性分化異常症における性の決定・分化の分子細胞遺伝機構の解明

阐明性分化障碍中性别决定和分化的分子和细胞遗传学机制

• 批准号: 17052014
• 负责人: 星 信彦
• 金额: $ 4.8万
• 依托单位: Kobe University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 2005
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2005 至 2006
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-17052014/
• 关键词: 性分化異常症; DNAメチル化; 染色体モザイク; ヒストンアセチル化; SRY; X染色体モノソミー; ChIP assay; メチル化異常; 性分化; 性分化異常; DAZLA; StAR

遺伝子,環境因子に次いで生物の多様性を位置づける要因としてエピジェネティクスが近年注目されている.ゲノムDNA様々な遣伝子座が,細胞の種類により特異的にメチル化されていることに関連し,これまで我々が明らかにしてきたヒト性分化異常症における精巣化遺伝子SRYならびにX染色体のモザイク発症機構と性分化異常との関係(性染色体遺伝子量補償機構の破綻)の解明を目的とした.北海道大学医学部産婦人科および小児科でfollow-upししている臨床および細胞遣伝学的に性分化異常症が疑われた20症例を対象に,本研究に対するインフォームドコンセントを得た上で,詳細な細胞遺伝学的解析を行い,さらに性分化関連遺伝子および座位の有無の検討を行った.遺伝子の欠失を認めない症例についてはゲノムDNAをPCR法により増幅し,エクソン,イントロン各部位の塩基配列を直接決定し,点突然変異などの異常の有無の有無を解析した.また,臨床的多型性を適伝子レベルでの異常と対応させ検討した.家系解析として,PCR-RFLP, PCR-SSCPおよびPCR-CFLP法を取り入れることにより,迅速かつ大量に遺伝子試料の多型点突然変異の解析を行った.また,Y染色体の構造異常の認められた症例では,患者より性腺および皮膚を採取,培養後,bisulfite sequencing法によるSRY, AR, SLARおよびCox-2のDNAメチル化解析ならびにクロマチン構造とヒストンアセチル化についてSRY座位を含むY染色体短腕末端から長腕末端までのChromatin Immunoprecipitation (ChIP) Assayを行った.その結果,性分化異常症患者の「性の決定・分化機構」の破綻には,SRY遺伝子のCpG islandにおけるDNAメチル化抑制,およびSRYプロモーター＆HMG BOXのヒストンアセチル化によりSRY mRNAの異常発現が関与していることを見いだした.これらの性分化異常症患者ではSRYの細識限定発現部位・時期に異常がみられ,また,高率に45.X核型とのモザイクが関連することから,当初,「モザイクなどの細胞数の単純な減少に伴うSRYの遣伝子量の減少」が関与していると想定していたが,実は,発生初期より『SRY遺伝子の高濃度持続発現』が起こり,その結果,未分化性腺から精巣への発生・分化スイッチに障害が起こり,基本型である雌型に分化(卵巣化)したと考えられた.このことは,性分化異常症患者の染色体異常は,性分化異常の原因ではなく,患者は元々エピジェネティクス(クロマチン)異常等の素因があり,その結果,染色体異常が引き起こされたとも想定され,性分化異常症発症機構に関し,新たな研究の展開が期待される.

