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小胞体における輸送小胞形成とタンパク質選別機構の解析

内质网转运囊泡形成及蛋白质分选机制分析

基本信息

批准号：
17028053
负责人：
佐藤健
金额：
$ 3.84万
依托单位：
The Institute of Physical and Chemical Research
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
2005
资助国家：
日本
起止时间：
2005 至 2006
项目状态：
已结题

项目摘要

新たに合成された分泌タンパク質や各オルガネラで機能するタンパク質は、まず小胞体にターゲットされ、高次構造を形成した後、輸送小胞とよばれる膜小胞によって媒介される小胞輸送によって細胞内の分泌経路を移動していく。輸送小胞が形成される際には、輸送小胞につめこむタンパク質と、ドナーとなるオルガネラにとどまるタンパク質との厳密な選別が行われている。この一連の反応でとくに重要な鍵を握るのが、輸送小胞を被覆するコートタンパク質と低分子量GTPase群である。昨年度までに、輸送されるタンパク質を再構成したプロテオリポソームに、精製したコートタンパク質と低分子量GTPaseを加えて、精製因子のみにより小胞体からの輸送小胞形成反応を再現する完全再構成系を構築して実験を行ってきた。本年度はこの実験系を用いて、小胞体からの輸送小胞形成に関わる因子、Sed4pの解析を行った。Sed4pは出芽酵母中で欠損させると、輸送活性が著しく低下するものの、その機能については全く明らかにされていなかった。完全再構成系を用いて解析を行ったところ、Sed4pは輸送小胞形成過程において必須の因子であるヌクレオチド交換因子と非常に高い相同性をもつものの、ヌクレオチド交換活性は検出できなかった。しかし、Sed4pは小胞体からの輸送小胞形成に関わる低分子量GTPaseとヌクレオチド型依存的に直接相互作用することを見いだした。また、輸送小胞形成過程で機能している低分子量GTPaseのGTPase活性を促進するという現象を明らかにした。

After the formation of higher-order structures, the transport vesicles and the membrane vesicles, the transport vesicles and the secretion pathway of the vesicles move. The transport cell is formed in the opposite direction. The transport cell is formed in the opposite direction. The transport cell is formed in the opposite direction. The key to the chain of molecules is their ability to bind, transport, and coat small molecules. In the past year, the construction of a complete reconstruction system for the formation of small cells and the reproduction of transport cells has been carried out. This year, the application of the system, the factors related to the formation of small cells and the analysis of Sed4p were carried out. Sed4p is a budding yeast that has a low transport activity and functions. Complete reconstitution is a process of transport vesicle formation that requires a factor of high identity, such as a factor of exchange activity. The direct interaction between low molecular weight GTPs and transport vesicles in Sed4p is discussed. The phenomenon of promoting the activity of low molecular weight GTase during the process of cell formation and transport is clearly described.

项目成果

期刊论文数量（5）

专著数量（0）

科研奖励数量（0）

会议论文数量（0）

专利数量（0）

An Arflp GTPase-activating protein, Glo3p, executes its regulatory function through a conserved repeat motif at its C-terminus.

Arflp GTP 酶激活蛋白 Glo3p 通过其 C 末端的保守重复基序执行其调节功能。

DOI：
发表时间：
2006
期刊：
J. Cell Sci. 119
影响因子：
0
作者：
Hirano Y;HendilKB;Yashiroda H;Iemura S;Nagane R;Hioki Y;Natsume T;Tanaka K;Murata S.;Natsuko Yahara et al.
通讯作者：
Natsuko Yahara et al.

Kinetic dissection of COPII subunits assembly and disassembly on SNAREs during Sar1p GTP hydrolysis

Sar1p GTP 水解过程中 SNARE 上 COPII 亚基组装和拆卸的动力学剖析

DOI：
发表时间：
2005
期刊：
Nat.Struct.Mol.Biol. 12
影响因子：
0
作者：
Ken Sato;Akihiko Nakano
通讯作者：
Akihiko Nakano

Structures of carbohydrate recognition domain of Ca2+-independent cargo receptors Emp46p and Emp47p

Ca2非依赖性货物受体Emp46p和Emp47p的碳水化合物识别域的结构

DOI：
发表时间：
期刊：
J.Biol.Chem. (印刷中)
影响因子：
0
作者：
Tadashi Satoh;Ken Sato;Akira Kanoh;Katsuko Yamashita;Yusuke Yamada;Noriyuki Igarashi;Ryuichi Kato;Akihiko Nakano;Soichi Wakatsuki
通讯作者：
Soichi Wakatsuki

Methods Enzymol.

方法酶。