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細胞運動の推進力を基質に伝達するナノシステムの動態と構造解析

将细胞运动驱动力传递至基底的纳米系统的动力学和结构分析

基本信息

批准号：
17049022
负责人：
中川裕之
金额：
$ 3.58万
依托单位：
Fukuoka University (2006)Kyushu Institute of Technology (2005)
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
2005
资助国家：
日本
起止时间：
2005 至 2006
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-17049022/
关键词：
actin fascin Iasp-1 lasp-2 retrograde flow filopodia lasp-1

项目摘要

本研究は、細胞質中のアクチン系細胞骨格が発生した力を細胞外へ伝達する機構と、その構造を明らかにすることを目的としている。一般的には、接着斑と呼ばれる構造がその機能を担っていると考えられている。しかし、神経細胞から伸長した神経突起には接着斑構造が存在しないにもかかわらず、接着基質上を活発に移動する。したがって、接着斑以外の細胞一基質間接着構造が存在すると考えられる。そこで、そのような細胞一基質間接着機構を解明するために、接着斑に集積するlaspファミリー分子と蛍光タンパク質の融合タンパク質を神経芽細胞腫株NG108-15に発現させ、その局在を解析した。NG108-15細胞において、laspファミリー分子は主にフィロポーディアに集積し、接着斑様の斑点状分布は観察されなかった。また、反射干渉法によってフィロポーディアに沿った接着領域が観察されたが、laspファミリー分子はその領域へ顕著な集積を示さなかった。Laspファミリー分子はアクチン繊維結合活性を持つことから、FRAP法を用いてアクチン分子と動態を比較した。アクチン分子ではフィロポーディア先端から細胞内部方向への逆行性輸送が観察されたが、laspファミリー分子は拡散的な動態を示した。この結果は、アクチン繊維上でアクチン繊維結合タンパク質の速い交換が起きていることを示している。神経細胞一基質間接着は接着斑とは構成タンパク質分子が異なっていることから、微細構造も異なっている可能性がある。細胞-基質問の接着領域は2次元的な広がりを持った構造で、超薄切片法では領域全体を観察することは困難である。そこで、NG108-15細胞を薄膜に接着させ、化学固定後に薄膜を溶解することで細胞の基質接着面を直接観察する方法を開発した。本方法を用いた観察によって、接着斑を含めた細胞-基質間接着機構が構造的に明らかになると期待される。

This study aims to clarify the mechanism and structure of the extracellular matrix for the development of cytosolic bone. The general structure of the structure has the function of "supporting" and "supporting". In addition, the growth of neurons and the movement of connective tissue in the brain A study of the existence of cell-matrix junction structures other than junction spots The cell-matrix interface mechanism was analyzed. The molecular and molecular structures of the cell-matrix interface were analyzed. The fusion mechanism of the cell-matrix interface was analyzed in NG108 -15. NG108-15 cells were isolated from the host cells and the host cells were isolated from the host cells. The method of reflection is used to detect and collect molecules. Lasp is a method for comparing molecular dynamics with molecular dynamics. The reverse transport of the molecules in the cell is observed and the dynamics of the molecules in the cell are shown. The result of this is that there is no change in the quality of the product. There is a possibility that there may be differences in the molecular structure and microstructure between the neurons and the matrix. The cell-matrix interface is a two-dimensional structure, and ultra-thin sections are difficult to detect. A method for direct observation of the adhesion of NG108 -15 cells to the membrane after chemical fixation was developed. This method is used to investigate the structure of cell-matrix adhesion mechanism.