of GDP-L-fucose, a common donor substrate for fucosylation in human hepatocellular carcinoma and hepatoma cell lines"Cancer Research. 63. 6282-6289 (2003)

Noda K、Miyoshi E 等人：“FX 表达升高与 GDP-L-岩藻糖产量增加之间的关系，GDP-L-岩藻糖是人肝细胞癌和肝癌细胞系岩藻糖基化的常见供体底物”癌症研究。

Ito Y, Miyoshi E et al.: "Expression of α1,6 fucosyltransferase is bimodal in papillary carcinoma progression"Cancer Letter. 200. 167-172 (2003)

Ito Y、Miyoshi E 等人：“α1,6 岩藻糖基转移酶的表达在乳头状癌进展中是双峰的”Cancer Letter。200. 167-172 (2003)

Ihara S, Miyoshi E et al.: "Addition of β1-6 GlcNAc branching on matriptase increases the stability to degradation, especially via the Asn 772 site"Glycobiology. 14. 139-146 (2004)

Ihara S、Miyoshi E 等人：“在基质酶上添加 β1-6 GlcNAc 分支可提高降解稳定性，尤其是通过 Asn 772 位点”Glycobiology. 14. 139-146 (2004)