ヒト胎盤形成におけるゲノムインプリント機構の役割について

基因组印记机制在人胎盘形成中的作用

• 批准号: 16045212
• 负责人: 加藤 聖子
• 金额: $ 3.84万
• 依托单位: Kyushu University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 2004
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2004 至 2005
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-16045212/
• 关键词: ゲノムインプリント; ヒト胎盤幹細胞; Dnmt3L

1.ヒト・トロホブラスト幹細胞(TS細胞)の樹立と未分化維持機構の解明;マウストロホブラスト幹細胞(TS細胞)は未分化維持に胎児側因子であるNodalやFGF4のシグナルが必須である。ヒトTS細胞の樹立は未だ報告はない。ヒト初期胎盤絨毛よりcytotrophoblastを分離。FACSを用い未分化幹細胞を単離。幹細胞特異的な表面抗原としてCD49を用い、高純度な幹細胞を分離した。この細胞群の特性を解析した。未分化幹細胞維持に必須なBmiIをレンチウイルスベクターを用い、遺伝子導入し継代。FGF4及びヘパリンを除いた培養系で、細胞培養の変化、巨細胞の出現の有無を確認した。分化、未分化TS細胞株で、マイクロアレイ法による大容量遺伝子発現解析システムを応用し、分化に伴い顕著な発現変化を示す遺伝子群を同定中である。マウスTS細胞でも同様の検討を行い共通点、相違点を明確にする。2.胎盤形成とゲノムインプリント(GI)の分子機構;改変単為発生(PG)胚の胎盤について解析している。GIを受ける前の卵子:非成長期卵母細胞核(ng)とGIを獲得した後の卵子:完全に成長した卵母細胞核(fg)よりなる単為発生胚(ng/fgPG)を作製した。fg/fgPG胚では胎盤はほとんど形成されないのに対し、ng/fgPG胚の胎盤は正常に発育した。ng/fgPG胚のGIの部分的改善したPG胚つまりGI遺伝子H19の欠損マウス由来のng卵を使用した改変PG胚(H19Δ13ng/fgPG)では胎盤組織構築は完成し、妊孕性を有する。fg/fgPG胚、ng/fgPG胚、H19Δ13ng/fgPG胚の順に、GIは改善され、同時に胎盤組織も構築される。これらマウスの胎盤機能について(in vitro in vivo)解析している。集合キメラを作成し、胎盤機能の改善をするか検討している。

1。建立人类滋养细胞干细胞（TS细胞）和阐明未分化的维持机制；小鼠滋养细胞干细胞（TS细胞）需要胎儿因子淋巴结和FGF4的信号，以维持未分化的信号。没有关于建立人类TS细胞的报道。细胞营养细胞与早期的人胎盘绒毛分离。使用FACS分离未分化的干细胞。 CD49用作干细胞特异性表面抗原，以分离高纯净的干细胞。分析了该细胞组的特征。 BMII的基因转移和通过，这对于维持未分化的干细胞至关重要，是使用慢病毒载体进行的。在排除FGF4和肝素的培养系统中证实了细胞培养的变化以及巨细胞的存在或不存在。在分化和未分化的TS细胞系中，使用微阵列方法的大量基因表达分析系统被应用于识别具有分化表达显着变化的基因组。将对小鼠TS细胞进行类似的研究，以阐明共同点和差异。 2。胎盘形成和基因组烙印的分子机制（GI）；胎盘发生变化（PG）胚胎中的胎盘分析。在非生长卵母细胞核（NG）和孤雌生殖胚（NG/FGPG）后接受GI之前的鸡蛋：由完全生长的卵母细胞核（FG）组成。 FG/FGPG胚胎的胎盘几乎没有形成，而Ng/FGPG胚胎的胎盘正常形成。使用缺乏GI基因H19的小鼠的NG卵，已完成且肥沃的Ng胚胎（H19Δ13NG/FGPG）的NG/FGPG胚胎的部分GI（H19Δ13NG/FGPG）已肥沃。按照FG/FGPG胚胎的顺序，NG/FGPG胚胎和H19Δ13NG/FGPG胚胎，GI得到改善，并同时构建胎盘组织。这些小鼠的胎盘功能在体内分析。我们正在考虑是否创建组嵌合体并改善胎盘功能。

项目成果

Epigenetic silencing of the imprinted gene ZAC by DNA methylation may play a role in may play a role in Human ovarian cancer.

DNA甲基化导致的印记基因ZAC的表观遗传沉默可能在人类卵巢癌中发挥作用。

• 发表时间: 2005
• 期刊: Int. J Cancer 115
• 作者: Tanaka H.;et al.;Hamazaki T;Kamikihara T
• 通讯作者: Kamikihara T

インプリントと生殖異常

印记和生殖异常

• 发表时间: 2005
• 期刊: Molecular Medicine 42,2
• 作者: 有馬隆博;他
• 通讯作者: 他

ZAC, LIT1 (KCNQ1OT1) and p57KIP2 (CDKN1C) are in an imprinted gene network which may play a role in Beckwith-Wiedemann Syndrome.

ZAC、LIT1 (KCNQ1OT1) 和 p57KIP2 (CDKN1C) 位于印记基因网络中，可能在 Beckwith-Wiedemann 综合征中发挥作用。

• 发表时间: 2005
• 期刊: Nucleic Acids Research. 33
• 作者: Ihara M.;et al.;Takahashi K;Fukuhara A;Arima T
• 通讯作者: Arima T

ゲノムインプリントと生殖補助技術

基因组印记与辅助生殖技术

• 发表时间: 2004
• 期刊: 産婦人科の世界 56
• 作者: 上木原哲也;他
• 通讯作者: 他