スキルス型癌の間質浸潤におけるリン酸化蛋白質の解析

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癌のなかでもスキルス型癌は間質組織への浸潤性がきわめて高く,腹膜播種をおこす難治性の癌である。本申請の目的は,主にスキルス型胃癌でその浸潤能と相関して活性化されている信号経路を蛋白質のリン酸化を指標として同定し,その信号経路を遮断することをスキルス型癌の治療に応用することである。マウスへの移植実験で高い浸潤能をもつスキルス型胃癌由来の細胞株を用い,特に癌細胞がヌードマウスにおいて腹膜播種してゆく過程で実際にチロシンリン酸化が亢進している蛋白質を同定する試みを行ってきた。その結果いくつかの分子を同定でき,そのひとつとして膜貫通型蛋白質でSrcキナーゼの基質であることが知られているCDCP1が,スキルス型胃癌細胞の移動能と足場非依存性増殖を規定していることを明らかにし,CDCP1の発現抑制により同スキルス型胃癌細胞の腹膜播種が阻害される事を示した。また,EPh受容体に対するリガンドであるephrinファミリーはヒト消化管の癌で高頻度に発現しており,そのうちephrin-B1は浸潤性の高い癌細胞で高発現がみられている。膵臓癌細胞ではephrin-B1の発現は実際にヌードマウスでの腹膜播種を促進した。Ephrin-B1め癌細胞の浸潤制御に関わる信号経路として,ephrin-B1のC末に依存した信号伝達がArf1の活性化を介してメタロプロテアーゼ(MMP)の細胞外分泌過程を促進するという新規機能がみられた。Ephrin-B1のC末を欠損させた変異体による同経路の遮断により,膵臓癌細胞の組織浸潤を抑制することが確認できた。一方で,受容体による刺激にともないephrin-B1の細胞内ドメインはチロシンリン酸化されるが,そのリン酸化を介した経路をephrin-B1のアミノ酸置換変異体の発現により遮断することでも,スキルス胃癌細胞のin vivoでの浸潤が阻害された