新しい細胞増殖調節因子の抗腫瘍剤としての応用

新型细胞生长调节剂作为抗肿瘤药物的应用

• 批准号: 63614519
• 负责人: 堀尾 武一
• 金额: $ 2.37万
• 依托单位: Osaka University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 1988
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1988 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-63614519/
• 关键词: 細胞増殖調節因子; 増殖阻害因子; 増殖因子; 細胞培養; 癌; 抗腫瘍剤; 化学療法; 精製

これまでに、正常ラットの肝臓由来の上皮性細胞株BRLと、腫瘍性形質転換細胞株RSV-BRLを標的細胞として種々の動物血清中の増殖阻害因子を検索した結果、ラットやマウスの血清には正常細胞に強い活性を示す増殖阻害因子が、また、兎の血清には癌細胞に対して強い増殖阻害活性を示す因子が存在することを見出している。本研究では、兎血清から2種の増殖阻害因子を精製し、その抗腫瘍性およびその他の性質を調べた。兎の血清には癌細胞に対して強い活性を示す、酸に不安定な増殖阻害因子(GI-A)と、酸で活性化され、正常細胞に対してより強い活性を示す増殖阻害因子(GI-B)が存在することを見出し、その両者を精製することができた。精製GI-Aは、分子量68,000の一本鎖蛋白質であり、その等電点(p1)は5.7であった。この因子は、酸だけでなく、6M GuHCl、6M尿素などの変性剤、および、95℃、5分の熱処理によって失活した。精製GI-Aは、BRLよりもRSV-BRLに対して強い増殖阻害活性を示し、RSV-BRLに対する50%増殖阻害濃度(1d_<50>)は約500ng/mlであった。GI-AはRSV-BRLだけでなく、SV40形質転換ヒト線維芽細胞B-32、ras形質転換マウス線維芽細胞ras-NIH3T3、ヒト肺腺癌細胞A549、ヒト口偏平上皮癌細胞HSC-4に対して増殖阻害活性を示したが、正常な上皮性細胞や線維芽細胞に対しては、殆ど活性を示さなかった。一方、酸で活性化される、GI-Bは、分子量13,000、Pl約9.2の一本鎖蛋白質であった。GI-BはRSV-BRLよりもBRLの増殖を強く阻害し、BRLに対するID_<50>は約1ng/mlであった。また、GI-Bは酸だけでなく、変性剤や熱に対して安定であった。以上の2種の増殖阻害因子のうち、特にGI-Aは抗腫瘍剤として有望と思われる。現在、これらの増殖阻害因子の構造解析と機能解析をさらに進めている。

The results showed that the proliferation inhibition factors in the serum of normal cells, liver derived epithelial cell lines BRL and tumorigenic epithelial cell lines RSV-BRL were present in the serum of normal cells and tumor cells. In this study, two kinds of growth inhibition factors were purified, and their anti-tumor properties and other properties were adjusted. The presence of GI-A, GI-B and GI-B in serum and in normal cells may result in the presence of GI-A, GI-B and GI-B in serum and in the presence of GI-A, GI-A and GI-B in normal cells. Refined GI-A, molecular weight 68,000 and a basic protein, Isoelectric point (p1) 5.7 This factor is inactivated by heat treatment at 95℃ for 5 minutes, 6M GuHCl and 6M urea. The purified GI-A and BRL showed strong growth inhibition activity against RSV-BRL, and the 50% growth inhibition concentration (1d_ ) against RSV-BRL <50>was about 500ng/ml. GI-A showed growth inhibition activity against RSV-BRL, SV40, ras, RAS-NIH 3T3, A549, HSC-4, normal epithelial cells and RAS-NIH 3T3. One side, acid activation, GI-B, molecular weight of 13,000, PI of about 9.2 and a lock protein. GI-B has strong resistance to RSV-BRL propagation, and BRL has ID_<50>. Gi-B is acid and stable. These two growth inhibitors, especially GI-A, are expected to resist tumor growth. Now, the structural analysis and functional analysis of these growth-inhibiting factors are progressing.

项目成果

K.Miyazaki: In Vitro.

K.宫崎：体外。

K.Miyazaki: Intracellular Protein Catabolism Japan Scientific Press,Tokyo.

K.宫崎：细胞内蛋白质分解代谢日本科学出版社，东京。

宮崎香: Biotherapy.

宫崎薰：生物疗法。

K.Mashima: J.Biochem.

K.Mashima：J.Biochem。