权益分类	功能权益	普通用户	{{item.name}}会员
{{category.name}}	{{benefitItem.name}}

シナプス後部に局在するグリア因子受容体,ssLRP,の機能の解明

阐明位于突触后区域的神经胶质因子受体 ssLRP 的功能

基本信息

批准号：
16047211
负责人：
鈴木龍雄
金额：
$ 4.74万
依托单位：
Shinshu University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
2004
资助国家：
日本
起止时间：
2004 至 2005
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-16047211/
关键词：
postsynaptic density astrocyte LDL receptor-related protein cholesterol calmodulin kinase II synpatogenesis PDZ domain knockout mouse

项目摘要

シナプスを取り巻くアストロサイトから分泌される因子によってシナプスの形成と機能が修飾されると報告されている.我々は,シナプス後部タンパク質,LRP4,をコードする完全長遺伝子をクローニングした.LRP4はLDL receptor familyのメンバーであり,シナプス後部にターゲットすると考えられた.LDL receptor familyのメンバーの機能として一般に,コレステロールの代謝,その他のリガンドの受容と取り込み,およびそれに伴う細胞内へのシグナル伝達である.我々は,LRP4がグリアからの放出因子のシナプス後部側の受容体で,グリア-シナプス相関の重要な担い手の一つでははないかと考えて研究を行った.(1)以前作成した抗C末抗体は,主要なPSDタンパク質,synGAP,とクロスリアクトするという重大欠陥が判明した。そこで新たに全く新規に2種の抗LRP4抗体を作成した(1.細胞外ドメインのリガンド結合部位と推定される部位,2.cytosolio C末部分をそれぞれエピトープとした).それにより,内在性LRP4を同定し,細胞内局在(細胞下分画法,培養神経細胞の細胞染色)を明らかにした。(2)上記の抗体を用いて,神経系培養細胞の細胞染色を行ったところ,LRP4は培養初期から発現していること,成熟神経細胞の他,神経系の未分化細胞にも発現していることが明らかになった。(3)初代神経細胞培養系にグリア細胞のconditioned medium (GCM)を添加することにより,神経細胞の分化,シナプス形成が促進された。GCMによりグリア系細胞の増殖が増幅されることが寄与している機構が示唆された.(4)抗LR抗体(リガンド結合領域に対する抗体)を培養神経細胞に投与することにより,神経細胞の形態,特にシナプスの脱落が惹起された。培養神経細胞にコレステロール合成阻害剤を投与すると,同様な減少が引き起こされること,また,その細胞に外部からコレステロールを投与することにより,シナプス脱落が部分的ではあるが,解消されることから,上記抗LR抗体の作用は,抗LR抗体が,グリアからのコレステロール供給をブロックするために起きる可能性が考えられた。(5)LRP4のApoE結合能を調べたが,ポジティブな結果は得られなかった。おそらく,量的な問題および方法論的な問題によるものと考えられた。これらの問題を解決した上で再検討を要する。(6)ノックアウトマウスの作成の為のターゲッティングベクターはほぼ完成まで近づいた.

The expression of a gene is a function of the gene. LRP4, LDL receptor family, LDL receptor family. The LRP4 is an important part of the LRP4 receptor, and the LRP 4 receptor is an important part of LRP 4 receptor. (1)Previously, anti-C antibodies were produced, mainly due to PSD,synGAP, and significant deficiencies. Two kinds of anti-LRP 4 antibodies were prepared (1. extracellular binding sites and 2. cytosolio C terminal sites). In addition, intrinsic LRP4 was also determined, and intracellular staining (subcellular staining, cell staining of cultured neurons) was performed. (2)In addition, LRP4 was detected in the early stage of culture, mature neurons and undifferentiated cells of the nervous system. (3)The growth and differentiation of primary cultured neurons in conditioned medium (GCM) were promoted by the addition of GCM. The growth of GCM cells is increasing, and the growth of GCM cells is increasing. (4)Anti-LR antibody (anti-LR antibody) is administered to cultured neurons, and the morphology of neurons, especially the shedding of neurons, is caused. The effect of anti-LR antibody on the growth of neurons was studied. (5) ApoE binding energy of LRP4 is modulated, and the result is obtained. The problem of quantity is the problem of methodology. The problem is solved and discussed again. (6)It's the perfect place to be. It's the perfect place.