新規の細胞内膜融合機構p97/p37経路の解明

阐明新型细胞内膜融合机制 p97/p37 途径

• 批准号: 18050046
• 负责人: 近藤 久雄
• 金额: $ 3.84万
• 依托单位: Kyushu University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 2006
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2006 至 2007
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-18050046/
• 关键词: ゴルジ体; 小胞体; 膜融合; p97ATPase; p37; p47

我々が1997年に発見した細胞内膜融合機構p97/p47経路に加えて、この程新規膜融合機構p97/p37経路を発見することが出来た。試験管内ゴルジ体再構成系を用いてp37の機能を検討した結果、p37単独では膜融合能を呈せず、p97/p37複合体を形成すると膜融合を引き起こすことが分かった。この新規膜融合経路の分子機構は、p97/p47経路とは幾つかの重要な点で異なっていた。例えば、受容体としてsyntaxin5ではなくてGS15を必要とし、同時に小胞繋留装置p115-GM130複合体を必要とする。さらに興味深いことに、VCIP135を必要とするものの、その脱ユビキチン化活性は新経路では必要ではなかった。p37並びにp47の細胞での機能をsiRNAを用いて検討した所、p37とp47の発現の抑制はゴルジ体の小胞化に加えて小胞体の網状構造の断裂をもたらした。そこで、試験管内において小胞体の網状構造を再構成する我々の独自の系(試験管内小胞体再構成系)を確立して、それを用いてVCIP135の脱ユビキチン化活性について検討を加えた。具体的には脱ユビキチン化活性を持たないアミノ酸変異のVCIP135(変異VCIP135)を作成して、その働きを検討した。その結果、小胞体においては、p97/p37経路のみならず、p97/p47経路でも変異VCIP135が野生型VCIP135と同様に機能した。即ち、小胞体の形成維持では、ユビキチン化が関与しないことが強く示唆された。このことは、ゴルジ体と小胞体の形成維持における大きな違いであり、二つの細胞内小器官の形成維持のための分子機構の理解の大きな手がかりになると考えられる。

See my 々 が 1997 に 発 し た cell membrane fusion agency're/p47 経 road に plus え て, こ の Cheng Xingui membrane fusion agency're/p37 経 road を 発 see す る こ と が た. Test tube ゴ ル ジ body composition is を again with い て p37 の function を beg し 検 た results, p37 単 で alone can を は membrane fusion is せ ず,'re/p37 complex を form す る と membrane fusion を lead き up こ す こ と が points か っ た. The <s:1> <s:1> new regulations on the molecular structure of the membrane fusion pathway <e:1>, the と と of the p97/p47 pathway, several なって <e:1> important な points で and なって た た た. Example え ば, let body と し て syntaxin5 で は な く て GS15 を necessary と し, at the same time に vesicular 繋 leave device p115 - GM130 complex を necessary と す る. さ ら に tumblers deep い こ と に, VCIP135 を necessary と す る も の の, そ の ユ off ビ キ チ ン change active new 経 は road で は necessary で は な か っ た. P37 and び に p47 の cells で の function を siRNA を with い て beg し 検 た, p37 と p47 の 発 is の inhibit は ゴ ル ジ body の vesicular change に plus え て small cell body の reticular structure fracture を の も た ら し た. そ こ で, test tube に お い て small cell body の reticular structure を reconstitution す る I 々 の の is alone (small cell body composition test tube) を establish し て, そ れ を with い て VCIP135 の ユ off ビ キ チ ン change active に つ い て を 検 please add え た. Specific に は ユ off ビ キ チ ン change active を hold た な い ア ミ ノ acid - different の VCIP135 (- different VCIP135) を made し て, そ の 働 き を beg し 検 た. そ の results, small cell body に お い て は,'re/p37 経 road の み な ら ず,'re/p47 経 road で も - different VCIP135 が wild-type VCIP135 と with others に function し た. That is, ち, the formation of small cell <s:1> maintains で された, ユビキチ is related to が, and <s:1> な とが とが とが とが とが strongly く indicates された. こ の こ と は, ゴ ル ジ body と small cell body の form maintain に お け る big き な violations い で あ り, two つ の の form maintain intracellular small organs の た め の molecular institutions の understand の big き な hand が か り に な る と exam え ら れ る.

项目成果

p37 is a p97 adaptor required for Golgi and ER biogenesis in interphase and at the end of mitosis.

• DOI: 10.1016/j.devcel.2006.10.016
• 发表时间: 2006-12
• 期刊: Developmental cell
• 影响因子: 11.8
• 作者: K. Uchiyama;G. Totsukawa;M. Puhka;Y. Kaneko;E. Jokitalo;I. Dreveny;F. Beuron;Xiaodong Zhang;P. Freemont;Hisao Kondo

Contormational changes in the AAA ATPase p97-p4/ adaptor complex.

AAA ATPase p97-p4/接头复合物的构象变化。

• 发表时间: 2006
• 期刊: EMBO J 25
• 作者: Beuron F;et al.
• 通讯作者: et al.

Analysis of nucleotide binding to p97 reveals the properties of a tandem AAA hexameric ATPase

• DOI: 10.1074/jbc.m709632200
• 发表时间: 2008-05-16
• 期刊: JOURNAL OF BIOLOGICAL CHEMISTRY
• 影响因子: 4.8
• 作者: Briggs, Louise C.;Baldwin, Geoff S.;Freemont, Paul S.
• 通讯作者: Freemont, Paul S.

p97ATPase-mediated biogenesis of the Golgi and ER.Symposium Organelle assembly and dysfunction

p97ATP酶介导的高尔基体和内质网生物发生。研讨会细胞器组装和功能障碍

• 发表时间: 2007
• 作者: Shibano;T.;Taira M.;Suetake;I.;Kawakami;K.;Asashima;M.;Tajima;S.;Taira M.;近藤 久雄
• 通讯作者: 近藤 久雄

P97ATPaseによる細胞内膜融合とユビキチン

P97ATPase 的细胞内膜融合和泛素

• 发表时间: 2007
• 作者: Uchiyama K;et al.;近藤久雄
• 通讯作者: 近藤久雄