シンデカンのマトリックスメタロプロテアーゼー2活性化制御機能の解析

多聚糖对基质金属蛋白酶2激活的调节功能分析

• 批准号: 17046028
• 负责人: 小栗 佳代子
• 金额: $ 2.3万
• 依托单位: National Hospital Organization Nagoya Medical Center
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 2005
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2005 至 2006
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-17046028/
• 关键词: 癌; 糖鎖; 浸潤、転移; グリピカン; マトリックスメタロプロテアーゼ; 硫酸化糖鎖; プロテオグリカン; ヘパラン硫酸; シンデカン

昨年度の研究で、細胞膜貫通型ヘパラン硫酸プロテオグリカン(HSPG)であるシンデカン-2が、腫瘍細胞(ルイス肺癌由来細胞株)表層におけるマトリックスメタロプロテアーゼ-2(MMP-2)の活性化を阻害し、結果的に転移に抑制的に作用することを明らかにした。本年度は、細胞の動態を左右するこのような細胞表層HSPGによるMMP制御が他にも存在するかを知るため異なる細胞(Colon26大腸癌由来細胞株)系で検討した。研究実施計画(1)に関して(1)転移能の異なる細胞株間で、MMP-2発現は同レベルであったが、MMP-9発現は、高浸潤かつ高転移性細胞にのみ認められた。(2)MMP-9阻害剤を用いたin vitro解析により、細胞の移動、基底膜浸潤にMMP-9が必須であることを明らかにするとともに、MMP-9がヘパリン結合能を有することを明らかにした。(3)フローサイトメトリー解析により細胞表層にMMP-9が局在することが明らかとなり、HS除去あるいはヘパリン添加によりそれらが遊離することから、細胞表層HSPGがMMP-9に対する受容体活性を有していることが示された。免疫沈降法により、GPIアンカー型HSPGであるグリピカンがMMP-9に対する受容体活性を有することを明らかにした。研究実施計画(2)に関して(1)細胞免疫染色により、MMP-9が腫瘍細胞の運動先端のfilopodiaに濃縮していること、それらは常に細胞表層HSと共局在していることを明らかにした。(2)HS除去あるいはヘパリン添加により、MMP-9が表層から消失することを明らかにした。得られた結果は、GPIアンカー型HSPGであるグリピカンがMMP-9受容体として、細胞表層の特定部位に酵素を濃縮することを示唆しており、それは腫瘍細胞の浸潤、転移の確率を上げる要因となると考えられた。

Yesterday's annual の research で, cell membrane penetration type ヘ パ ラ ン sulfate プ ロ テ オ グ リ カ ン (HSPG) で あ る シ ン デ カ ン - 2 が, swollen sores cells (ル イ ス origin lung cancer cell lines) surface に お け る マ ト リ ッ ク ス メ タ ロ プ ロ テ ア ー ゼ - 2 (MMP - 2) の activeness を resistance against し, results に planning move に inhibitory effect of the に す る こ と を Ming Youdaoplaceholder0 に に た. This year about dynamic を は, cell の す る こ の よ う な cell surface HSPG に よ る MMPS suppression が he に も exist す る か を know る た め different な る cells (Colon26 origin colorectal cancer cell lines) で beg し 検 た. Research be applied program (1) に masato し て (1) planning can move の different な る で between cell lines, MMP - 2 発 now は レ ベ ル で あ っ た が, MMP - 9 発 は now, high infiltration か つ high planning move sex cells に の み recognize め ら れ た. (2) the MMP - 9 resistance against tonic を い た in vitro analytical に よ り の mobile, basement membrane, cell infiltrate に MMP - 9 が must で あ る こ と を Ming ら か に す る と と も に, MMP - 9 が ヘ パ リ ン binding energy を have す る こ と を Ming ら か に し た. (3) フ ロ ー サ イ ト メ ト リ ー parsing に よ り cell surface に MMP - 9 が bureau in す る こ と が Ming ら か と な り, HS to remove あ る い は ヘ パ リ ン add に よ り そ れ ら が free す る こ と か ら, cell surface HSPG が MMP - 9 に す seaborne る with let body active を have し て い る こ と が shown さ れ た. Immune sink method に よ り, GPI ア ン カ ー type HSPG で あ る グ リ ピ カ ン が MMP - 9 に す seaborne る with let body active を have す る こ と を Ming ら か に し た. Research be applied plan (2) に masato し て (1) cellular immune dyeing に よ り の movement, MMP - 9 が swollen sores cells apex の filopodia に enrichment し て い る こ と, そ れ ら は often に cell surface HS と total bureau in し て い る こ と を Ming ら か に し た. (2) the HS to remove あ る い は ヘ パ リ ン add に よ り, MMP - 9 が surface か ら disappear す る こ と を Ming ら か に し た. Have ら れ た results は, GPI ア ン カ ー type HSPG で あ る グ リ ピ カ ン が MMP - 9 by let body と し て を に enzyme concentration, cell surface の particular part す る こ と を in stopping し て お り, そ れ の は swollen sores cell infiltrate, planning の probabilistic を on げ る by と な る と exam え ら れ た.

项目成果

Evaluation of chemosensitivity of micrometastases with green fluorescent protein gene-tagged tumor models in mice.

• DOI: 10.1385/1-59259-889-7:351
• 发表时间: 2005
• 期刊: Methods in molecular medicine
• 作者: H. Nakanishi;S. Ito;Y. Mochizuki;M. Tatematsu

Biological Significance of Isolated Tumor Cells and Micrometastasis in Lymph Nodes Evaluated Using a Green Fluorescent Protein–Tagged Human Gastric Cancer Cell Line

• DOI: 10.1158/1078-0432.ccr-05-1963
• 发表时间: 2006-01
• 期刊: Clinical Cancer Research
• 影响因子: 11.5
• 作者: H. Yokoyama;H. Nakanishi;Y. Kodera;Y. Ikehara;N. Ohashi;Yuichi Ito;M. Koike;M. Fujiwara;M. Tatematsu;A. Nakao

Establishment and characterization of a human colonic mucinous carcinoma cell line with predominant goblet‐cell differentiation from liver metastasis

• DOI: 10.1111/j.1440-1827.2005.01868.x
• 发表时间: 2005-09
• 期刊: Pathology International
• 影响因子: 2.2
• 作者: T. Yamachika;H. Nakanishi;K. Yasui;Y. Ikehara;T. Niwa;H. Wanibuchi;M. Tatematsu;S. Fukushima

Apical Golgi localization of N,N′-diacetyllactosediamine synthase, β4GalNAc-T3, is responsible for LacdiNAc expression on gastric mucosa

• DOI: 10.1093/glycob/cwl005
• 发表时间: 2006-09-01
• 期刊: GLYCOBIOLOGY
• 影响因子: 4.3
• 作者: Ikehara, Yuzuru;Sato, Takashi;Narimatsu, Hisashi
• 通讯作者: Narimatsu, Hisashi

Establishment and characterization of three novel human gastric cancer cell lines with differentiated intestinal phenotype derived from liver metastasis

• DOI: 10.1007/s10585-005-6526-z
• 发表时间: 2005-01-01
• 期刊: CLINICAL & EXPERIMENTAL METASTASIS
• 影响因子: 4
• 作者: Nakanishi, H;Yasui, K;Tatematsu, M
• 通讯作者: Tatematsu, M