C型肝炎ウイルスコア蛋白質による小胞体ストレス・酸化ストレス誘導機構

丙型肝炎病毒核心蛋白诱导内质网应激/氧化应激机制

• 批准号: 17028003
• 负责人: 久下 周佐
• 金额: $ 3.97万
• 依托单位: Tohoku University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 2005
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2005 至 2006
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-17028003/
• 关键词: C型肝炎ウイルス; コア蛋白質; 小胞体ストレス; 酸化ストレス; HCV; UPR; 出芽酵母; core; ER stress; oxidative stress; unfolded protein responses; yeast

C型肝炎ウイルス(HCV)は高率で、脂肪肝、肝硬変、肝細胞がん発症を起こす原因ウイルスで、本邦においても200万人のキャリアがおり、現在においても肝細胞がん死亡者の約70%がHCV感染に起因する。HCV感染による病態の進行に密接に寄与する因子の一つとして、ウィルスゲノムにコードされたコア蛋白質が挙げられる。以前の我々の研究から、コア蛋白質を酵母細胞に発現させると小胞体表面に分布し、コアのC末端疎水性領域がプロセスされるなど哺乳動物細胞と同様な存在様式を示すことを明らかにしている。本研究では、HCVコア蛋白質が細胞への影響を出芽酵母細胞を用いて解析し下記の成果を得た。1.(毒性発現機構)コア蛋白質を酵母細胞に誘導高発現による酵母増殖阻害を解除する因子として、4500の遺伝子欠損株ライブラリースクリーニングにより、複数の細胞質分子シャペロン、ミトコンドリア関連因子などの欠損がコア蛋白質による増殖阻害に寄与していることを明らかにした。酵母HSP90(HSC82)はHCVコアの安定化に寄与することを明らかにした。2.(細胞応答)コア蛋白質発現により上昇する遺伝子の3分の一がunfolded protein response (UPR)、ER-associated degradationに関する遺伝子群であることを、トランスクリプトーム解析により明らかにした。実際にコア蛋白質発現によりHAC1 mRNAのスプライシングが誘導されることが判明した。3.(脂質過酸化)HCVコア蛋白質による脂質過酸化の促進コア蛋白質を酵母内で発現させると不飽和脂肪酸の過酸化が促進されることを見出した。以上の本研究により、酵母細胞においてもHCVコアはUPRを誘導し、脂質の過酸化を促進するなど哺乳動物肝細胞で観察されている現象が起こることを示し、この現象に関与する因子を洗い出すことに成功した。今後、これらの因子を介したUPRおよび脂質過酸化のメカニズムの解明することで、ヒト肝細胞におけるHCVの病態発症機構の解明につながると考えられる。

Hepatitis C virus (HCV) infection is the cause of high rates of fatty liver disease, cirrhosis, and hepatocellular development. About 70% of hepatocellular deaths in the country are now caused by HCV infection. HCV infection is a disease of close contact with a number of factors, including protein. Previous studies have shown that proteins are produced in yeast cells, distributed on the surface of small cells, and present in mammalian cells in the C-terminal region. The results of this study are summarized below. 1. (Toxicity detection mechanism) Yeast cell induced high expression of protein, yeast growth inhibition release factor, 4500 gene deficient strain, multiple cytoplasmic molecular selection factor, protein dependent factor, yeast growth inhibition release factor, yeast growth inhibition release factor, 4500 gene deficient strain, multiple cytoplasmic molecular selection factor, yeast growth inhibition release factor, yeast growth inhibition release factor. Yeast HSP90 (HSC82) is responsible for the stabilization of HCV infection. 2. One of the three components of the protein expression pathway is unfolded protein response (UPR) and ER-associated degradation pathway. The expression of HAC1 mRNA was detected by PCR. 3. (Lipid Peracidification)HCV Protein Production in Yeast Promoted by Lipid Peracidification In this study, UPR induction in yeast cells and promotion of lipid hyperacidification were observed in mammalian hepatocytes. In the future, these factors may be involved in UPR and lipid peroxidation, which may be responsible for the pathogenesis of HCV in liver cells.

项目成果

DNA microarray analysis of transcriptional responses of ywast cells to expression of core protein of hepatitis C virus.

DNA 微阵列分析 ywast 细胞对丙型肝炎病毒核心蛋白表达的转录反应。

• 发表时间: 2007
• 期刊: Journal of loxicological Sciences 32(2)(印刷中)
• 作者: Kubota;N.;Naganuma;A.;Kuge;S.
• 通讯作者: S.

特許

专利

• 发表时间: 2008

Hsp90 inhibitors suppress HCV replication in replicon cells and humanized liver mice

• DOI: 10.1016/j.bbrc.2006.12.117
• 发表时间: 2007-02-23
• 期刊: BIOCHEMICAL AND BIOPHYSICAL RESEARCH COMMUNICATIONS
• 影响因子: 3.1
• 作者: Nakagawa, Shin-ichiro;Umehara, Takuya;Kohara, Michinori
• 通讯作者: Kohara, Michinori

Peroxiredoxin-mediated redox regulation of the nuclear localization of Yap1, a transcription factor n budding yeast.

过氧化还原蛋白介导的Yap1（芽殖酵母转录因子）核定位的氧化还原调节。

• 发表时间: 2005
• 期刊: Antioxi.Redox Signal 7・3
• 作者: Okazaki S.Naganuma A.;Kuge S
• 通讯作者: Kuge S