メダカ卵形成開始機構の解析から性分化の分子カスケードへ迫る

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本研究では性分化の帰結の一つ、生殖細胞の雌雄分化をメダカで研究する。形態でわかる最初の性差である卵形成開始に注目し、以下の実験を行った。a.生殖細胞が卵形成に入ると同時にそれらで発現を開始する遺伝子figαの転写制御機構をしらべるため、硬骨魚類figαの詳細なゲノム比較を行った。これらよりさまざまな魚種のfigα断片を持ったGFP遺伝子を構築し、transgenic魚作成によりcis-elementの解析を進めた。特にゲノムサイズの小さいフグよりおおまかに内在性figα発現を再現するコンストラクトが作成できた。またメダカレポーターアッセイに適するminimal promoterを探したところ、tk200プロモーターが最も適していた。b.figαの下流で働くと考えられる、やはり卵母細胞特異的遺伝子である42Sp50のプロモーターにより卵母細胞が光るGFPメダカを確立できた。この系統は性決定遺伝子にリンクする遺伝マーカーももち、genotype, phenotypeの両方で性を判別できる。この系統でENU処理によるmutagenesisを開始した。8月までに100程度のF2家系ができ、F3スクリーン中を開始した。現在までに20家系スクリーンしたが、明確な性転換変異体は得られていない。c.野生と市販メダカよりいくつかの性転換個体を発見し、それらの遺伝解析を行った。まだ原因遺伝子にはたどりついていない。