骨髄系およびリンパ球系に由見する樹状細胞群の純化とその細胞生物学的解析

骨髓和淋巴谱系来源的树突状细胞群的纯化及其细胞生物学分析

• 批准号: 17047029
• 负责人: 赤司 浩一
• 金额: $ 6.14万
• 依托单位: Kyushu University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 2005
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2005 至 2006
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-17047029/
• 关键词: 樹状細胞; リンパ球系共通前駆細胞; 生体内ラベリング; 骨髄系前駆細胞

リンパ球系由来の前駆細胞を識別可能な色素でラベルするために,RAG1-Creノックインマウスを用いた.RAG1-CreマウスにEYFP-ROSA26マウスを掛け合わせた.このシステムを用いてEYFPの黄色蛍光をマーカーとしてリンパ組織中の樹状細胞を観察したところ,脾臓,胸腺リンパ節の樹状細胞はいずれも約5-10%のみEYFP陽性であり,生体内でリンパ球系を起源とする樹状細胞の割合は,骨髄系起源の約10分の1と小さいことが明らかになった。そこで,さらに,これらのYFP陽性,陰性の樹状細胞を各臓器より純化し,網羅的遺伝子発現解析を行った。脾臓,胸腺における樹状細胞群を純化し,Illumina社のマウス用cDNAマイクロアレイチップを用いて発現解析を行った。その結果,1)EYFP陽性,陰性の樹状細胞は,脾臓,胸腺のそれぞれの臓器において,ほぼ同じ遺伝子発現パターンを取っており,同一の細胞集団として見なすことが可能であると考えられた。2)一方で,脾臓と胸腺の臓器別樹状細胞間での比較では,EYFPの陽性,陰性に関わらず,大きな違いがあることが明らかになった。これら臓器特異的に発現する樹状細胞関連遺伝子についてはその機能を現在解析中である。以上より,樹状細胞の殆どは骨髄系前駆細胞を起源としており,樹状細胞の機能の差異は,樹状細胞のリンパ球系・骨髄系の起源によるよりも,樹状細胞が存在する微小環境に影響を受けることが示唆された。RAG1-CRE陽性の樹状細胞は胸腺においてさえ10%以下に留まったことからリンパ球系分化が樹状細胞集団の恒常性維持に果たしている役割は小さいと考えられた.また.リンパ球系・骨髄系由来に関わらず,ゲノムワイドのプロファイリングでほぼ同じ遺伝子発現パターンを示したことから,樹状細胞は,リンパ球系・骨髄系にコミットした後も,同じプログラムを用いて分化していると考えられた.すなわち,樹状細胞群は,リンパ球系・骨髄系に分類するべきではなく,むしろそれらから独立したユニークな分化プログラムを用いていることが示唆された.

为了标记带有可见染料的淋巴细胞的祖细胞，使用了RAG1-CRE敲打小鼠。将RAG1-CRE小鼠乘以EYFP-ROSA26小鼠。 Using this system, dendritic cells in lymphoid tissue were observed using the yellow fluorescent light of EYFP as a marker, and it was revealed that only about 5-10% of dendritic cells in the spleen and thymic lymph nodes were EYFP positive, and that the proportion of dendritic cells originating from the lymphocyte system in vivo was small, about one-tenth of the myeloid system.因此，从每个器官中纯化了这些YFP阳性和阴性树突状细胞，并进行了全面的基因表达分析。纯化脾脏和胸腺中的树突状细胞，并使用Illumina的小鼠cDNA微阵列芯片进行表达分析。结果表明1）EYFP阳性和阴性树突状细胞在脾脏和胸腺的每个器官中具有几乎相同的基因表达模式，并且可以视为相同的细胞群。 2）另一方面，脾脏和胸腺的器官特异性树突细胞之间的比较显示出很大的差异，而不管EYFP是正面还是阴性。这些特异性表达的树突状细胞相关基因的功能目前正在分析中。从以上，建议大多数树突状细胞起源于髓样祖细胞，并且树突状细胞功能的差异更受树突状细胞存在的微环境的影响，而不是由树突状细胞的淋巴细胞和髓样系统的起源。由于即使在胸腺中，RAG1-CRE阳性的树突状细胞也保持在10％以下，因此淋巴细胞分化在维持树突状细胞群体稳态中的作用被认为很小。此外，无论淋巴细胞和髓样的起源如何，全基因组分析显示出几乎相同的基因表达模式，即使在淋巴细胞和髓样的淋巴细胞和髓样后，树突状细胞也被认为可以使用相同的程序进行区分。换句话说，有人建议不要将树突细胞分类为淋巴细胞和髓样，而应使用独特的分化程序，而不是独立于它们的淋巴细胞和髓样细胞。

项目成果

The order of expression of transcription factors directs hierarchical specification of hematopoietic lineages

• DOI: 10.1101/gad.1493506
• 发表时间: 2006-11-01
• 期刊: GENES & DEVELOPMENT
• 影响因子: 10.5
• 作者: Iwasaki, Hiromi;Mizuno, Shin-ichi;Akashi, Koichi
• 通讯作者: Akashi, Koichi

Thymus exclusivity : all the right conditions for T cells

胸腺专有性：T 细胞的所有合适条件

• 发表时间: 2006
• 期刊: Immunity 25
• 作者: Iwasaki H;et al.
• 通讯作者: et al.

Identification of eosiniphil lineage-committed progenitors in the murine bone marrow

小鼠骨髓中嗜酸性粒细胞谱系定向祖细胞的鉴定

• 发表时间: 2005
• 期刊: Journal of Experimental Medicine 201
• 作者: Iwasaki H;et al.;Wang J;Arinobu Y;Opferman JT;Iwasaki H
• 通讯作者: Iwasaki H

Lymphoid cell growth and transformation are suppressed by a key regulatory element of the gene encoding PU.1

• DOI: 10.1038/ng1679
• 发表时间: 2006-01-01
• 期刊: NATURE GENETICS
• 影响因子: 30.8
• 作者: Rosenbauer, F;Owens, BM;Tenen, DG
• 通讯作者: Tenen, DG

Distinctive and indispensable roles of PU.1 in maintenance of hematopoietic stem cells and their differentiation

• DOI: 10.1182/blood-2005-03-0860
• 发表时间: 2005-09-01
• 期刊: BLOOD
• 影响因子: 20.3
• 作者: Iwasaki, H;Somoza, C;Akashi, K
• 通讯作者: Akashi, K