天然有機化合物を基軸とした難治性疾患治療薬シーズのデザインと活性評価

基于天然有机化合物的疑难杂症治疗种子设计及活性评价

• 批准号: 17035005
• 负责人: 生方 信
• 金额: $ 1.98万
• 依托单位: Hokkaido University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 2005
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2005 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-17035005/
• 关键词: 3T3-L1細胞; 3T3-F442細胞; PPARγ; PPARα; ミコフェノール酸; HDAC

(1)前駆脂肪細胞3T3-L1、並びに3T3-F442の培養・分化誘導条件の再検討、Triglyceride E testによる脂肪量の定量、ゲノムDNA量の定量、PPARγの発現確認、GPDH活性測定について検討した。まず、3T3-L1細胞の分化誘導培養の最適条件の検討では、今まで脂肪細胞培養では一般的に用いられていなかったpH緩衝液HEPES(pH7.4)を添加することにより、安定に培養できることを見出した。さらに、細胞培養プレートのコーティングの検討では、poly-L-lysine及びcollagenでダブルコートしたものは剥離が少なく、3T3-L1細胞の安定した分化誘導が可能となった。分化度評価方法の確立では、これまでに主にOil Red O染色による形態的な顕微鏡観察によって評価されていた分化度をTriglyceride量の定量、DNA量の定量、Western blottingによるPPARγの検出などによって数値化することで、客観的な脂肪細胞の分化度評価法を確立することができた。本評価法を用いて、キノコ抽出物の脂肪細胞分化誘導阻害物質の探索を行った。(2)3T3-L1細胞にレポータプラスミドをトランスフェクトした系でのレポーターアッセイ系はレスポンスが悪く、使用できなかった。(3)ミコフェノール酸誘導体のうち、親化合物よりもPPARγに対してアフィニティーの強い化合物M04004並びにPPARαに対してリガンド効果を有する化合物M04013を見出した。(4)ミコフェノール酸を親化合物とするヒストンデアセチラーゼ阻害剤への分子変換を検討し、3種の阻害剤MPHA,7-OAcMPHA,7-O-Lauroyl MPHAの創製に成功した。中でも、7-O-Lauroyl MPHAは極めて有望と考えられる。

The main results were as follows: (1) pre-adipocytic 3T3-L1, 3T3-F442 differentiation induction, Triglyceride E test fat quantity, DNA quantity, PPAR γ cell confirmation and GPDH activity assay. The differentiation of 3T3-L1 cells leads to the best condition of cell culture, and the general method of fat cell culture is to add the liquid HEPES (pH7.4) to the liquid HEPES (pH7.4), which is called diazepam. Cell culture, cell culture, differentiation, differentiation and differentiation were detected. The degree of differentiation was determined by the method of Oil Red O staining. The quantity of Triglyceride, the quantity of DNA, the quantity of PPAR, the degree of differentiation, the quantity of DNA, the degree of differentiation, the quantity of DNA, the degree of differentiation, the degree In this method, fat cell differentiation is used to guide the exploration of harmful substances. (2) 3T3-L1

项目成果

"Product Subclass 6 : Serenoimidates (Imidoselenoates) and Derivatives" Synthesis of Synthesis Houben-weyl Method of Molecular Transformation Category 3

“产品子类 6：亚胺酰亚胺酯（Imidoselenoates）及其衍生物” 分子转化类别 3 的合成 Houben-weyl 方法的合成

• 发表时间: 2005
• 作者: N.Nakajima;N.Nakajima
• 通讯作者: N.Nakajima

Inhibition of Preadipocyte Differentiation by Germacranolides from Calea urticifolia in 3T3-L1 Cells

• DOI: 10.1271/bbb.69.2470
• 发表时间: 2005-01
• 期刊: Bioscience, Biotechnology, and Biochemistry
• 作者: N. Matsuura;M. Yamada;Hiroto Suzuki;Naoko Hasegawa;Chihiro Kurosaka;M. Ubukata;Toŝhiyuki Tanaka;M. Iinuma

"Product Subclass 7 : Serenoimidates (Imidoselenoates) and Derivatives" Synthesis of Synthesis Houben-weyl Method of Molecular Transformations Category 3

“产品子类 7：亚胺酰亚胺酯（Imidoselenoates）及其衍生物” 分子转化类别 3 的 Houben-weyl 合成方法的合成

• 发表时间: 2005
• 作者: N.Nakajima;N.Nakajima;N.Nakajima
• 通讯作者: N.Nakajima

Chemical synthesis of β-O-4 type artificial lignin

• DOI: 10.1039/b518005h
• 发表时间: 2006-01-01
• 期刊: ORGANIC & BIOMOLECULAR CHEMISTRY
• 影响因子: 3.2
• 作者: Kishimoto, T;Uraki, Y;Ubukata, M
• 通讯作者: Ubukata, M

Product Subclass 4 : Imidates Synthesis of Synthesis, Houben-weyl Method of Molecular Transformations Category 3

产品子类 4：亚胺酸酯的合成，Houben-weyl 分子转化方法类别 3

• 发表时间: 2005
• 作者: N.Matsuura;Y.Feng;S.Mitsuhashi;D.I.Batovska;稲永風人他2名;K.Shoji;高須清誠他2名;吉田昌裕他3名;T.Kishimoto;吉田昌裕他2名;T.Kishimoto;高須清誠他3名;N.Nakajima
• 通讯作者: N.Nakajima