細胞の増殖分化に関わる遺伝子発現と核内構造の時空間的解析

细胞增殖和分化相关基因表达和核结构的时空分析

• 批准号: 17050018
• 负责人: 斉藤 典子
• 金额: $ 4.61万
• 依托单位: Kumamoto University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 2005
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2005 至 2006
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-17050018/
• 关键词: 細胞核内構造体; RanBP2; SUMO; 神経分化; ES細胞; Oct3; 4; ヒストン修飾; エピジェネティクス; 細胞核構造体; クロマチン間顆粒群; PMLボディー; 核膜孔

1.細胞の増殖に関わる遺伝子発現制御におけるPMLボディーの役割増殖刺激を受けた細胞内で直ちに転写が開始され、その後抑制されるc-fos遺伝子座の転写制御に、核内構造体のPMLボディーがどのように関わるかを調べるために、PMLに対する抗体を作成し、またPMLのノックダウン、c-fos遺伝子の転写を計測するリアルタイムPCRの手法を確立した。2.ES細胞の分化過程における核内構造と遺伝子発現制御機構マウスES細胞が高度に均一に神経細胞へ分化する系を確立するために、効率的に細胞分化を促進するSDIA(stromal cell-derived inducing activity)法とノックイン細胞を組み合わせ、顕微鏡下での1細胞解析を可能にした。これにより、神経分化過程で細胞核及びクロマチンのグローバルな構造がダイナミックに変動することを見いだした。また、遺伝子密度が高いMHC遺伝子クラスター内に存在し、分化とともに独自に抑制されるOct 3/4遺伝子座が、分化過程で核内構造体との空間的相互作用を変化させること、ヒストン修飾やクロマチン結合タンパク質との相互作用がOct3/4遺伝子座の制御領域に限局的にかつ段階的に変動することを詳細に解析し、細胞の未分化性の維持や細胞系譜の決定に核内構造体によるエピジェネティックな制御が役割を果たしている可能性を見いだした。3.タンパク質SUMO化修飾の細胞内制御の可視化セミインタクト細胞を用いて細胞内のSUMO化の場を可視化するin situ SUMOylation assay法を確立した。これにより、既にSUMO分子が蓄積していることが知られている核膜孔とPMLボディに加え、核小体、セントロソーム、ミッドボディに活発なSUMO化活性が存在することを見いだし、SUMO修飾が細胞核や体細胞分裂の制御に関わる事を示唆した。in situ SUMOylation assay法はSUMO E3タンパク質の細胞内分布を検出できる手法であると考えられる。

1. PML gene expression control in cell proliferation, PML gene expression control in nuclear construct, PML gene expression control in cell proliferation stimulation, PML gene expression control in cell proliferation, 2. During the differentiation process of ES cells, the nuclear structure and gene production control mechanism allow ES cells to be highly uniform and differentiate into neurons, and promote cell differentiation efficiently. The SDIA(stromal cell-derived inducing activity) method is used to combine cells and make it possible to analyze one cell under a microscope. The process of differentiation of the nucleus and the structure of the nucleus are described in detail. High MHC gene density, high MHC gene density, high MHC gene The undifferentiation of cells and the determination of cell lineage are important factors in the development of nuclear structures. 3. Establishment of the in situ SUMOylation assay for visualization of SUMOylation in cells This is because SUMO molecules accumulate in nuclear pores, PML molecules, nucleosome molecules, and PML molecules, and SUMO modification is related to the regulation of cell division. In situ SUMOylation assay is used to detect the intracellular distribution of SUMO E3.

项目成果

In situ SUMOylation analysis reveals a modulatory role of RanBP2 in the nuclear rim and PML bodies

• DOI: 10.1016/j.yexcr.2006.01.013
• 发表时间: 2006-05-01
• 期刊: EXPERIMENTAL CELL RESEARCH
• 影响因子: 3.7
• 作者: Saitoh, N;Uchimura, Y;Nakao, M
• 通讯作者: Nakao, M

PMLとNPMの機能制御と白血病の分子病態

PML和NPM的功能调控与白血病的分子病理学

• 发表时间: 2005
• 期刊: 血液・腫瘍科 51
• 作者: Matsuo Y;Sakane I;Takizawa Y;Takahashi M;Kurumizaka H;上田啓次;三代剛
• 通讯作者: 三代剛

Nuclear and chromatin reorganization in the MHC-Oct3/4 locus at developmental phases of embryonic stem cell differentiation

• DOI: 10.1016/j.ydbio.2006.04.450
• 发表时间: 2006-10-15
• 期刊: DEVELOPMENTAL BIOLOGY
• 影响因子: 2.7
• 作者: Aoto, Takahiro;Saitoh, Noriko;Nakao, Mitsuyoshi
• 通讯作者: Nakao, Mitsuyoshi

細胞核構造とその機能

细胞核结构及其功能

• 发表时间: 2006
• 期刊: 実験医学増刊号 24
• 作者: Aoto;T;斉藤 典子;斉藤 典子
• 通讯作者: 斉藤 典子

クロマチン間領域に存在する核内構造体

染色质间区域存在核结构

• 发表时间: 2006
• 期刊: 蛋白質核酸酵素増刊号 51
• 作者: Aoto;T;斉藤 典子;斉藤 典子;斉藤 典子
• 通讯作者: 斉藤 典子