幹細胞制御に関わるマイクロRNAのプロスペクティブな分離・同定法の開発

干细胞调控相关microRNA前瞻性分离和鉴定方法的开发

• 批准号: 19659249
• 负责人: 赤司 浩一
• 金额: $ 2.11万
• 依托单位: Kyushu University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Exploratory Research
• 财政年份: 2007
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2007 至 2008
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-19659249/
• 关键词: microRNA; 転写因子; 造血幹細胞

改良型microRNAセンサーベクターには,EF1αプロモーターを改変し両方向性に働くプロモーターが構築され,その上流および下流にTurboGFP, EYFP(Yellow fluorescence protein)蛍光遺伝子が挿入されている。このGFPの下流にC/EBPalpha, Notch, GATA-1, GATA-2の3'UTRをクローニングし、造血幹細胞に強制発言した。この結果,転写因子Notch1の3'UTRを持つベクター導入細胞ではGFP蛋白の発現がほぼ完全に抑制されたが、他の転写因子の3'-UTRではまったく変化がなかった。以上から, Notch1は造血幹細胞レベルでmicroRNAもしくはRNAinhi bitory proteinによる3'UTRを介した翻訳制御をうけていることが示唆された。このNotch1の翻訳制御機構を明らかにするため、ベクター中のNotch1 3'UTRに変異を導入し、その責任部位を同定したところ、上流120bp内のATTTATTTAsequenceにその活性が存在しており、RNAbinding proteinによるNotch1の翻訳抑制が幹細胞分画で働いていることが明らかとなった。現在、このRNAbillding proteinを同定するために、Biotinでラベルしたresponsible sequenceを含むNotch1-3'UTRを用いたpull downを試みている。以上のように、この新規ベクターの開発は、造血幹細胞のT細胞へ分化が翻訳制御により抑えられていることを示唆する、極めて重要な発見に繋がった。

Altered microRNA セ ン サ ー ベ ク タ ー に は, EF1 alpha プ ロ モ ー タ ー を change - し struck directional に 働 く プ ロ モ ー タ ー が build さ れ, そ の upper お よ び obscene に TurboGFP, EYFP(Yellow fluorescence protein)蛍 optical sequelae 伝 が insert されて る る る. こ の GFP の obscene に C/EBPalpha, Notch, GATA - 2 の GATA - 1, 3 'UTR を ク ロ ー ニ ン グ し, hematopoietic stem cell に forced 発 said し た. こ の results, planning to write factor Notch1 の 3 'UTR を hold つ ベ ク タ ー import cell で は GFP protein の 発 now が ほ ぼ に completely inhibit さ れ た が, he の planning write factor の 3' - UTR で は ま っ た く variations change が な か っ た. Above か ら, Notch1 は hematopoietic stem cells レ ベ ル で mirnas も し く は RNAinhi bitory protein に よ る 3 'UTR を interface し た turn 訳 suppression を う け て い る こ と が in stopping さ れ た. こ の Notch1 の turn 訳 system royal institution を Ming ら か に す る た め, ベ ク タ ー の in Notch1 3 'UTR に - different を import し, そ の を responsibility parts with fixed し た と こ ろ within 120 bp, high-class の ATTTATTTAsequence に そ の active が exist し て お り, RNAbinding Protein に よ る Notch1 の turn 訳 inhibit が stem cells points draw で 働 い て い る こ と が Ming ら か と な っ た. Now, こ の RNAbillding protein を with fixed す る た め に, Biotin で ラ ベ ル し た responsible sequence contains を む Notch1-3 'UTR を with い た pull down を try み て い る. Above の よ う に, こ の new rules ベ ク タ ー の open 発 は, differentiation of hematopoietic stem cells の T へ が turn 訳 suppression に よ り え suppression ら れ て い る こ と を in stopping す る, extremely め て important な 発 see に 繋 が っ た.

项目成果

Successful treatment of parainfluenza virus 3 pneumonia with oral ribavirin and methylprednisolone in a bone marrow transplant recipient

• DOI: 10.1007/s12185-008-0148-6
• 发表时间: 2008-10-01
• 期刊: INTERNATIONAL JOURNAL OF HEMATOLOGY
• 影响因子: 2.1
• 作者: Shima, Takahiro;Yoshimoto, Goichi;Nagafuji, Koji
• 通讯作者: Nagafuji, Koji

Ott1(Rbm15) has pleiotropic roles in hematopoietic development

• DOI: 10.1073/pnas.0609041104
• 发表时间: 2007-04-03
• 期刊: PROCEEDINGS OF THE NATIONAL ACADEMY OF SCIENCES OF THE UNITED STATES OF AMERICA
• 影响因子: 11.1
• 作者: Raffel, Glen D.;Mercher, Thomas;Gilliland, D. Gary
• 通讯作者: Gilliland, D. Gary

Additional acquisition of t(l ; 21)(p32 ; q22)in a patient relapsing with acute myelogenous leukemia with NUP98-HOXA9.

使用 NUP98-HOXA9 在急性髓性白血病复发患者中额外获取 t(l ; 21)(p32 ; q22)。

• 发表时间: 2008
• 期刊: Int J Hematol. 88
• 作者: Aoki T;Akashi K;et al
• 通讯作者: et al

Lymphoid lineage commitment from hematopoietic stem cells

造血干细胞的淋巴谱系定型

• 发表时间: 2008
• 作者: Ishii H;Mimori K;Ishikawa K;Okumura H;Pichiorri F;Druck T;Inoue H;Vecchione A;Saito T;Mori M;Huebner K.;赤司浩一
• 通讯作者: 赤司浩一

Improved outcome of allogeneic bone marrow transplantation due to breastfeeding-induced tolerance to maternal antigens

• DOI: 10.1182/blood-2008-05-155283
• 发表时间: 2009-02-19
• 期刊: BLOOD
• 影响因子: 20.3
• 作者: Aoyama, Kazutoshi;Koyama, Motoko;Teshima, Takanori
• 通讯作者: Teshima, Takanori