Heritage 伝 son, environmental factors に い で biological の multiple others を position づ け る by と し て エ ピ ジ ェ ネ テ ィ ク ス が attention in recent years さ れ て い る. ゲ ノ ム DNA others 々 な sent 伝 stroma が, types of cells の に よ り specific に メ チ ル change さ れ て い る こ と に masato し, こ れ ま で I 々 が Ming ら か に し て き た ヒ ト sexual differentiation abnormal disease に お け る essence 巣 the heritage 伝 son SRY な ら び に X chromosome の モ ザ イ ク 発 disease agency と abnormal sexual differentiation と の masato system (sex chromosome heritage 伝 child quantity compensation institution の flaw) の interpret を purpose と し た. Hokkaido university medical maternal hominids お よ び small where families で follow - up し し て い る clinical お よ び cells send 伝 learn に sexual differentiation abnormal disease が suspected わ れ た 20 cases を like に polices, this study に す seaborne る イ ン フ ォ ー ム ド コ ン セ ン ト を で on た, detailed な cell line but 伝 learn analytical を い, さ ら に sexual differentiation masato even survived 伝 お よ び Whether there is a 検 to ask for を to act った. Heritage 伝 の owe son lost を recognize め な い cases に つ い て は ゲ ノ ム を DNA PCR method に よ り raised し, エ ク ソ ン, イ ン ト ロ ン parts の match column を directly decide し salt base, point - vision suddenly な ど の abnormal の presence of analytical し の presence of を た. ま た, clinical polytypism を optimum 伝 son レ ベ ル で の abnormal と 応 seaborne さ せ beg し 検 た. Family analysis と て,PCR-RFLP Method of PCR - SSCP お よ び PCR - CFLP said を take り れ る こ と に よ り, quickly か つ traces of a large number of に 伝 son try material の type more line suddenly - different analytical を の っ た. ま た, Y chromosome abnormal の の structure to recognize め ら れ た cases で は, patients with よ り gonad お よ び を take skin, after training, bisulfite sequencing method によるSRY, AR SLAR お よ び cox-2 の DNA メ チ ル resolve analysis な ら び に ク ロ マ チ ン tectonic と ヒ ス ト ン ア セ チ ル change に つ い て SRY seat を containing む Y chromosome short end of the wrist か ら long end of the wrist ま で の Chromatin Immunoprecipitation (ChIP) Assay を line っ た. そ の as a result, the abnormal sexual differentiation syndrome patients の の decided, "sex differentiation institutions" の flaw に は, SRY but 伝 son の CpG island に お け る DNA メ チ ル inhibition, お よ び SRY プ ロ モ ー タ ー & HMG BOX の ヒ ス ト ン ア セ チ ル change に よ り SRY MRNA の abnormal 発 now が masato and し て い る こ と を see い だ し た. こ れ ら の sexual differentiation abnormal patients で は SRY の fine knowledge limited 発 parts now period, abnormal に が み ら れ, ま た, high rate of に 45. The karyotype of X と の モ ザ イ ク が masato even す る こ と か ら, at the beginning, "モ ザ イ ク な ど の cell number の 単 pure な reduce に with う SRY の sent 伝 son Decrease の "が masato and し て い る と scenarios し て い た が, be は, 発 born early よ り" 伝 son の high concentrations of SRY hold 続 発 now "が up こ り, そ の results, undifferentiated gonad か ら fine 巣 へ の 発 raw, differentiation ス イ ッ チ に handicap of が up こ り, basic で あ る type female に differentiation (egg 巣) し た と exam え ら れ た. こ の こ と は, sex differentiation abnormality Patients は の chromosomal abnormalities, abnormal sexual differentiation の reason で は な く, patients は yuan 々 エ ピ ジ ェ ネ テ ィ ク ス (ク ロ マ チ ン) anomalies such as の element for が あ り, そ の results, chromosome abnormality が lead き up こ さ れ た と も scenarios さ れ, abnormal sexual differentiation syndrome 発 disease agency に masato し, new た な study の started が expect さ れ る.

项目成果

Morphological analyses of sex differences and age-related changes in C3H mouse midbrain

C3H小鼠中脑性别差异和年龄相关变化的形态学分析

• 发表时间: 2009
• 期刊: The Journal of veterinary medical science 71
• 作者: Yu YC;Miki H;Matsuzaki Y;et al;Tanida
• 通讯作者: Tanida

Does paternal exposure to 2,3,7,8-tetraehlorodibenzo-p-dioxin (TCDD) affect the sex ratio of offspring?

父亲接触 2,3,7,8-四氯二苯并-对二恶英 (TCDD) 会影响后代的性别比吗？

• 发表时间: 2007
• 期刊: Journal of Veterinary Medical Science 69
• 作者: Min L;et al.;Suzuki T;Yoshioka et al.;Tin-Tin-Win-Shwe;Shinji Tsukahara;Shinji Tsukahara;Shinji Tsukahara;Ishihara K
• 通讯作者: Ishihara K

Ligand-dependent transcription of estrogen receptor alpha is mediated by the ubiquitin ligase EFP.

雌激素受体 α 的配体依赖性转录由泛素连接酶 EFP 介导。

• 发表时间: 2007
• 期刊: Biochemical and Biophysieal Research Communications 116(Epub ahead of print)
• 作者: Min L;et al.;Suzuki T;Yoshioka et al.;Tin-Tin-Win-Shwe;Shinji Tsukahara;Shinji Tsukahara;Shinji Tsukahara;Ishihara K;Nakajima A
• 通讯作者: Nakajima A

Activin A and eCG recover reproductive dysfunction induced by neonatal exposure to estrogenic endocrine disruptor in adult male mice

激活素 A 和 eCG 可恢复成年雄性小鼠新生儿暴露于雌激素内分泌干扰物引起的生殖功能障碍

• 发表时间: 2008
• 期刊: Biology of Reproduction 78
• 作者: Warita;K.;Okamoto;K.;Mutoh;K.;Hasegawa;Y.;Yue;Z-P.;Qi;W-M.;Kitagawa;H.;Sugawara;T. and Hoshi;N.
• 通讯作者: N.

Both N-terminal and C-terminal regions of steroid. sulphatase are important for enzyme activity.

类固醇的 N 末端和 C 末端区域。

• 发表时间: 2006
• 期刊: Journal of Endocrinology 188
• 作者: Yoshizaki T.;et al.;Sugawara T;Warita. K;Sugawara T
• 通讯作者: Sugawara T