IL-2/Il-2R複合体形成機構の構造生物学的基盤

IL-2/IL-2R复合物形成机制的结构生物学基础

• 批准号: 17053022
• 负责人: 池水 信二
• 金额: $ 2.18万
• 依托单位: Kumamoto University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 2005
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2005 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-17053022/
• 关键词: 蛋白質; 免疫学; 生体分子; 生物物理; シグナル伝達

細菌やウイルスなどの外部由来物質から、我々ヒトは免疫により守られている。外部由来物質を認識したT細胞は、インターロイキン(IL)-2およびIL-2受容体(R)を産生する。IL-2Rはα,β,γ鎖と呼ばれる3種類のサブユニットから構成されており、IL-2を介してヘテロ3量体を形成することにより、T細胞内に増殖シグナルを誘導する。この結果、抗原に特異的に応答するT細胞が増殖し、免疫応答を活性化する。IL-2は1980年代後半に結晶構造が解析されたが、IL-2Rの3つのサブユニットの構造は何れも未知であり、認識機構に関する構造生物学的知見は得られていなかった。そこで、3種類のIL-2Rの単独、およびIL-2/IL-2R複合体の結晶構造を明らかにし、IL-2とIL-2Rの認識機構を構造生物学的に解明することを思い立った。IL-2Rα細胞外ドメインのC末端にHis-tagを付加する様に遺伝子の改変を行い、大腸菌を用いた発現系を構築した.その後,Niカラム・ゲルろ過・イオン交換クロマトグラフィーにより精製を行った.IL-2RβおよびIL-2Rγの細胞外ドメインにはN型糖修飾部位が各々4ヶ所および6ヶ所あるため,CHO変異体細胞であるLec3.8.2.1(LecR)細胞を用いて発現することを計画した.LecR細胞が産生する蛋白質は,endoHを用いてNアセチルグルコサミンを1残基残して切除することが可能であり,結晶解析に適している.そこで,IL-2RβおよびIL-2Rγの細胞外ドメインの安定発現株をLecR細胞を用いて構築を行った.IL-2Rβについては,高発現株の選択・精製・結晶化を行い,微結晶を得た.IL-2Rγについては,高発現株の選択を終え,大量培養・精製法を確立した.

The bacteria are isolated from external sources, and we are immune to the disease. The external source is known as "T cell", "IL"-2 "IL-2 acceptor (R)". The IL-2R alpha, beta, gamma molecules are required to induce the growth of the tumor cells, and the IL-2 products are responsible for the growth of the body mass fraction of the body mass. The results of the test, the specific response of the antigen, the colonization of the cells and the activation of the immune response. In the second half of the 1980s, the results of the IL-2 analysis system, the IL-2R information system, the information system, and the knowledge of science and technology in the second half of the 1980s were analyzed. In recent years, three types of IL-2R genes have been isolated, and the IL-2/IL-2R complex has been successfully developed. The IL-2 IL-2R Institute is responsible for the understanding and thinking of biology. IL-2R α extracellular protein (ECR), C-terminal His-tag (C-terminal), and Agrobacterium tumefaciens were used in this study. After the treatment, Ni

项目成果

Lactoferrin Glu561Asp facilitates secondary amyloidosis in the cornea

• DOI: 10.1136/bjo.2004.056804
• 发表时间: 2005-06-01
• 期刊: BRITISH JOURNAL OF OPHTHALMOLOGY
• 影响因子: 4.1
• 作者: Araki-Sasaki, K;Ando, Y;Tanihara, H
• 通讯作者: Tanihara, H

Chromium(III) ion and thyroxine cooperate to stabilize the transthyretin tetramer and suppress in vitro amyloid fibril formation.

铬(III)离子和甲状腺素协同稳定转甲状腺素蛋白四聚体并抑制体外淀粉样原纤维的形成。

• 发表时间: 2006
• 期刊: FEBS Lett. 580(2)
• 作者: Sato T;Ando Y;Susuki S;Mikami F;Ikemizu S;Nakamura M;Suhr O;Anraku M;Kai T;Suico MA;Shuto T;Mizuguchi M;Yamagata Y;Kai H.
• 通讯作者: Kai H.